胃癌模型大鼠胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT的表达意义及其与胃癌病变程度的相关性

目的探讨胃癌模型大鼠胃黏膜组织细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、c-Myc、CKIT的表达意义及其与胃癌病变程度的相关性。方法选择48只健康成年雌性大鼠,按照随机数字表法将其分为对照组、研究1组、研究2组、研究3组,每组各12只。研究1组、研究2组、研究3组均制备成胃癌模型。对照组给予等量0.9%氯化钠溶液,第24周处死取材;研究1组、研究2组、研究3组制备成胃癌大鼠后分别于第8、16、24周取材。分析各组大鼠一般情况及胃黏膜组织病理切片,采用蛋白质印迹法检测胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT蛋白的表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT mRNA的表达,采用Spearman分析法测定胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT表达与胃癌病变程度相关性。结果对照组大鼠胃黏膜完整正常,外膜层、肌层、黏膜下层、黏膜层等结构清晰,且无炎症细胞浸润;研究1组大鼠胃黏膜组织与对照组大鼠接近,不存在炎症细胞,且黏膜腺体结构基本正常;研究2组大鼠胃黏膜组织存在破损,细胞核变大,基底部部分腺体细胞形态异常,存在轻度异型性,为早期胃癌;研究3组大鼠胃黏膜组织增加破损,核质比变大,细胞形态不规则,部分腺体存在扩张,黏膜下层及肌层存在炎症细胞浸润,为胃癌进展期。研究1组、研究2组、研究3组胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT蛋白均呈显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT蛋白在研究1组、研究2组、研究3组中逐渐升高趋势。研究1组、研究2组、研究3组胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT mRNA均呈显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT mRNA在研究1组、研究2组、研究3组中逐渐升高趋势。采用Spearman相关性结果分析显示,胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT表达与胃癌病变程度呈正相关(r=0.382、0.781、0.993,均P<0.001)。结论胃癌模型大鼠胃黏膜组织Cyclin D1、c-Myc、CKIT呈高表达,其与胃癌病变程度密切相关。

结直肠癌组织中淋巴增强子结合因子1(LEF1)高表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者癌组织中淋巴增强子结合因子1(lymphatic enhancer binding factor 1,LEF1)的表达水平及其临床意义。方法:免疫组化染色法结合Western blot观察结肠癌患者癌组织和癌旁组织中LEF1的表达情况,并对癌组织中LEF1的表达与结肠癌患者临床病理特征的相关性进行统计学分析。Kaplan-Meier生存分析LEF1的表达与结肠癌患者预后的关联,多因素COX回归分析影响结肠癌患者生存预后的危险因素。进一步分析TCGA数据库结肠癌患者癌和癌旁组织中LEF1的表达水平,及其表达与患者预后以及淋巴结转移的相关性。此外,细胞水平采用Western blot检测结肠癌细胞系中LEF1的蛋白表达情况,并通过转染LEF1 siRNA观察对结肠癌HCT116细胞生物学功能的影响。结果:结肠癌组织中LEF1的表达较癌旁组织显著增加(P<0.05),且其表达水平与肿瘤病理分期、分化程度和淋巴结转移呈正相关(P<0.05),与患者年龄、病理类型无关(P>0.05)。LEF1高表达结肠癌患者的生存期明显低于低表达患者(P<0.05)。多因素COX回归分析结果显示,LEF1高表达、肿瘤病理分期、肿瘤分化程度以及淋巴结转移是结肠癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。TCGA数据库分析结果显示,结肠癌组织中LEF1的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),且其表达水平与患者预后呈负相关(P<0.05),而与患者淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。此外,细胞实验结果显示,人结肠癌细胞系中LEF1的表达水平显著高于正常结肠上皮细胞(P<0.05),敲减LEF1可有效降低结肠癌HCT116细胞的迁移和侵袭能力,并抑制Wnt/β-catenin信号通路活性(P<0.05)。结论:LEF1高表达与结肠癌患者的短生存期和不良预后密切相关,可作为结肠癌患者术后复发和转移以及临床预后的重要生物标志物。

