LXR-IDOL-LDLR轴在脂质平衡中作用研究进展

[目的]综述新近发现的IDOL蛋白(Inducibledegrader of the low-density lipoprotein receptor)对低密度脂蛋白受体(low-densitylipoprotein receptor,LDLR)调节作用及肝X受体(LXR)-IDOL-LDLR轴在脂代谢平衡稳态中作用的研究进展。[方法]查阅近年来国内外研究IDOL及LXRIDOL通路的相关文献,并归纳总结其在脂代谢中的作用。[结果]IDOL能在转录后水平介导LDLR及其家族其他成员(VLDLR、ApoER2)的泛素化降解,该作用独立于固醇调节元件结合蛋白(SREBP)途径且受LXR的调节。[结论]LXR-IDOL通路能通过IDOL依赖途径泛素化降解LDLR,调节LDLR水平及LDL摄取,从而在脂代谢平衡中发挥重要作用。LXR-IDOL-LDLR轴可能为脂质代谢紊乱及心血管疾病提供新的潜在治疗靶点。

LDLR基因AvaⅡ位点多态性与高甘油三酯血症的相关性

研究了LDLR基因外显子13中AvaⅡ位点多态性在宁夏回族自治区正常回、汉族人群及高甘油三酯血症患者中的分布频率,分析探讨了该位点多态性是否存在于宁夏回、汉族居民中,以及基因型与甘油三酯含量之间的相关性.应用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法,对214例健康样本(回族102例,汉族112例)和212例高甘油三酯血症患者样本(回族88例,汉族124例)的低密度脂蛋白受体(LDLR)基因的多态性进行了检测.结果发现,在宁夏地区回、汉族人群中存在着AvaⅡ多态性位点,回、汉族居民间存在着明显差异,健康人群与高甘油三酯血症人群之间该位点基因型存在着显著差异.由此说明,AvaⅡ多态性位点可以作为宁夏回、汉族的遗传标记,而且该位点与高甘油三酯血症有相关性.

低密度脂蛋白受体基因表达调控研究

低密度脂蛋白受体(LDLR)调节体内胆固醇的平衡是通过其启动区的固醇调节元件(SRE)感受体内胆固醇的变化,从而调控LDLR基因的表达来实现的。胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)、SREBP裂解蛋白(SCAP)参与这一调节。LDLR基因的表达还受到HMG-CoA还原酶抑制剂、激素、细胞生长因子等因素的影响。

LDL、oxLDL对THP-1巨噬细胞PCSK9、LDLR表达的影响研究

为研究低密度脂蛋白(LDL)、氧化修饰的低密度脂蛋白(oxLDL)对THP-1源性巨噬细胞中PCSK9、LDLR表达的影响及两者之间的关系.分别用0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的LDL和0mg/L、10mg/L、20mg/L、30mg/L的oxLDL处理THP-1巨噬细胞,油红O染色检测细胞荷脂情况,免疫荧光检测THP-1巨噬细胞上PCSK9蛋白表达及分布情况,RT-PCR、Western blot检测THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达.结果发现,不同浓度LDL处理THP-1巨噬细胞后,随着LDL浓度的增大,细胞内脂滴数目略有增多.免疫荧光染色发现,PCSK9在THP-1巨噬细胞上的表达随LDL浓度的增加而增多,胞浆内定位于某一特定细胞器中;RT-PCR、Western blot检测发现,LDL可以呈浓度依赖性下调THP-1巨噬细胞中LDLR的表达和上调PCSK9的表达.不同浓度oxLDL处理THP-1巨噬细胞后,随oxLDL浓度的增大,脂滴颗粒明显增加;oxLDL处理对THP-1巨噬细胞上PCSK9、LDLR mRNA、蛋白质的表达影响均不明显.研究结果表明:THP-1巨噬细胞上,同时有PCSK9和LDLR的表达,且PCSK9定位于胞浆中某一特定细胞器;oxLDL对THP-1巨噬细胞LDLR和PCSK9表达没有影响;LDL能够降低THP-1巨噬细胞表面LDLR的表达,同时上调PCSK9表达,初步说明在THP-1巨噬细胞中,两者有一定的相关性.

PCSK9/LDLR通路介导姜黄素烟酸酯促进HepG2摄取脂质

为研究PCSK9/LDLR通路介导姜黄素烟酸酯(CurTn)降低血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),减少动脉内膜下脂质沉积的分子机制,用5、10、15μmo/L姜黄素烟酸酯与25 mg/L LDL共孵育Hep G2细胞24 h,分别采用油红O染色、胆固醇荧光定量试剂盒、Di I-LDL摄取检测细胞内胆固醇含量及LDL摄取情况,用逆转录定量聚合酶链反应(RT-Q-PCR)检测LDLR及SREBP2的m RNA表达,蛋白质印迹检测LDLR、SREBP2及PCSK9蛋白表达.随姜黄素烟酸酯作用浓度的增高细胞内脂滴显著增多,细胞内游离胆固醇(FC)、总胆固醇(TC)含量增高,细胞内胆固醇摄取增多;RT-Q-PCR和蛋白质印迹检测发现,与对照组(Control)比较,5、10、15μmo/L姜黄素烟酸酯处理组LDLR蛋白表达增高,SREBP2 mRNA表达水平升高,PCSK9蛋白表达降低,但对LDLR mRNA及SREBP2蛋白表达无影响.结果表明:姜黄素烟酸酯通过降低PCSK9、减少LDLR降解、升高LDLR蛋白表达,促进HepG2细胞胆摄取胆固醇.初步说明CurTn可能通过抑制PCSK9介导LDLR溶酶体降解,促进肝脏清除血浆LDL-C水平.

家族性高胆固醇血症研究进展

家族性高胆固醇血症(FH)是一种常染色体遗传病,是脂质代谢通路中低密度脂蛋白受体(LDLR)、载脂蛋白B(ApoB)或前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(PCSK9)基因突变导致血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高所致。FH的危害远高于普通的高胆固醇血症,其中纯合型FH可导致患者在20岁之前就会发展成冠心病,寿命一般不超过30岁;杂合型FH患者若不进行及时治疗,通常男性在55岁之前,女性在60岁之前会发展成冠心病。未进行他汀治疗的FH患者冠心病的发病风险较普通人群增加13倍甚至更高。我国杂合型FH患者预计有260~650万例。尽管他汀类药物等降脂治疗已明确能延缓或防止FH患者心脑血管疾病的发生,但由于很多患者在早期不知道自己患FH,或是知道血脂异常但不了解此病危害,导致大量患者治疗延误,往往直到发生心脑血管疾病才开始降脂治疗,给家庭及社会带来沉重负担。鉴于以上原因,本研究梳理了FH流行病学、遗传学研究的进展,指出采用适当的筛查手段在中国开展血脂筛查,并对可能的FH患者进行基因诊断,尽早发现及精准管理高风险患者是改善FH管理的重要手段。

KIF16B可能参与LDLR在体外培养的肝细胞膜上的分布

目的探究驱动蛋白超家族成员16B(KIF16B)在低密度脂蛋白受体诱导降解蛋白(IDOL)调节肝细胞摄取低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)中的作用。方法干扰/过表达IDOL(RNAi/OE-IDOL)的慢病毒感染HepG2和LO2细胞,通过倒置荧光显微镜来观测病毒感染效果;油红O染色观察细胞内脂质蓄积水平;DiI荧光染料标记的LDL(DiI-LDL)摄取实验检测肝细胞对LDLC的摄取能力,流式细胞术检测肝细胞表面低密度脂蛋白受体(LDLR)丰度;Western blot检测IDOL、KIF16B及LDLR蛋白的表达变化,并免疫共沉淀进一步检测蛋白之间的相互作用。结果两种感染慢病毒的肝细胞内均显示绿色荧光,提示RNAi/OE-IDOL的慢病毒已感染HepG2和LO2细胞;与无慢病毒感染的Control组比较,OE-IDOL组的细胞内脂质含量显著减少(P<0.05),LDLC的摄取显著减弱(P<0.05),且肝细胞表面LDLR丰度显著降低(P<0.01);RNAi-IDOL组的细胞内脂滴含量显著增加(P<0.01),LDLC摄取增强,且肝细胞表面LDLR丰度显著增高(P<0.01);与慢病毒载体的Control组比较,RNAi-IDOL组LDLR蛋白和KIF16B蛋白的表达升高(P<0.01),且KIF16B与LDLR的相互作用增强;OE-IDOL组LDLR蛋白和KIF16B蛋白的表达降低(P<0.05),LDLR与KIF16B相互作用随之减弱。结论IDOL调节的肝细胞摄取LDLC的过程可能与KIF16B跟LDLR之间存在相互作用有关。

