目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLCMS/MS)检测毛蕊花糖苷干预不育症模型大鼠血浆睾酮的含量,测定不育症模型大鼠血浆24 h睾酮含量,并借助药动学理论定量...目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLCMS/MS)检测毛蕊花糖苷干预不育症模型大鼠血浆睾酮的含量,测定不育症模型大鼠血浆24 h睾酮含量,并借助药动学理论定量评价干预效果。方法大鼠含药血浆以睾酮-C3为内标,用液液萃取法,以12000 r·min^(-1)离心10 min,取上清液,5μL进样分析。以Acquity UPLCⅢBEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱;以甲醇为流动相A、5 mL·L^(-1)甲酸溶液为流动相B进行梯度洗脱,洗脱程序:流速为0.2 mL∙min^(-1);柱温为35℃;样品室温度为4℃;运行时间为10 min;质量检测器使用ESI离子源,正模式检测,睾酮及内标睾酮-C3用于定量的母→子离子对分别为m/z 289.2→97.0、m/z 291.4→101.1。借助药动学软件分析,获取空白组和毛蕊花糖苷干预组大鼠体内24 h睾酮曲线下面积(area under the curve,AUC)数据。结果睾酮质量浓度在1~1000 ng·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系。该方法日内、日间精密度RSD值均<10.84%,日内、日间准确度RE均<10.03%,样品提取回收率为95.82%~99.17%,置于进样器于4℃冰箱及长期冷冻稳定性RSD值均<10.63%。测定结果显示,毛蕊花糖苷干预组药峰浓度(peak concentration,C_(max))为7.92 ng·mL^(-1),空白组C_(max)为10.26 ng·mL^(-1)。与空白组比较,毛蕊花糖苷干预组大鼠体内睾酮24 h总AUC相对平稳。结论建立了UPLC-MS/MS测定不育症模型大鼠血浆睾酮含量的方法。从PK/PD角度比较分析推测出,给予毛蕊花糖苷干预后,不育症模型大鼠的24 h总体睾酮可基本恢复正常水平,从而发挥改善大鼠雄性生殖功能的作用。展开更多
目的建立测定人血浆中维格列汀质量浓度的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)联用方法,考察空腹条件下维格列汀片的人体药动学特征。方法血浆样品经蛋白沉淀法处理,采用稳定同位素标记^(13)C_...目的建立测定人血浆中维格列汀质量浓度的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)联用方法,考察空腹条件下维格列汀片的人体药动学特征。方法血浆样品经蛋白沉淀法处理,采用稳定同位素标记^(13)C_(5)-^(15)N-维格列汀作为内标,采用Hypurity C_(18)(150 mm×2.1 mm,5μm)色谱柱分离,进行梯度洗脱,流动相为5 mmol·L^(-1)甲酸铵水溶液(A)-乙腈(B),流速为0.5 mL·min^(-1)。在正离子条件下选择多反应离子监测模式进行定量分析。将8名健康受试者采用随机双周期双交叉方式进行空腹试验,并通过WinNonlin 8.1软件计算药动学参数。结果人血浆中维格列汀在质量浓度1.11~534.00μg·L^(-1)内线性关系良好。批内和批间准确度偏差均在±15%以内,精密度相对标准偏差均小于15%。各基质内标归一化的基质因子相对标准偏差均小于5%,选择性、提取回收率、残留效应、稀释可靠性和稳定性均符合要求。结论所建立的方法符合生物样本分析要求,可用于人血浆中维格列汀质量浓度检测及其药动学研究。展开更多