黄酮类新化合物LFG-500通过调控MAPK和AKT/mTOR信号通路抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖

目的考察黄酮类新化合物LFG-500对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用,并初步探讨其抑制细胞增殖的作用机制。方法体外培养MCF-7细胞,实验设置空白对照组,以及浓度为10、20、30μM的LFG-500处理组,处理细胞24 h。通过平板克隆形成实验检测LFG-500对细胞的增殖能力的抑制作用;利用Western blot实验检测LFG-500对MCF-7细胞内MAPK信号通路关键蛋白ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、p38/p-p38及AKT/mTOR信号通路核心蛋白AKT/p-AKT、mTOR/p-mTOR的调节作用。结果平板克隆形成实验结果显示,与对照组相比,LFG-500中、高剂量组MCF-7细胞增殖明显受到抑制(P<0.01);Western blot结果显示,LFG-500可上调MCF-7细胞中MAPK信号通路核心蛋白p-JNK和p-p38的表达,下调p-ERK的表达(P<0.05)。此外,LFG-500也可抑制AKT/mTOR信号通路的核心蛋白p-AKT和p-mTOR的表达水平(P<0.05)。结论LFG-500可能通过调控MAPK及AKT/mTOR信号通路抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,具有较好的抗肿瘤作用。

新化合物LFG-500诱导人乳腺癌细胞凋亡

目的:考察黄酮类新化合物LFG-500通过ROS/线粒体途径诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的作用及机制。方法:通过MTT实验考察不同浓度LFG-500对MCF-7细胞活力的影响;采用流式细胞分析仪检测LFG-500对MCF-7细胞凋亡率、胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平及线粒体膜电位变化的影响;利用Western blot实验检测LFG-500对MCF-7细胞内线粒体凋亡途径相关蛋白PARP、caspase-3/cleaved-caspase-3、caspase-9/cleavedcaspase-9、 Bax、 Bcl-2表达的影响。结果:“MTT”结果显示,LFG-500能够抑制MCF-7细胞的生长,且呈浓度依赖性,其24h的IC50为34.07±5.81μM。光镜观察显示,与对照组相比,给予LFG-500处理后,细胞变圆、漂浮,细胞缝隙变大,呈现出凋亡的现象。流式细胞仪分析显示,LFG-500可显著增加MCF-7细胞凋亡率(P<0.05)和细胞内ROS水平(P<0.05),显著降低MCF-7细胞的线粒体膜电位水平(P <0.05)。Western blot实验结果显示,LFG-500可显著降低procaspase-3、 pro-caspase-9、 PARP、 Bcl-2蛋白的表达水平(P <0.05),提高cleaved-caspase-3、 cleaved-caspase-9、 Bax蛋白的表达水平(P<0.05)。结论:LFG-500可通过激活ROS/线粒体途径,诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡。