LHRH-A缓释剂对雌性赤点石斑鱼卵巢发育、性类固醇激素分泌及脑垂体GTH细胞超微结构的影响

取75尾网箱养殖的2～3龄雌性赤点石斑鱼,分为3组(高、低剂量组和对照组),各25尾。高剂量组埋植促黄体生成素释放激素类似物(LHRHA)缓释剂,剂量为300μg/kg体重,低剂量组为100μg/kg体重,对照组埋植不含LHRHA的药丸。分别在实验开始和埋植药丸后0、10、20、30、40天抽血,用放射免疫测定血清类固醇激素(E2、T);解剖鱼体测定相关指标,计算性腺成熟系数;取性腺和肝脏组织常规组织学切片并透射电镜观察。埋植后第10—30天,两种剂量处理组的排卵率均高于对照组,高剂量组显著高于低剂量组。在第10天性腺成熟系数高剂量组为1.055%,卵母细胞已有部分迅速发育到Ⅳ期末(核偏位);低剂量组相对缓慢。第20天性腺成熟系数高剂量组达1.858%,低剂量组为0.987%;处理组卵母细胞基本发育成熟。埋植后第10天,两处理组血清E2和T水平显著升高;第20天显著下降;此后E2保持在较低的水平,T显著低于对照组水平。超微结构的观察证实脑垂体GTH细胞在LHRHA缓释剂诱导性腺发育成熟和排卵过程中处于活跃的合成与分泌状态。LHRHA缓释剂能有效诱导赤点石斑鱼卵巢发育成熟和排卵,而性类固醇激素(E2、T)只与卵黄生成有关,与排卵无关。

LHRH-A和5-HT拮抗剂的协同作用对草鱼鱼种生长激素分泌活动和生长的影响

促性腺激素释放激素(LHRH)能够促进鱼类生长激素(GH)的释放,而5-羟色胺(5-HT)抑制鱼类GH的释放。将促性腺激素释放激素类似物(D-Ala6-Pro9-NEt-LHRH,LHRH-A,5μg/g饵料)和5-HT的特异性拮抗剂盐酸米安色林(Mianserin hydrochloride MIS,0.5 mg/g饵料)拌在饵料中投喂草鱼(Ctenopharyngodon idellus)鱼种6周,可促使血清GH水平显著提高,并使食物转化率升高,生长速率加快,肥满度增加;且两者促生长的协同作用比单独使用LHRH-A或MIS好。对草鱼鱼种体质和主要生化组成的分析表明,LHRH-A和MIS的促生长作用既没有引起鱼体可食部分的蛋白质含量减少,也不会使脂肪、水分含量和内脏质量增加,因而其促进的是草鱼种苗均衡、正常的生长。由此说明在生产应用中,使用高活性的神经内分泌因子,通过拌饵方式投喂对于促进养殖鱼类苗种的生长、缩短养殖周期,是有效而且安全的。

GnRH类似物(LHRH-A3)注射方案对奶牛超排效果的影响

本实验对奶牛超排时LHRH-A3注射方案分别进行了研究。结果发现在其它实验条件相同的情况下,两次输精同时都注射LHRH-A3的供体(第1次注射50μg,第2次注射25μg)的平均无精卵数(0±0)显著低于只在第1次输精同时注射LHRH-A3的(剂量为50μg)(0.222±0.183)(P<0.05),其平均黄体数、平均获胚数、平均获可用胚数都稍高,但差异不显著。这说明采用两次输精同时都注射LHRH-A3的方案可以提高奶牛的超排效果。

半胱胺盐酸盐和LHRH-A对黄鳍鲷IGF-Ⅰ基因表达和生长的影响

本文以黄鳍鲷 (Sparuslatus)为研究对象 ,利用GeneRaceTM 技术 ,从其肝组织中克隆出类胰岛素生长因子 (IGF Ⅰ )cDNA ,并应用半定量RT PCR方法研究了半胱胺盐酸盐 (Cysteaminehydrochloride)和LHRH A对其肝组织IGF Ⅰ基因表达的影响。黄鳍鲷IGF ⅠcDNA全长为 84 0bp ,编码 185aa多肽 ;序列分析表明 ,黄鳍鲷IGF Ⅰ基因编码的氨基酸序列与金鱼的同源性为 75 8% ,与牙鲆的同源性为 86 5 % ,与同属鲷科的黑鲷同源性高达 10 0 % ,证明鱼类类胰岛素生长因子是非常保守的 ,E区域分析结果表明黄鳍鲷IGF Ⅰ属Ea 4型。在饲料中投喂CSH、LHRH A等添加剂 ,实验组黄鳍鲷鱼种的相对生长率、垂体GH含量、肝脏IGF ⅠmRNA水平均显著高于对照组。以上结果提示 :CSH、LHRH A能促进黄鳍鲷生长激素的合成和IGF Ⅰ基因的表达 。