猫CDH1基因在过表达c-MYC成纤维细胞中的表达变化及生物信息学分析

[目的]试验旨在研究骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(myelocytomatosis viral oncogene homolog, c-MYC)对猫成纤维细胞的影响及其与E-钙黏蛋白(cadherin 1,CDH1)基因表达和分子特性的关系,为将其应用于猫肿瘤疾病防治和组织损伤修复提供依据。[方法]通过组织贴壁法对猫胎儿成纤维细胞进行分离培养,利用电转仪将PB-TRE-c-MYC质粒转染至细胞并观察细胞形态,利用实时荧光定量PCR检测CDH1基因的表达情况,并通过生物信息学软件分析CDH1蛋白的理化性质和结构特征。[结果]过表达c-MYC导致细胞形态发生变化,从间质细胞的长梭型向上皮细胞的鹅卵石状发生转变,且使上皮细胞标志基因CDH1的表达极显著上调(P<0.01)。生物信息学分析显示,猫CDH1蛋白有881个氨基酸,其中含量最多的是亮氨酸,定位于细胞膜,存在4个CA结构域,介导细胞与细胞的接触,属于亲水性的酸性蛋白,主要由无规则卷曲组成,可能存在由Sec易位子转运并被信号肽酶Ⅰ(Sec/SPⅠ)切割的信号肽位点。[结论]猫CDH1基因的表达可被外源性重编程因子c-MYC激活,其编码的钙黏蛋白可促进猫胎儿成纤维细胞的间质-上皮转化,以抑制细胞癌化。

基于ERK介导C-Myc/PD-L1协同作用探讨参芪抑瘤方联合顺铂对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤机制

目的:探讨参芪抑瘤方联合顺铂经ERK介导C-Myc/PD-L1相协途径对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及其机制。方法:60只SPF级雄性昆明小鼠,采用随机数字表法取10只小鼠作为空白组,其余50只小鼠复制H22肝癌荷瘤小鼠模型,模型复制成功后将模型小鼠随机分为模型组、顺铂组[2.5×10^(-3) g/(kg·3 d)]、参芪抑瘤方低[13.515 g/(kg·d)]、中[27.030 g/(kg·d)]、高剂量[54.060 g/(kg·d)]联合顺铂[2.5×10^(-3) g/(kg·3 d)]组,每组10只,治疗13 d,末次给药24 h后,麻醉处死小鼠,测定小鼠肿瘤抑制率和脾指数、胸腺指数;HE染色观察小鼠肿瘤组织病理学变化;ELISA试剂盒检测肿瘤组织匀浆液中EGF、IFN-γ含量;IHC法和Western blot法检测肿瘤组织中p-ERK1/2、C-Myc、PD-L1蛋白表达;RT-PCR法检测肿瘤组织中ERK、C-Myc、PD-L1mRNA表达水平。结果:与空白组相比,模型组小鼠平均体质量和脾脏指数均降低(P<0.05);与模型组相比,各治疗组肿瘤抑制效果明显,且参芪抑瘤方联合顺铂组以剂量依赖性方式抑制肝癌小鼠肿瘤生长,提高小鼠平均体质量和脾指数、胸腺指数,促进肿瘤细胞坏死,增加坏死面积,降低肿瘤组织中EGF和IFN-γ含量以及p-ERK1/2、C-Myc、PD-L1蛋白表达和ERK、C-Myc、PD-L1 mRNA表达(P<0.05);与顺铂组相比,参芪抑瘤方中、高剂量联合顺铂组治疗效果显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:参芪抑瘤方联合顺铂能有效抑制H22肝癌荷瘤小鼠的肿瘤生长,显著下调肿瘤组织中C-Myc与PD-L1蛋白表达,该机制可能通过调控ERK信号通路相关蛋白表达发挥抑瘤作用。

c-Myc通过lnc-TBL1XR1-5影响口腔鳞状细胞癌的发生发展

目的研究c-Myc调节的长链非编码RNA TBL1XR1-5(lnc-TBL1XR1-5)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)进展的影响。方法根据c-Myc的表达对TCGA数据库中头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)样本进行生物信息学分析,筛选出c-Myc表达密切相关的lnc-TBL1XR1-5。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测c-Myc和lnc-TBL1XR1-5在OSCC癌组织和癌旁组织中的表达关系,分析其在HOK、HN6、CAL27细胞系中表达差异,c-Myc过表达和敲低对lnc-TBL1XR1-5的影响。双荧光素酶报告基因测定用于验证c-Myc与lnc-TBL1XR1-5启动子区的结合。RNA荧光原位杂交(RNA FISH)用于确定lnc-TBL1XR1-5在OSCC细胞系中的定位。通过qRT-PCR、细胞计数、CCK-8、集落形成等实验观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞增殖的影响,并通过划痕实验、Transwell实验等观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞迁移的影响,最后通过观察培养基颜色和pH变化观察lnc-TBL1XR1-5的过表达或敲低对OSCC细胞代谢的影响。结果c-Myc对lnc-TBL1XR1-5在OSCC细胞系和组织中的表达具有正调控作用。通过双荧光素酶报告基因测定验证了c-Myc与lnc-TBL1XR1-5启动子区的结合。RNA FISH显示lnc-TBL1XR1-5定位于OSCC细胞的细胞核。lnc-TBL1XR1-5的过表达促进了OSCC细胞系的迁移、代谢和增殖,而敲低则具有相反的作用。结论c-Myc在OSCC中正向调节lnc-TBL1XR1-5,lnc-TBL1XR1-5促进OSCC的迁移、增殖和代谢。

