龙眼LEAFY同源基因片段的克隆和表达

研究克隆的龙眼(Dimdcarpus Longan Lour.)LFY同源基因(LLFY)保守区片段在不同组织器官以及“冲梢”逆转成的营养芽中的表达情况,为进一步鉴定龙眼LFY同源基因的功能及分析其在龙眼花序的“冲梢”过程中的作用机理奠定基础。根据不同物种LEAFY同源基因保守区序列设计简并引物,从“红核子”龙眼(D.longan Lour.cv.Red Seed)中克隆了425bp的cDNA片段。同源性比较结果表明,获得的序列为龙眼LEAFY同源基因(LLFY);同时还获得了1816bp的LLFY基因组序列片段并进行了序列分析。通过RT-PCR研究LLFY在6种龙眼不同组织器官的表达发现LLFY在花序芽和花芽中的表达量最高,叶芽中有微量表达,叶片和茎段中没有表达;在“冲梢”逆转成的营养芽中,LLFY的表达量明显高于叶芽。

巨峰葡萄花芽分化过程中成花基因LEAFY的表达

目的:研究LEAFY基因在巨峰葡萄花芽分化期间的表达差异,为实际生产提供理论依据。方法:用半定量RT-PCR方法研究LEAFY基因在巨峰葡萄花芽分化期间的表达。结果:LEAFY基因的表达量在所研究的8个时期内有明显差异,在5叶期、6叶期、7叶期、8叶期的表达量相对较高。结论:根据成花基因LEAFY表达上的差异,可以人为地提前或延迟巨峰葡萄的花期。

荠菜LEAFY同源基因的克隆与进化分析

LEAFY同源基因是高等植物花的分生组织分化的重要调节基因。根据已发表的LEAFY同源基因序列保守区设计引物,以荠菜(Capsellabursa-pastoris(L.)Medic.)基因组DNA序列为模板,克隆了一条长2866bp的LEAFY同源基因。序列分析表明,该基因含有3个外显子和2个内含子,外显子编码424个氨基酸组成的多肽。其单个外显子核苷酸序列与拟南芥(Arabidopsisthaliana)LEAFY基因同源性在90%以上,氨基酸序列同源性为86%,而与琴叶拟南芥(Ara-bidopsislyrata)的氨基酸序列同源性高达90%。不同植物物种的LEAFY同源氨基酸序列在C端高度保守,而N端则有较大程度的变异。3个外显子进化速率不同可能是由于所受选择压力不同所致。存在于荠菜CapLFY基因346位上的精氨酸突变可能是造成荠菜两种生态型花期不同的原因。

小滨菊LEAFY同源基因的克隆和结构分析

LEAFY (LFY)同源基因是控制植物由营养向生殖生长转变的关键基因,在植物花发育过程中发挥重要作用。LFY基因在被子植物中的低拷贝及丰富的变异使其成为解决物种间系统关系的一个代表性基因。本研究通过基因组PCR扩增,获得了小滨菊LFY同源基因LeFL共5个序列。小滨菊LeFL基因的序列长度均为2 764 bp,与甘菊DFL基因的核苷酸同源性为80.66%,包含3个外显子和2个内含子。5个克隆均包含有1 242 bp的完整的编码框,编码413个氨基酸,与拟南芥LFY、金鱼草FLO和甘菊DFL的同源性分别为58%、66%和93%。各克隆间的序列高度保守,核苷酸同源性达到99.9%,推测小滨菊中LFY基因以单拷贝形式存在。利用氨基酸序列构建的系统进化树结果表明LeFL与菊属植物聚在同一枝上,与传统的分类学结果一致。该研究结果为深入了解小滨菊的成花机制及春黄菊族植物的系统进化提供科学依据。