LGI1、PCNA、GFAP、EGFR在脑胶质瘤中的表达及临床意义

目的 探讨肿瘤抑制基因LGI1蛋白、增殖细胞核抗原 (PCNA)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、表皮生长因子受体 (EGFR)的表达、相互关系及其意义。 方法 采用免疫组织化学 (ABC)法 ,检测 5 5例脑胶质瘤标本中LGI1、PCNA、GFAP和EGFR的表达。 结果 PCNA、EGFR的表达随胶质瘤病理分级的增加而增高 ,而LGI1、GFAP的表达则随胶质瘤病理分级的增加而降低。LGI1和PCNA、GFAP、EGFR表达间均存在着密切关系。 结论 LGI1与胶质瘤的分化程度、恶性程度、细胞增殖等密切相关 ;LGI1、PCNA、GFAP和EGFR检测可能成为胶质瘤诊断及判断其恶性程度与预后的指标。

LGI1基因对胶质瘤细胞作用的研究

目的:研究富亮氨酸胶质瘤失活基因1(LGI1)与胶质瘤细胞生长及胶质瘤细胞凋亡的关系。方法:构建pcDNA3.1/LGI1质粒,采用脂质体介导的方法转染LGI1缺失的胶质瘤细胞系。RT-PCR法和免疫组化法检测转染细胞的LGI1基因表达,MTT法检测转染细胞的增殖活性,AnnevinV-FITC法检测转染细胞的凋亡。结果:pcDNA3.1/LGI1转染胶质瘤细胞系A172后,A172细胞LGI1mRNA和蛋白表达阳性;细胞增殖活性受到抑制,MTT吸收值在转染后24和48小时下降,与正常对照组相比有统计学意义(P<0.05);转染后24小时早期凋亡细胞较多,48小时后早期凋亡减少。结论:LGI1基因可抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡。

中国汉族常染色体显性遗传颞叶外侧癫痫家系的临床特征和基因突变筛查

目的对一组中国常染色体显性遗传的颞叶癫痫(autosomal dominant lateral temporal lobe epilepsy,ADLTE)患者的临床、影像学、脑电图和致病基因等进行分析。方法收集4个中国北方汉族ADLTE家系患者的临床特征、电生理检查、影像学检查结果,采用靶向捕获二代测序技术对已报到的相关致病基因进行检测,并结合国内外文献进行分析比较。结果本组患者多在青春早期发病,其中超过50%患者的发作具有典型听觉或失语症状,对药物反应性良好;仅少数患者发作间期脑电图存在一侧或双侧颞区异常。基因筛查在一个家系中共分离出一个致病性的LGI1基因错义突变c.367G> A(p.E123K),该家系的临床表型和既往文献报道的相同位点突变患者的特征有所不同;本组患者中未发现其他已知基因致病性突变。结论本研究发现中国汉族裔ADLTE患者通常具有典型的临床、电生理和影像学特征,除LGI1基因外尚未发现其他已知基因对中国裔ADLTE患者的贡献。

斑马鱼幼体癫痫模型的建立及应用

本研究用戊四氮(pentylenetetrazole,PTZ)方法建立了一种斑马鱼幼体癫痫模型。结果显示,PTZ可导致斑马鱼幼体癫痫样异常兴奋行为,如游动速度加快、抽搐等异常现象;癫痫标志基因c-fos信号在斑马鱼幼体脑区增强并范围扩大,而lgi1基因表达则被抑制。这些表型与癫痫临床病例和文献报道相符。给予癫痫治疗药丙戊酸钠(VPA)可使斑马鱼癫痫症状减轻或消失:异常兴奋游动、c-fos和lgi1基因表达,以及神经核蛋白Neu N均恢复到近正常组水平。利用所建模型,检测了两种先导化合物Y53和BMT(均为小檗碱结构类似物)的抗癫痫作用,Y53抑制光刺激下的发作更有效;BMT对无刺激的发作有较好的抑制作用。综上,所建斑马鱼癫痫模型对于化合物有无刺激因素条件下的差异作用也具有较好的辨识力,可作为抗癫痫先导化合物的简便实用的药效筛选平台及用于癫痫发病机制研究。

中国常染色体显性遗传颞叶外侧癫痫一家系的临床特征和全外显子测序分析

目的 对一个常染色体显性遗传颞叶外侧癫痫（ADLTE）家系进行遗传学研究,探索引起该家系发病的遗传学基础,并对其进行基因型-临床表型分析.方法 对该家系进行详细的病史询问、临床信息收集和家系调查,采集所有患病成员和尽可能多的健康成员的外周血,对其基因组DNA进行全外显子测序分析,通过数据分析筛选到可能的致病变异后使用生物信息学软件对变异进行功能预测,聚合酶链反应（PCR）结合DNA测序进一步验证.检索国内外与之相关的研究,结合文献进行基因突变型-临床表型分析.结果 该家系中共分离出1个致病性富亮氨酸胶质瘤失活蛋白1（LGI1）基因移码突变p.T134fs,所引起的临床表型和既往文献报道的特征有所不同.结论 首次在中国ADLTE患者中发现了LGI1基因致病性突变,证明LGI1基因也是中国裔ADLTE的遗传学病因.