改良LDH释放法测定肝癌、慢性活动性肝炎患者外周血NK细胞活性

用ＬＤＨ释放法检测了５０例正常人、３５例肝癌及３１例慢性活动性肝炎（慢活肝）患者外周血ＮＫ细胞活性，其均值±标准差分别为３５．８％±５．６％、１５．８％±４．９％及１８．７％±６．２％，前者与后二者之间皆有非常显著差异（ｐ＜０．０１），表明肝癌及慢活肝患者体内免疫功能较正常人低。本文亦对ＬＤＲ释放法加以改进，提出效应细胞浓度为２．０×１０６／ｍｌ，孵育时间１６ｈ及酶促终止时间为５ｍｉｎ等条件，具有更稳定、简便、适合大批测定之优点。

流式细胞术和LDH释放法检测NK细胞杀伤效能的实用性比较

目的流式细胞术和乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测自然杀伤细胞(natural killer cell,NK细胞)体外杀伤功能的比较和优化。方法以人外周血PBMCS经体外诱导扩增的NK细胞为效应细胞,K562细胞作为靶细胞,按5:1、10:1、20:1、40:1效靶细胞比共培养,分别采用LDH法和流式细胞术检测靶细胞死亡率。结果在4个效靶细胞比实验组中,5:1效靶细胞比条件下LDH释放法检测的靶细胞死亡率显著低于CFSE/PI标记法,其他3个效靶细胞比组的两种方法检测结果无显著性差异。高效靶比、细胞毒作用较强时,LDH释放法的结果误差较大,可重复性不强。结论流式细胞术和LDH释放法检测NK细胞体外杀伤效能的最佳效靶细胞比为10:1。流式细胞术比LDH法灵敏度更高,稳定性更好;在效靶细胞比为10:1的实验条件下,LDH法可作为流式细胞术的替代方法。

用LDH释放法判断细胞病变程度确定干扰素生物活性

目的：应用ＬＤＨ释放法测定干扰素生物活性。方法：通过检测ＷＩＳＨ 细胞裂解后释放出的ＬＤＨ活性判断细胞病变的程度，确定干扰素效价。对ＬＤＨ 释放法进行改进，与结晶紫染色法和ＭＴＴ比色法进行灵敏度、重复性和相关性比较。结果和结论：该法减少了实验步骤和时间，成本低，敏感性高，重复性好，与其他方法所测结果无显著差异，简便实用，优于结晶紫染色法和ＭＴＴ比色法。

靶细胞LDH释放法用于比较晚期肿瘤病人和正常人NK活性

机体的自然杀伤活性(NK活性)是免疫监视的重要因素,同肿瘤的发生,发展关系密切。肿瘤患者的NK活性同正常人相比显著下降。目前,测定NK活性大多采用同位素标记,灵敏度高,易定量,但对设备要求也高,不易推广,而且靶细胞经标记后会导致自发释放升高。因此。

LDH释放法与形态学法测定细胞毒的对比研究

细胞介导的细胞毒试验不但能测定机体的细胞免疫功能,而且是探讨某些疾病的病理机制的重要手段。其测定方法有:同位素法、形态学法和酶释放法等,目前以前两者最常用。但同位素法因试剂、检验仪器和同位素污染等问题,其应用存在一定局限性;而形态学法往往需要两人同时进行双盲计数,费工费时;酶释放法克服了上述两种方法的主要缺点,但因其应用受靶细胞所含胞质酶的种类及量限制。

MTT法和LDH法检测T-AK细胞活性的研究

采用MTT比色分析法和LDH释放法检测了CD_3单克隆抗体和白细胞介素—2共同激活的T—AK细胞的杀伤活性,并对检测方法进行了改良。结果表明:T—AK细胞对K_(562)细胞有很高的杀伤活性;MTT法和LDH法经本研究改良后应用于细胞毒活性的检测,具有简便实用、方法稳定和结果可靠的特点;经对比观察,MTT法和LDH法的检测结果具有良好的相关性,但MTT法较LDH法敏感。