额尔敦-乌日勒对AS家兔肝低密度脂蛋白受体(RDLR)表达的影响

目的:观察额尔敦-乌日勒对实验性动脉粥样硬化家兔肝脏低密度脂蛋白受体(LDLR)表达的影响。方法:采用喂饲高脂饲料建立家兔AS模型,将60只家兔随机分为正常对照组,模型组,额尔敦-乌日勒高、中、低剂量组和辛伐他汀组。实验结束后,采用实时定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)方法检测肝脏LDLR mRNA的表达。结果:与模型组比较,额尔敦-乌日勒高、中剂量组肝脏LDLR mRNA的表达明显升高(P<0.05)。结论:额尔敦-乌日勒可升高肝脏LDLR的表达,从而起到抗动脉粥硬化作用。

过继骨髓细胞通过分化为NKT细胞并增加自身脂质含量减轻小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝病肝损伤

目的 探讨骨髓细胞过继对于小鼠代谢功能障碍相关脂肪性肝病(MAFLD)的治疗作用,并探索起主要作用的细胞群体。方法 HE染色检测蛋氨酸-胆碱缺乏(MCD)诱导的C57BL/6小鼠MAFLD肝组织病变并通过检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平评估骨髓细胞过继对MAFLD的治疗作用。实时定量PCR检测T细胞、自然杀伤T(NKT)细胞、 Kupffer细胞等肝脏免疫细胞的低密度脂蛋白受体(LDLR)和白细胞介素4(IL-4) mRNA表达。羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记的骨髓细胞经小鼠尾静脉注射,采用冰冻切片观察肝组织CFSE+细胞比例,流式细胞术追踪CFSE+细胞在肝、脾组织的比例。流式细胞术检测CFSE+的过继细胞CD3、 CD4、 CD8、 NK1.1、 CD11b、粒细胞受体1(Gr-1)的表达确定其分化情况。尼罗红脂质染色评估肝组织NKT细胞胞内脂质含量。结果 骨髓细胞过继输入的MAFLD小鼠肝组织损伤明显减轻、血清ALT、 AST水平降低。同时,肝脏免疫细胞上调其IL-4和LDLR的表达。LDLR敲除小鼠给予MCD饮食后引发更严重的MAFLD。骨髓细胞过继细胞治疗效果显著并分化出更多的NKT细胞定殖在肝脏,同时该群NKT细胞胞内脂质显著增多。结论骨髓细胞过继治疗通过分化更多的NKT细胞,同时通过提高该群细胞的胞内脂质含量从而减轻MAFLD小鼠肝损伤。

田蓟苷对高脂饮食ApoE^(⁃/⁃)小鼠抗动脉粥样硬化活性及作用机制

目的探讨田蓟苷对高脂饮食ApoE^(⁃/⁃)小鼠抗动脉粥样硬化活性及作用机制研究。方法将ApoE^(⁃/⁃)小鼠60只随机分为普通饮食组,高脂饮食组,田蓟苷低、中、高剂量组(40、120、200 mg/kg)和阿托伐他汀给药组(15 mg/kg),1次/d,连续给药12周后,收集小鼠血清,检测其中TC(总胆固醇)、TG(甘油三酯)、HDL⁃C(高密度脂蛋白胆固醇)、LDL⁃C(低密度脂蛋白胆固醇)、ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)、TBA(总胆汁酸)和FBG(空腹血糖)水平。通过油红O染色对各组小鼠主动脉进行染色,并计算主动脉斑块面积占总血管面积之比。采用Western blot检测各组小鼠肝脏组织中PI3K(磷脂酰肌醇3⁃激酶)、p⁃PI3K、AKT(蛋白激酶B)、p⁃AKT、SREBP⁃2(固醇调节元件结合蛋白2)、LDLR(低密度脂蛋白受体)蛋白表达。结果与普通饮食组比较,高脂饮食组ApoE^(⁃/⁃)小鼠血清中TC、TG、LDL⁃C和FBG水平均升高,而HDL⁃C和TBA水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与高脂饮食组比较,田蓟苷高剂量组和阿托伐他汀组ApoE^(⁃/⁃)小鼠血清TC水平降低,田蓟苷高剂量组血清TG水平降低,田蓟苷低、中、高剂量组和阿托伐他汀组血清LDL⁃C水平均降低、主动脉斑块的沉积减少,田蓟苷高剂量组和阿托伐他汀给药组小鼠肝脏组织中p⁃PI3K、p⁃AKT、SREBP⁃2和LDLR蛋白表达升高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论田蓟苷可降低高脂饮食ApoE^(⁃/⁃)小鼠血脂代谢水平,减少主动脉斑块沉积,可能与调节肝脏中SREBP⁃2和LDLR蛋白表达有关,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。