胃癌患者血清c-Myc和PD-L1水平与临床病理特征及预后的相关性

目的 探讨胃癌患者血清c-Myc和程序性死亡配体1(programmed death ligand 1,PD-L1)水平与临床病理特征及预后的相关性。方法 收集2018年8月至2019年4月期间96例胃癌患者作为研究对象(观察组),另纳入健康体检者96例为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清c-Myc和PD-L1水平。胃癌患者血清中c-Myc和PD-L1表达的相关性采用Spearman相关分析;血清c-Myc和PD-L1表达与患者预后的关系采用Kaplan-Meier法分析;Cox回归分析胃癌患者预后的影响因素。结果 与对照组相比,观察组患者血清c-Myc、PD-L1水平显著升高(P<0.05)。Spearman法分析显示,胃癌患者血清中c-Myc和PD-L1表达呈正相关(r=0.431,P<0.05);c-Myc、PD-L1表达与肿瘤直径、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移和分化程度有关(P<0.05)。胃癌组织中c-Myc和PD-L1低表达患者3年累计生存率为88.89%(32/36)、86.67%(26/30),均显著高于高表达患者的76.67%(46/60)、78.79%(52/66)(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,c-Myc、PD-L1、TNM分期是影响胃癌患者预后的危险因素(P<0.05)。结论 胃癌患者血清中c-Myc和PD-L1高表达均呈现上调趋势,二者与胃癌患者临床病理特征及预后有关。

ABCB5和LEF1基因与高血压相关研究进展

动脉高血压的发病机制涉及许多因素和分子途径。最近有研究发现ATP结合盒超家族成员ABCB5与心血管相关疾病和WNT信号通路存在关联,有报告指出Wnt/β-catenin通路在高血压患者的病程和发展中的作用,且LEF1作为WNT信号通路中的关键转录因子可能通过相关机制引起高血压,本文就其相关性研究进行综述。

乳腺癌中-βcatenin、cyclinD1、c-myc表达及意义

目的探讨-βcatenin、cyclinD1、c-myc在乳腺癌中的表达及意义。方法应用免疫组化法检测119例乳腺癌,72例乳腺增生症和40例正常乳腺组织中-βcatenin、cyclinD1、c-myc的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果 40例正常乳腺组织中-βcatenin在细胞膜中强表达,cyclinD1及c-myc阴性表达。乳腺癌-βcatenin异常表达率78.15%(93/119)明显高于乳腺增生症44.44%(32/72),组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。乳腺癌cyc linD1阳性表达率57.98%(69/119)高于乳腺增生症33.33%(24/72),组间比较差异有统计学意义(P=0.001<0.01)。乳腺癌c-myc阳性表达率56.30%(67/119)高于乳腺增生症27.78%(20/72),组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。-βcatenin异常表达、cyclinD1的过表达与淋巴结转移相关,c-myc的过表达与肿瘤大小和淋巴结转移相关。-βcatenin的异常表达与cyclinD1的表达相关,而与c-myc的表达无关。结论β-catenin异常表达是乳腺癌发生发展过程中的重要因子,这个过程可能是通过激活cyclinD1实现的。-βcatenin异常表达和cyclinD1、c-myc过表达可作为评估乳腺癌转移预后的指标。