LDH法检测新城疫病毒野生株与疫苗株对大肠癌的体外杀伤作用

目的比较新分离的新城疫病毒野生株(NDV7793、NDVD817)与疫苗株Lasota对大肠癌的体外杀伤作用。方法3株病毒作用于大肠癌细胞株LS174T和LOVO,用乳酸脱氢酶微量释放法测定病毒的杀瘤活性并通过测定培养上清液的血凝效价来检测病毒的增殖能力。结果3株新城疫病毒均可杀伤大肠癌细胞并可在其复制增殖,对正常大肠细胞无明显细胞毒性。而对正常大肠组织细胞未见明显影响(P<0.05);野生株对癌细胞的杀伤作用较强,72h后对LOVO细胞株的杀伤效应>90%;LOVO大肠癌细胞对NDV敏感性强于LS174T大肠癌细胞。结论3株NDV对大肠癌细胞均有选择性杀伤作用,野生株病毒的抑瘤效应强于疫苗株,对正常大肠组织无细胞毒性。

简易自然杀伤试验——LDH释放改良法

自然杀伤试验作为体外细胞介导细胞毒试验,已从基础免疫学研究逐渐应用于对肿瘤、免疫性疾病及病毒感染性疾病的动态研究。为便于在临床上普及应用,一个简易、快速、稳定的常规检测方法是尚待解决的问题。 自然杀伤试验测定方法较多,常用者有形态学法、同位素法、酶释放法等。同位素法有客观指标、微量、敏感。

肿瘤患者自然杀伤细胞活性水平及其临床意义

目的 研究恶性肿瘤患者外周血自然杀伤 (NK)细胞活性及其临床意义。方法 采用LDH释放法对 43名健康成年人及 2 6 7例肿瘤患者进行了外周血NK细胞活性测定。结果 恶性肿瘤患者NK细胞活性显著低于正常对照组 (P <0 .0 0 1)。伴转移患者NK细胞活性降低更明显 ,与不伴转移者相比 ,差异显著 (P <0 .0 0 0 5 )。化疗及放疗后NK细胞活性显著降低 (P <0 .0 1) ,而IL 2治疗后NK细胞活性显著升高 (P <0 .0 1) ,但低于正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 NK细胞活性显著降低与恶性肿瘤发生、发展及转移相关 ,监测NK细胞活性有助于评价肿瘤患者治疗过程中的免疫功能。

人淋巴细胞转移因子对银屑病患者自然杀伤细胞活性的影响

本文用ＬＤＨ释放法测定了应用转移因子前后的银屑病患者外周血ＮＫ细胞活性，结果显示转移因子能显著地提高其ＮＫ细胞的杀伤活性，揭示了转移因子对银屑病患者细胞免疫功能的调节作用，佐证了其临床应用价值。同时讨论了转移因子对银屑病患者ＮＫ细胞的作用机制。

TNFα影响LAK细胞、化疗药物抗胃癌作用的实验研究

本文观察了TNFχ对LAK细胞、化疗药物抗胃癌作用的影响,探讨TNFχ联用IL-2/LAK、化疗药物以提高其单独应用的抗胃癌效应。

二花脸猪某些免疫指标的测定与分析

采用LDH释放法和MTT比色法,对来自三个家系的15头二花脸猪NK细胞活性和T淋巴细胞转化率分别进行测定,结果表明,同一个体中这两项指标无明显相关,家系间这两项指标差异不显著。

丹参和胸腺肽对银屑病患者NK细胞活性影响的研究

为探讨丹参和胸腺肽对银屑病患者NK细胞活性的影响,我们用LDH释放法和酶标仪,在体外测定了经丹参和胸腺肽诱导后的银屑病患者NK细胞的活性。结果表明:丹参和胸腺肽能明显增强NK细胞的活性。此结果为该药临床使用提供了科学依据。

灵丹王养肝胶囊对辐射损伤小鼠NK细胞活性的影响

目的:观察灵丹王胶囊对辐射损伤小鼠NK细胞活性的影响。方法:采用LDH释放法测定NK细胞活性。结果:灵丹王胶囊可明显提高辐射损伤小鼠的NK细胞活性。结论:灵丹王胶囊可调节辐射损伤所致的机体免疫功能下降。