海洋胶原低聚肽的血管舒张和降胆固醇作用

对海洋胶原低聚肽的血管舒张和降胆固醇作用进行了研究。通过测定海洋胶原低聚肽作用下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的一氧化氮(NO)分泌量,对海洋胶原低聚肽的血管舒张活性进行了考察。结果显示,各实验组细胞在海洋胶原低聚肽的作用下,NO分泌量均有所增加,并且呈明显的量效关系。海洋胶原低聚肽浓度为12 g/L时,NO含量增加最多(P<0.01)。不同浓度海洋胶原低聚肽作用2h后,NO分泌量均比作用1h有所降低。通过观察人肝癌细胞株HepG2中低密度脂蛋白受体(LDLR)和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)表达的变化,对海洋胶原低聚肽的降胆固醇作用进行了研究。结果显示,细胞培养24 h后,除2 g/L海洋胶原低聚肽组外,LDLR的表达量均有上调(P<0.05或P<0.01),其中4g/L海洋胶原低聚肽组的LDLR mRNA表达增加最多,呈极显著性差异(P<0.01);各实验组HMGCR的表达量均有下调,并有统计学差异(P<0.05或P<0.01),其中6 g/L海洋胶原低聚肽组的HMGCR mRNA表达最低。海洋胶原低聚肽具有促进血管舒张、降低胆固醇的作用。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对体外人滋养层细胞孕酮分泌的影响

目的:探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对人早孕绒毛滋养层细胞孕酮(P)的合成和调节 作用。方法:将胰蛋白酶和胶原酶联合消化人早孕绒毛滋养组织,Percoll密度梯度分离纯化后得 到的人早孕胎盘滋养层细胞进行原代培养。以终浓度为0.1μg/L、1μg/L、10μg/L、100μg/L IGF-I分 别对其作用12h,以及100μg/L浓度IGF-I作用12h、24h、48h、72h时,放免法检测滋养细胞 分泌P 的含量,RT-PCR法检测低密度脂蛋白受体(LDLR)mRNA的表达。结果:滋养层细胞P 的 分泌量随着IGF-I的浓度升高而增加;同时100μg/L浓度的IGF-I作用于滋养层细胞12h 后,P 分泌开始增加,48h达到高峰,以后逐渐下降。半定量RT-PCR均显示LDLRmRNA阳性条带,且表 达规律与P一致。结论:滋养层细胞P的分泌具有对IGF-I的时间和浓度依赖性,并且IGF-I能 上调LDLRmRNA的表达,对促进滋养细胞P分泌的调节起重要作用。

家族性高胆固醇血症(FH)致病基因的研究进展

家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)的临床特征为血总胆固醇升高,尤其是低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-c)升高,沉积于组织,形成皮肤或肌腱黄色瘤,导致动脉粥样硬化甚至早发冠心病。FH的发病机制为LDL受体(LDL receptor,LDLR)或apoB基因突变引起LDL受体途径功能缺陷,主要为常染色体显性遗传疾患,具有基因剂量效应;部分患者为常染色体隐性遗传,机制为LDL受体衔接蛋白1(LDL receptor adaptor protein 1,LDLRAP1)失功能型突变,导致LDL内化活性降低。罕见的人类枯草溶菌素转化酶9(proprotein convertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)发生功能型突变也可引起严重的FH表型。PCSK9通过降解LDLR蛋白间接下调LDL受体途径,其失功能突变可致血浆LDL水平下降。因此PCSK9是目前降脂药物的研究热点。

补肾益气方对流产大鼠胎盘孕酮生成通路的影响

目的:探讨补肾益气方对流产大鼠胎盘孕酮生成通路中相关重要上游因素低密度脂蛋白受体(LDLR)、细胞色素P450链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的影响及其与孕酮(P)分泌的关系。方法:溴隐亭皮内注射法建立流产大鼠模型,分别于孕1-8 d、1-11 d灌服补肾益气方药,黄体酮肌注作为阳性对照组,采用放免法测定大鼠血清P水平;RT-PCR技术检测LDLR、P450scc、3β-HSD在不同组动物胎盘中的mRNA表达。结果:模型组LDLR、P450scc、3β-HSD mRNA表达较正常对照组明显降低;中药组及黄体酮组不同程度提高模型大鼠胎盘LDLR、P450scc、3β-HSD mRNA表达,表达强度随孕天和给药时间逐渐升高,与血P有显著相关性。结论:补肾益气方清热益气、固肾安胎,能调控胎盘滋养细胞LDLR、P450scc、3β-HSD基因表达,促进孕激素合成分泌增加,从而达到保胎维持妊娠的目的。

PCSK9基因功能及影响因素的研究进展

血清胆固醇升高是心血管疾病的主要诱因之一,降脂药物他汀类属临床一线治疗药物,但存在肝损害、肌溶解等副作用。目前,前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶/kexin 9型(PCSK9)已成为新式降脂作用靶点,有研究表明,PCSK9基因可通过多种途径调节循环血液中LDL-C水平,其过程主要依靠低密度脂蛋白受体(LDLR)的存在。PCSK9功能获得性突变(GOF)与高胆固醇血症和心血管不良事件发生有关;相反,PCSK9功能丧失性突变(LOF)导致血LDL-C水平降低,从而降低人群罹患心血管疾病的风险。笔者就PCSK9基因的功能及影响因素综述如下。

双蓣调脂汤对高胆固醇血症模型大鼠肝组织HNF1α/PCSK9/LDLR信号通路的影响

目的:观察高胆固醇血症大鼠肝组织中肝细胞核因子1α(HNF1α),前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶kexin 9型(PCSK9),低密度脂蛋白胆固醇受体(LDLR)的表达水平,探讨双蓣调脂汤调节胆固醇代谢、缓解高胆固醇血症的作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机抽取8只为正常组予普通饲料喂养,其余32只予高脂饲料喂养,高胆固醇血症模型造模成功后,分为模型组,双蓣调脂汤低剂量组(7.8 g·kg^(-1)),双蓣调脂汤高剂量组(15.6 g·kg^(-1)),辛伐他汀组(4 mg·kg^(-1)),每组8只,连续灌胃给药8周。生化法检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织病理形态学变化;免疫组化检测大鼠肝组织中PCSK9和LDLR的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝组织HNF1α,PCSK9和LDLR mRNA与蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清TC,TG,LDL-C水平显著升高(P<0.01),肝脂肪变性明显,HNF1α,PCSK9 mRNA与蛋白表达水平明显上升(P<0.05),LDLR mRNA与蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,双蓣调脂汤高剂量组大鼠血清TC,TG,LDL-C水平显著降低(P<0.01),双蓣调脂汤低剂量组和辛伐他汀组大鼠血清TC,LDL-C水平明显降低(P<0.05,P<0.01),各给药组HDL-C水平没有明显变化,各治疗组肝脂肪变性明显改善,各治疗组大鼠肝脏HNF1αmRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),双蓣调脂汤低、高剂量组大鼠肝脏PCSK9 mRNA与蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),辛伐他汀组大鼠肝脏PCSK9 mRNA水平显著升高(P<0.01),蛋白表达水平呈降低趋势,各治疗组大鼠肝脏LDLR mRNA水平显著升高(P<0.01),双蓣调脂汤高剂量组大鼠肝脏LDLR蛋白表达水平显著升高(P<0.01),双蓣调脂汤低剂量组和辛伐他汀组大鼠肝脏LDLR蛋白表达量呈升高的趋势,免疫组化结果显示各治疗组PCSK9阳性表达减弱,LDLR阳性表达增强。双蓣调脂汤高剂量组的治疗效果略优于辛伐他汀组,双蓣调脂汤低剂量组的治疗效果与辛伐他汀组比较,差异无统计学意义。结论:双蓣调脂汤可能通过HNF1α/PCSK9/LDLR信号通路降低血脂水平,在调节胆固醇代谢和减轻大鼠高胆固醇血症中发挥积极作用。

田蓟苷对高脂饮食小鼠血脂代谢的改善作用及肠道菌群的影响

目的初步探讨田蓟苷改善高脂饮食小鼠血脂代谢的作用机制。方法将60只C57BL/6J小鼠随机分为对照组、高脂饮食组及田蓟苷低、中、高剂量给药组(50、100、200mg/kg)和阿托伐他汀给药组(10mg/kg),每组10只,连续给药12周后,检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平。采用Western Blot法检测各组小鼠肝脏组织中SREBP-2和LDLR蛋白表达。通过16SrDNA基因实时荧光定量PCR法检测各组小鼠肠道菌群变化。结果与对照组相比,高脂饮食组小鼠血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平明显升高(t=-3.966,P=0.001;t=-3.438,P=0.003;t=3.811,P=0.001;t=-6.591,P<0.001),肝脏中SREBP-2和LDLR蛋白表达明显下调(t=7.198,P<0.001;t=8.892,P<0.001)。与高脂饮食组相比,田蓟苷高剂量给药组和阿托伐他汀给药组小鼠血清TC、LDL-C水平明显降低(TC:t=2.483,P=0.023;t=3.300,P=0.004。LDL-C:t=2.535,P=0.021;t=3.836,P=0.001),肝组织中的SREBP-2和LDLR蛋白水平明显上调(SREBP-2:t=-2.188,P=0.042;t=-3.317,P=0.007。LDLR:t=-2.649,P=0.016;t=-2.249,P=0.037)。与对照组相比,高脂饮食组小鼠肠道中厚壁菌门水平明显升高(t=-2.287,P=0.047),而拟杆菌门、双歧杆菌属、乳杆菌属、嗜黏蛋白阿克曼菌和普拉梭菌水平明显降低(t=3.127,P=0.006;t=2.737,P=0.014;t=3.542,P=0.002;t=3.491,P=0.003;t=2.780,P=0.012)。与高脂饮食组相比,田蓟苷高剂量给药组小鼠肠道中拟杆菌门、乳杆菌属和嗜黏蛋白阿克曼菌水平明显升高(t=-2.613,P=0.020;t=-2.558,P=0.024;t=-2.109,P=0.049)。结论田蓟苷改善高脂饮食诱导的血脂代谢紊乱可能与肝脏中SREBP-2和LDLR蛋白表达及肠道菌群结构变化有关,但其机制仍需进一步研究。

PCSK9单抗生物学活性测定方法的建立

目的：建立前蛋白转化酶枯草溶菌素9（PCSK9）单抗的生物学活性检测方法。方法：利用系列稀释的PCSK9单抗以剂量依赖性方式阻断PCSK9与低密度脂蛋白受体（LDLR）结合,增加低密度脂蛋白（LDL）在Hep G2细胞内摄取率,通过BODIPY类荧光染料标记低密度脂蛋白（BODIPY-LDL）检测胞内荧光强度来反映PCSK9单抗的生物学活性,并用PCSK9单抗参比品计算供试品相对百分效价。结果：PCSK9、PCSK9单抗参比品及供试品在该方法中均存在量效关系,且符合四参数方程式：Y=（A-D）/[1＋（X/C）B]＋D。利用该法对4批PCSK9单抗供试品进行检测,每批供试品重复试验3次,PCSK9单抗的相对百分效价的平均值在94.25%~110.77%之间,变异系数均小于15%。结论：该方法灵敏度高、重复性好、结果准确,可作为PCSK9单抗生物学活性测定的常规检测方法。

家族性高胆固醇血症的研究进展

家族性高胆固醇血症(familial hypercholesterolemia,FH)是一种常染色体显性遗传性疾病,基因变异是该病发病的重要原因之一。其临床常见特征主要是血浆低密度胆固醇(LDL-C)升高,皮肤/肌腱黄瘤的出现和早发冠心病(CAD)。FH患者患CAD风险极高,因此早期做出正确诊断并同时给予适当治疗控制LDL-C水平是至关重要的,这些成为全世界亟待解决的问题,本文对目前国内外FH致病的变异基因,FH的诊断标准、治疗目标及治疗方法的研究进展做了相关的综述。