组蛋白去乙酰化酶6介导血清饥饿条件下LC3B-Ⅱ的去乙酰化作用

自噬是哺乳动物细胞内控制错误折叠蛋白和受损细胞器降解的重要机制,营养、氨基酸以及细胞因子的缺乏均能诱导自噬.在自噬的信号通路中,一些自噬蛋白已被证明受到乙酰化修饰的调控,进而影响其催化活性的发挥.但是没有研究证明微管结合蛋白1轻链3(LC3)是否受到乙酰化调控.该研究证明了在血清饥饿诱导的自噬过程中,LC3B-Ⅱ的乙酰化程度大幅降低.HDAC6特异性抑制剂tubacin处理细胞后,LC3B-Ⅱ的乙酰化修饰程度随之升高.同时,血清饥饿条件下,抑制HDAC6的催化活性降低了自噬通路的降解能力.该研究结果表明在血清饥饿诱导的自噬过程中,LC3B-Ⅱ发生去乙酰化,其去乙酰化调控蛋白可能是HDAC6,抑制HDAC6的催化活性会减少自噬途径蛋白的降解.HDAC6介导的LC3乙酰化修饰为自噬降解和自噬蛋白调控的研究提供了新思路.

膈下逐淤汤增强自噬改善非酒精性脂肪肝病大鼠的实验研究

目的 基于自噬研究膈下逐淤汤治疗非酒精性脂肪肝病的作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为正常组,模型组,膈下逐淤汤低剂量组,膈下逐淤汤中剂量组,膈下逐淤汤高剂量组,每组8只。除正常组普通饲料加自来水喂养外,其余各组均高糖高脂饲料加5%红糖水喂养。6周末造模成功后,膈下逐淤汤低、中、高剂量组分别给予7.2g/(kg·d)、14.4g/(kg·d)、28.8g/(kg·d)膈下逐淤汤灌胃治疗,持续6周。取材前称取大鼠体重,剖腹取出肝脏称取肝脏重量,获得肝指数;肝脏病理切片HE染色和油红O染色观察肝脏病理变化;全自动生化仪检测大鼠血清血脂及肝功能(TG、TC、HDL-C、LDL-C、ALT、AST);免疫印迹实验(Western blot)检测肝组织自噬相关蛋白Beclin1、LC3B-II、P62蛋白表达;免疫组织化学法(INF)检测肝组织自噬相关蛋白ATG5、P62蛋白表达。结果 与正常组对比,模型组大鼠肝脏病理变化脂肪变性明显;肝指数、血清血脂(TG、TC、LDL-C)、肝功能(ALT、AST)、肝组织P62蛋白表达显著增高(P<0.05或P<0.01);血清HDL-C、肝组织Beclin1、LC3B-II、ATG5蛋白表达显著下降(P<0.05)。与模型组对比,膈下逐淤汤低、中、高剂量组大鼠肝脏病理变化脂肪变性明显减轻;肝指数、血清血脂(TG、TC、LDL-C)、肝功能(ALT、AST)、肝组织P62蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01);血清HDL-C、肝组织Beclin1、LC3B-II、ATG5蛋白表达显著增高(P<0.05或P<0.01)。结论 膈下逐淤汤可能通过增强肝组织自噬水平对非酒精性脂肪肝病起保护作用。