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题名微小隐孢子虫LCCL结构域基因的克隆及原核表达
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作者
宁良辰
张颖
赵权
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机构
吉林农业大学动物科技学院
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出处
《动物医学进展》
CSCD
北大核心
2013年第3期68-71,共4页
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文摘
为探讨微小隐孢子虫的入侵机制,克隆、表达了微小隐孢子虫LCCL结构域基因。从已构建的微小隐孢子虫cDNA文库中,采用PCR随机扩增LCCL结构域基因。与Pmd-18-T载体连接后,挑取阳性重组子测序分析。用基因重组技术将LCCL结构域基因克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,构建LCCL结构域基因的重组原核表达载体pGEX-4T-1-LCCL。重组质粒经酶切、测序鉴定后转入大肠埃希菌BL21中,IPTG诱导表达目的蛋白,并用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。最终得到了在大肠埃希菌中高效表达的重组蛋白,分子质量大小约为37ku,并且具有反应原性,为进一步研究微小隐孢子虫的入侵机制奠定了基础。
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关键词
微小隐孢子虫
lccl结构域基因
克隆
原核表达
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Keywords
Cryptosporidium parvum
lccl-domain gene
cloning.
prokaryotic expression
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分类号
S852.723
[农业科学—基础兽医学]
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