我国鸡传染性支气管炎病毒LD3/01/07的分离鉴定

将我国黑龙江省某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的濒死病鸡肾脏组织加PBS缓冲液后研磨 ,- 70℃ / 37℃反复冻融三次 ,离心并进行无菌过滤后接种 10日龄SPF鸡胚。 72小时取尿囊液进行电镜观察并用 1%胰酶处理 ,观察对鸡红细胞的凝集情况。结果发现尿囊液中存在典型的冠状病毒粒子 ,而且用胰酶处理过的尿囊液能够凝集SPF鸡的红细胞 ,初步鉴定为鸡的传染性支气管炎病毒 (InfectiousBronchitisVirus ,IBV)。将该病毒尿囊液在 10日龄SPF鸡胚上连续传 8代 ,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态特征、病毒在鸡胚中的增殖动态以及病毒凝集鸡红细胞的特性等对该毒株进行研究。结果表明 :该毒株的第一代尿囊液中病毒的滴度很高 ,可达到 8log2 ,且胚体表现轻度出血 ,但实质器官未见肉眼可见的病变 ;第二代病毒即可致胚体严重病变 ;病毒在鸡胚中随着接种病毒后时间的延长 ,其滴度逐渐增高 ;经 1%胰酶处理后的各代病毒尿囊液可凝集鸡红细胞。鸡胚的第三代病毒尿囊液 (命名为LD3/ 0 1/0 7)分别接种 1日龄和 30日龄的SPF鸡 ,发现对不同日龄的鸡表现不同的致病性 ,对 1日龄接种鸡和同笼饲养的对照鸡致病力高 ,发病率和致死率均为 10 0 % ,(接种和同居感染各 4只 ,均死亡 ) ,30日龄接种和同居感?