APC、β-catenin、C-myc和Cyclin D1在大肠癌组织中的表达及其意义

背景与目的:Wnt信号转导通路成员各癌基因、抑癌基因的异常,激活下游相关靶基因的转录,在肿瘤发生发展中起重要作用。本研究通过检测不同大肠组织中APC、β-catenin、C-myc和CyclinD1的表达情况,探讨其在大肠癌发生中的意义。方法:应用免疫组织化学方法检测30例正常大肠粘膜、30例大肠腺瘤、10例大肠腺瘤恶变及50例大肠癌组织中APC、β-catenin、C-myc和CyclinD1蛋白的表达情况。以β-catenin在细胞膜表达为正常表达,而在胞浆和/或胞核表达为异位表达。结果:大肠癌和大肠腺瘤恶变组织APC阳性率分别为44.0%和40.0%,显著低于大肠腺瘤(86.7%)和正常大肠粘膜(100%)(Ρ<0.01)。大肠癌、大肠腺瘤恶变组织和大肠腺瘤β-catenin胞浆和/或胞核异位表达率分别为62.0%、50.0%、30.0%,均显著高于正常大肠粘膜(0%)(Ρ<0.01),大肠癌β-catenin异位表达率显著高于大肠腺瘤(Ρ<0.01)。大肠癌、大肠腺瘤恶变组织、大肠腺瘤中C-myc表达率分别为56.0%、60.0%、46.7%,均显著高于正常大肠粘膜(0%)(Ρ<0.01),而CyclinD1阳性率分别为66.0%、60.0%、30.0%,均显著高于正常大肠粘膜(0%)(Ρ<0.01)。大肠癌CyclinD1表达率显著高于大肠腺瘤(Ρ<0.01)。大肠癌中β-catenin异位表达与C-myc和CyclinD1表达呈正相关关系(r=0.63,Ρ<0.01;r=0.57,Ρ<0.01),而与APC表达呈负相关关系(r=-0.39,Ρ<0.05)。结论:大肠癌组织中存在APC低表达和/或β-catenin异位表达,以及C-myc和CyclinD1的过度表达,4种基因蛋白可能在大肠癌发生过程中起重要作用。

低氧下丹参酮ⅡA对人胃癌SGC-7901细胞HIF-1α与c-Myc表达的影响

目的观察低氧下丹参酮ⅡA(TanⅡA)对人胃癌SGC-7901细胞低氧诱导因子1α(H IF-1α)与c-Myc表达的影响和二者的相关性。方法用氯化钴创建低氧模型,设常氧对照组、低氧对照组和低氧加不同浓度TanⅡA组。分别取0.5、2.0、10.0 mg/L TanⅡA干预低氧胃癌细胞48 h后,免疫细胞化学二步法检测H IF-1α和c-Myc蛋白表达的变化。结果TanⅡA呈剂量依赖性地抑制H IF-1α和c-Myc蛋白表达,且二者呈高度正相关(r=0.901,P<0.05)。结论低氧条件下,TanⅡA可同时抑制人胃癌SGC-7901细胞H IF-1α和c-Myc蛋白的表达,提示TanⅡA可能对抑制肿瘤的无氧糖酵解和VEGF表达具有重要作用。

CyclinD1 c-myc和p53的表达与肝细胞癌生物学行为关系

目的:探讨肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)及癌旁肝组织CyclinD1、c-myc及p53蛋白表达的意义及其与肝癌生物学行为关系。方法:采用EnVisionTMplus免疫组织化学方法检测CyclinD1、c-myc及p53蛋白在52例HCC及癌旁肝组织中的表达。结果:CyclinD1及c-myc在HCC组织中的阳性率明显高于在癌旁肝组织中的阳性率(P<0.05),在HCC中p53的阳性表达与CyclinD1、c-myc的阳性表达呈正相关(r=0.4637,P=0.0022、r=0.3445,P=0.0273,);CyclinD1、c-myc及p53在人肝癌组织中的检出率与肝外转移、术后复发及肿瘤分化程度明显有关(P<0.05),CyclinD1的检出率与门静脉癌栓明显有关(P<0.05),p53的检出率与血清AFP和TSGF水平有显著性差异(P<0.05);CyclinD1、c-myc及p53的检出率与临床分期、肿瘤大小、肿瘤个数、HBsAg状况无明显关系。结论:CyclinD1、c-myc及p53蛋白的过表达可促使肝癌细胞增殖,使肝癌细胞具有更强的侵袭力,与肝癌的发生、发展密切相关。

ie-1和lef-1基因dsRNA表达元件转染及转化细胞对家蚕核型多角体病毒增殖的抑制

通过RNAi介导可以抑制病毒增殖,将相应的RNAi元件通过转基因转入宿主有可能使宿主对病毒产生一定的抗性。根据家蚕核型多角体病毒(BmNPV)基因组中的病毒复制必需基因ie-1、lef-1设计相应的RNA干扰区段,并构建相应的转基因载体转入家蚕BmN细胞中,瞬时表达结果显示转染了转基因RNAi载体的BmN细胞均对BmNPV有一定的抑制作用。IE dsRNA在病毒滴度为10-4时有抑制作用,在病毒滴度为10-5时有比较好的作用;LEF dsRNA则在病毒滴度为10-5时有抑制作用,在病毒滴度为10-6时有较好的抑制作用。通过转基因及G418筛选后,转基因IE dsRNA细胞在病毒滴度为10-4显示出一定的抑制作用,在病毒滴度为10-5表现了明显的抑制作用;而转基因LEF dsRNA细胞在病毒滴度为10-5有一定的抑制作用,但只维持了一个时段。

β-catenin,cyclin D1和c-myc在大肠癌组织中的表达

目的:探讨β-catenin(β-连环素)在大肠癌的表达及其与癌基因cyclinD1和C-myc的关系。 方法:应用免疫组化Powervision^(TM)二步法,检测25名正常人大肠黏膜,42例大肠腺瘤和58例大肠癌组织β-catenin,cyclinD1和C-myc的表达情况。 结果:正常大肠黏膜β-catenin胞膜阳性表达,cyclinD1和C-myc阴性。大肠腺瘤和大肠癌组织β-catenin呈胞质和/或胞核异位表达,大肠癌异位表达率为65.5％,显著高于大肠腺瘤(42.9％,P<0.05)。大肠癌cyclinD1和C-myc阳性率分别为74.1％、70.7％,均显著高于大肠腺瘤(45.2％,33.3％;P均<0.01)。大肠癌中β-catenin与cyclinD1和C-myc表达呈明显正相关(r=0.32,0.57;P<0.05,P<0.01)。 结论:β-catenin异位表达可能是原癌基因cyclinD1和C-myc激活的原因之一,并在大肠癌发生过程中可能起重要作用。

β-Catenin,cyclinD1及c-myc在肝细胞癌中的表达

目的探讨β-Catenin、cyclinD1及c-myc蛋白的表达与肝癌临床病理参数的关系。方法采用EnVisionTMplus免疫组织化学方法研究β-Catenin、cyclinD1及c-myc蛋白在52例HCC及癌旁肝组织中的表达情况。结果52例HCC中β-Catenin、cyclinD1及c-myc蛋白染色阳性率分别为55.8%、48.1%及53.8%,癌旁肝组织的阳性率为36.5%、25.0%及32.7%,β-Catenin、cyclinD1及c-myc在HCC及癌旁肝组织两者间有显着性差异(P<0.05)。在HCC中β-Catenin的阳性表达与cyclinD1、c-myc的阳性表达密切相关(P=0.0108,r=0.3920;P=0.0295,r=0.3406)且呈正相关;β-Catenin、cyclinD1及c-myc在人肝癌组织中的检出率与肝外转移、术后复发及肿瘤分化程度明显有关(P<0.05),cyclinD1的检出率与门静脉癌栓也明显有关(P<0.05),β-Catenin的检出率与临床分期和门静脉癌栓也有显著性差异(P<0.05)。结论β-Catenin、cyclinD1及c-myc蛋白的过表达可促使肝癌细胞增殖,使肝癌细胞具有更强的侵袭力,与肝癌的发生发展关系密切。

Cyclin D1,Cyclin E,c-Myc在涎腺良恶性多形性腺瘤中的表达研究

目的:研究cyclin D1,cyclin E,c-myc在涎腺多形性腺瘤中的表达,与临床生物学特性和细胞增殖的关系以及对于涎腺多形性腺瘤病理学诊断的意义。方法:采用免疫组化方法检测30例良性多形性腺瘤,30例细胞丰富型多形性腺瘤和30例恶性多形性腺瘤中cyclin D1、cyclin E、c-myc蛋白的表达水平,并与30例癌旁正常涎腺组织中的表达对比。结果:cyclin D1、cyclin E和c-myc在恶性多形性腺瘤中的阳性表达率明显高于良性和细胞丰富型多形性腺瘤(P<0.05),而三者在良性多形性腺瘤中的阳性表达率与在细胞丰富型多形性腺瘤的阳性表达率无统计学差异。cyclin E、cyclin D1和c-myc蛋白的异常表达与患者性别、是否复发、发生部位、肿瘤的大小无关(P<0.05)。在恶性肿瘤中,cyclin D1的异常表达与肿瘤的TNM分期相关(P<0.05),cyclin E蛋白的表达于肿瘤的浸润性相关(P<0.05)。c-myc的过表达与cyclin D1和cyclin E的阳性表达呈正相关。结论:cyclin D1、cyclinE、c-myc共同参与调控细胞周期,可作为预测多形性腺瘤恶变和预后的分子生物学指标之一,是多形性腺瘤病理学分类的依据之一。