LHRH类似物对肝癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的:观察LHRH类似物的体内抗肝癌细胞增生活性,为LHRH类似物用于肝癌的内分泌治疗提供实验依据。方法:实验选用5-7周龄♂BALB/c裸鼠20只,分治疗组(丙氨瑞林瘤内注射组)和对照组(生理盐水瘤内注射组),用人肝癌hHCC细胞系建立肝癌荷瘤裸鼠模型,观察LHRH类似物丙氨瑞林(LHRH-A)对裸鼠移植瘤生长的影响;并分别用H-E染色和免疫细胞化学技术检测瘤组织的病理组织学改变和GnRH受体及凋亡蛋白Bax表达的变化。结果:LHRH-A瘤内注射(剂量为75μg/d)可显著抑制肝癌移植瘤的生长。治疗3 wk后治疗组裸鼠肿瘤体积(1885.9±738.3mm^3)明显小于对照组裸鼠的肿瘤体积(4223.4±1027.6mm^3),两组间有统计学差异(P<0.005);LHRH-A治疗3wk后的抑瘤率可达58％;治疗组裸鼠存活期(87.8±5.3d)较对照组(64.6±6.8d)显著延长(P<0.05);治疗3wk后病理组织学发现治疗组瘤组织中癌细胞核分裂象减少,腺样癌组织、凋亡细胞数增多;治疗组瘤组织中表达GnRH受体的癌细胞数增加(72.5％ vs 56.4％,P<0.05),Bax阳性细胞比率增加(53.8％ vs 41.5％,P<0.05)。结论:LHRH-A具有显著抑制肝癌裸鼠移植瘤细胞增生的活性,LHRH受体和凋亡蛋白Bax可能参与了LHRH-A对肝癌细胞增生的抑制作用。

长效LHRH拮抗剂的设计、合成和生物活性

根据抗蛋白酶降解的长效肽设计思想,合成了一系列新型结构的LHRH拮抗剂类似物.体内生物活性评价结果表明,所设计的多肽具有比母体肽和阳性对照更长的体内抑制睾酮作用时间和较低的最低有效剂量,证实了该设计思想的可行性,并为开发长效LHRH拮抗剂药物提供了新的候选化合物.

4岁内单纯性乳房早发育女童性激素及LHRH激发试验研究

目的了解4岁内单纯性乳房早发育女童的下丘脑-垂体-性腺轴的分泌特征以区别于中枢性及周围性性早熟。方法 374例患儿按照年龄分为6个组,检测促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、雌激素(E2)的基础水平;其中306例行LHRH激发试验,以戈那瑞林作为激发药物,注射前及注射后30、60min抽取静脉血检测FSH和LH的激发值。结果FSH的基础水平[总平均值(4.68±2.32)mIU/mL]显著高于LH[(0.20±0.09)mIU/mL];FSH在大于0.5～1.0岁、>1.0～1.5岁2个年龄组分泌水平较高(P<0.05),随后分泌逐渐下降;LH在大于0.5～1.0岁年龄组分泌水平较高(P<0.05),之后呈逐渐下降趋势。LHRH激发试验中,FSH的激发峰值[总平均值(34.82±12.28)mIU/mL]显著高于LH[(6.71±2.93)mIU/mL],LH/FSH峰值比[总平均值(0.206±0.083)]在各年龄组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);LH峰值在各年龄组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),30min达到者234例(76.47%);FSH峰值在大于1.0～1.5岁、>1.5～2.0岁年龄组水平较高(P<0.05),60min达到者274例(89.54%)。E2和PRL在各年龄组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 4岁内单纯性乳房早发育女童在该年龄阶段具有分泌特征。

LHRH-PE40对人结肠癌细胞增殖抑制和凋亡的影响

目的：探讨一种新型免疫毒素LHRH-PE40与人结肠癌细胞系Lovo表面LHRH受体结合的特性，观察其对细胞增殖产生的抑制作用及检测细胞凋亡。方法：用^125Ⅰ标记法检测LHRH-PE40与Lovo结合的特异性；MTT比色法检测LHRH-PE40对胃癌细胞的杀伤活性，流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：人结肠癌细胞系Lovo细胞表面可见配基一受体特异性结合，LHRH-PE40对Lovo细胞的半数致死量为0．24mg·L^-1，0．1～10．0mg·L^-1 LHRH-PE40作用于Lovo细胞，其凋亡明显（P〈0．01）。结论：结肠癌细胞Lovo细胞表面存在LHRH受体，LHRH-PE40对结肠癌细胞的增殖状态有明显的抑制作用及促凋亡作用。

