LED光源照射及PI3K抑制剂对人视网膜色素上皮细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨LED光源照射对人视网膜色素上皮(RPE)细胞自噬和凋亡的影响,以及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂LY294002在光照下对RPE细胞自噬和凋亡的影响。方法体外培养人ARPE-19细胞,随机分为6 h对照组、6 h模型组、6 h LY294002组,12 h对照组、12 h模型组、12 h LY294002组,24 h对照组、24 h模型组、24 h LY294002组,分别给于设定时间的LED冷光照射或加入LY294002后的光照。采用噻唑蓝法检测各组细胞存活率;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;透射电子显微镜观察各组细胞超微结构;构建稳定表达红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(LC3)的RPE细胞株,激光共聚焦合倒置荧光显微镜分析细胞自噬流变化;Western blot法检测苄氯素1(Beclin 1)、LC3和p62自噬相关蛋白表达水平。结果与对照组比较,6、12、24 h模型组细胞存活率均下降(均P<0.05),12、24 h LY294002组细胞存活率均下降(均P<0.01);与模型组比较,12、24 h LY294002组细胞存活率均升高(均P<0.05)。与对照组比较,6、12、24 h模型组和LY294002组细胞凋亡率均升高(均P<0.05);与模型组比较,6、12 h LY294002组细胞凋亡率均下降(均P<0.05)。模型组RPE细胞在光照24 h后,胞内可见较多的自噬泡,LY294002干预后也可见聚集性分布的自噬囊泡。观察自噬流发现,对照组少见红色亮点,模型组红色亮点荧光随光照时间延长数量逐渐增多,Merge图中黄色亮点数量增多明显,LY294002干预后,红色亮点与黄色亮点呈增多趋势。与对照组比较,6、12、24 h模型组和LY294002组细胞中Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平均升高,p62蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,6、12、24 h LY294002组细胞中Beclin 1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达均升高,12、24 h LY294002组细胞中p62蛋白表达水平均下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论LED光源照射可刺激ARPE-19细胞发生自噬,增加细胞凋亡率;PI3K抑制剂LY294002能上调细胞的自噬活性,减缓凋亡。

酪酸梭菌二联活菌散联合LED冷光源蓝光照射治疗新生儿高胆红素血症的效果分析

目的:观察酪酸梭菌二联活菌散联合LED冷光源蓝光照射治疗新生儿高胆红素血症的效果。方法:选取本院2021年11月—2022年11月患有高胆红素血症新生儿64例,随机数字表法将患儿分为研究组和对照组,每组32例。对照组采用LED冷光源蓝光照射治疗,研究组采用酪酸梭菌二联活菌散联合LED冷光源蓝光照射治疗。对比两组患儿治疗后的临床疗效;治疗前后的直接胆红素(DBiL)、间接胆红素(IBiL)、总胆红素(TBiL)和生长情况及载脂蛋白M(Apom)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及C-反应蛋白(CRP)水平;记录治疗期间的不良反应率。结果:治疗后,研究组治疗总有效率为93.75%,明显高于对照组的65.63%(P<0.05);治疗后,两组DBiL、IBiL、TBiL及Apom、NSE、CRP水平均降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组新生儿2个月生长情况较治疗前明显增长,且研究组高于对照组(P<0.05)。两组新生患儿不良反应总发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:酪酸梭菌二联活菌散联合LED冷光源蓝光照射治疗新生儿高胆红素血症,能有效降低新生儿血清胆红素,改善肠道炎症,降低炎症因子和脑神经元指标,促进新生儿生长发育。