人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达

目的:检测人喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达。方法:采用免疫组化法检测80例喉鳞状细胞癌和30例声带息肉组织中c-myc和cyclinD1蛋白的表达,分析两蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系及二者表达的关联性。结果:喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白的阳性表达率分别为67.5%和52.5%,声带息肉组织中未见阳性表达,2组相比差异有统计学意义(P<0.001)。c-myc蛋白的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期、分化程度、淋巴结转移及5a生存率均有关(χ2=4.268、6.419、5.673和6.180,P<0.05)。喉鳞状细胞癌组织中二者的表达呈正关联(rP=0.241,P=0.026)。结论:喉鳞状细胞癌组织中c-myc和cyclinD1蛋白呈高表达,二者可能在喉鳞状细胞癌的发生中起协同作用。

小鼠出生后背部毛囊发育与Lef-1表达的研究

旨在研究Lef-1在小鼠背部毛囊生长周期中的表达规律及其与毛囊生长更替的关系。本试验采用石蜡切片HE染色、Western blotting以及免疫组织化学方法,研究小鼠毛囊的周期性变化,检测Lef-1在小鼠毛囊生长的不同时期皮肤组织中的蛋白表达水平,并对其进行组织定位。结果,昆明系小鼠毛囊生长呈周期性变化,处于不同生长时期的毛囊具有各期的特殊结构;Western blotting结果显示,在各阶段皮肤组织中存在Lef-1蛋白的表达,其在毛囊生长初期的表达量显著高于中期和末期;免疫组织化学结果显示,Lef-1在不同毛囊生长时期的皮脂腺、根鞘和真皮乳头均有不同程度的表达。Lef-1的表达与毛囊的周期性变化存在相关性。

新型核苷类似物FNC对Raji细胞增殖、凋亡和Bcl-6、PRDM1、C-myc表达的影响

目的:研究2'-脱氧-2'-氟-4'-叠氮-核苷类似物(FNC)对Raji细胞增殖的影响及其作用机制。方法:分别用0、0.035、0.350、3.500、35.000和350.000μmol/L的FNC处理Raji细胞24、48、72h后,应用MTT法检测细胞增殖情况;分别用0、0.035、0.175、0.875、4.375μmol/LFNC处理Raji细胞48h后用流式细胞术检测细胞周期及凋亡,用RT-PCR与Westernblot法分别检测细胞中Bcl-6、PRDM1、C-mycmRNA及蛋白的表达。结果:FNC可显著抑制Raji细胞的增殖,呈明显的时间、剂量依赖性(F浓度=4869.984,F时间=1785.062,F交互=126.281,P均<0.001);FNC可诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0/G1期(P<0.05);随着FNC浓度的增加,Raji细胞中Bcl-6、C-mycmRNA及蛋白的表达降低(F=65.497、68.502和59.086、78.285,P均<0.001),PRDM1mRNA及蛋白的表达升高(F=81.133、85.234,P均<0.001)。结论:FNC可能通过下调Bcl-6、C-myc和上调PRDM1的表达,抑制Raji细胞的增殖,诱导细胞凋亡。

LEF1和Jagged1在人结直肠癌组织中的表达及其意义

目的探讨淋巴增强因子-1(lymphoid enhancer factor-1,LEF1)和Jagged1在人结直肠癌组织中的表达及其意义。方法采取免疫组化SP法检测184例人结直肠癌组织及184例癌旁正常组织中LEF1和Jagged1的表达,分析两者与人结直肠癌临床病理因素之间的关系。结果 LEF1和Jagged1在人结直肠癌组织中的阳性表达率分别为68.5%和65.8%,均明显高于癌旁正常组织(P<0.001)。LEF1的表达与患者的淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P<0.05);Jagged1的表达与患者的组织分化程度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关(P<0.05)。LEF1和Jagged1在结直肠癌组织中的表达呈正相关(r=0.373,P<0.001)。结论 LEF1和Jagged1的高表达与结直肠癌发生发展以及转移密切相关,两者联合检测对人结直肠癌的早期诊断及判断预后具有一定的参考价值。