LHRH刺激雄性大鼠垂体LH分泌高峰时细胞形态变化的图象分析

应用ABC亲和组织化学顺序、MIS－I计算机图象处理系统测定外源性LHRH刺激雄性大鼠LH分泌高峰前后LH细胞面积、细胞内液泡面积和细胞形状等形态参数的变化。结果表明：雄性大鼠LH基础分泌时，LH细胞处于贮存状态：大细胞（＞340μm2）占LH阳性细胞56．7％，小细胞（＜190μm2）占2．2％，40％细胞内含有大量液泡，细胞形状大多偏向圆形。注射LHRH30min后，血中LH浓度显著升高，LH细胞平均面积明显减小；60min时，血中LH释放达到高峰，相应的形态学特征是大细胞降低至4％，小细胞增加到66％。随着细胞内液泡的大量消失，52．6％的细胞偏向不规则形状。LH分泌高峰后，血液LH浓度逐渐恢复到基础分泌水平，但随着细胞内LH贮存的增加，细胞和细胞内液泡平均面积逐渐增加，大多数细胞又偏向圆形。结果提示，合大量液泡的偏圆形大细胞同LH大量贮存有关。而液泡的消失以及大量小细胞和不规则形状细胞的出现同LH大量释放有密切联系。由此作者认为：LH细胞内液泡的动态变化以及由此产生的细胞大小、细胞形状和细胞结构的变化可以作为促性腺激素分泌的重要形态学观察指标。

LHRH神经元在奶山羊下丘脑和隔区的分布-ABC法研究

本文应用免疫组化ABC法来研究三头成年雌性奶山羊的LHRH核周的及其神经纤维在下丘脑及隔区的分布。结果表明:LHRH核周体形态不规则,有突起,胞体和胞突内充满棕黑色的免疫反应颗粒。核周体主要分布在;(1)嗅脑隔区内由隔三角核、隔内侧核、视前正中核、视前内侧核、视前外侧核、斜角带核、前联合核构成的一条背腹走向的疏松细胞带。(2)由视前交叉上核、视前室周核、视上核、腹内侧核、腹外侧核、弓状核构成的一条斜向于正中隆起的细胞带。每头羊在以上两个细胞带内可查到112～173个LHRH核周体。 LHRH神经纤维呈明显的串珠状,长短与粗细均不一致,除了在上述各核团内有不同程度的分布外,还在正中隆起、血管终板器、灰结节、第三脑室室周均有较多的分布。此外在血管和脑室附近还可见到神经纤维终枝的分布。

LHRH离子电渗透皮给药系统的研究 Ⅰ.LHRH的离子电渗透皮吸收

研究了影响LHRH体外离子电渗透过裸鼠皮肤的因素。发现2500Hz(占空比3∶1)的方波电流体外透皮效果最好,且透皮速率随着电流密度的增加而增加。LHRH在皮肤中会滞留,外加电场撤去后,LHRH仍持续透过。采用交变电渗技术可以达到脉冲电渗效果,因而可模拟LHRH体内分泌的模式。

类阿片肽对山羊生殖内分泌的调节Ⅰ．吗啡和纳洛酮对山羊LHRH分泌的影响

将１６只发情周期正常的母山羊随机分成３组：吗啡（Ｍｏｒ）组、纳洛酮（Ｎａｌ）组和对照（Ｃｏｎ）组，分别注射阿片受体兴奋剂Ｍｏｒ、阿片受体拮抗剂Ｎａｌ和等量生理盐水。通过收集垂体门脉血样，监测注射前后促黄体激素释放激素（ＬＨＲＨ）的变化。结果表明，在山羊中黄体期和早卵泡期注射Ｍｏｒ均能显著抑制丘脑下部ＬＨＲＨ的分泌（Ｐ＜０．０５），而注射Ｎａｌ则促进其分泌（Ｐ＜０．０５），在中黄体期注射比在早卵泡期注射效果更为明显。因而认为，在山羊，体内类阿片肽参与生殖内分泌的调节，它们可能参与丘脑下部—垂体—卵巢轴，通过卵巢类固醇的负反馈机理抑制丘脑下部ＬＨＲＨ的分泌。

LHRH兴奋试验鉴别中枢性及周围性性早熟的临床意义:附13例分析

本文报道应用外源性促性腺激素释放激素(LHRH)兴奋试验及黄体生成素(LH)分泌脉冲测定,对性早熟的鉴别诊断有帮助。凡外源性LHRH兴奋试验其血清LH峰值大于基值5借以上,LH分泌脉冲频繁出现(每24小时出现5次以上),可确诊为中枢性性早熟症,反之则为周围性性早熟症。

LHRH及P物质对大鼠脊神经节细胞膜GABA_A受体介导反应的抑制作用

实验在幼年大鼠脊神经节（ＳＧ）标本进行细胞内记录。结果表明，单独滴加０．０１～１．００ｍｍｏｌ／Ｌγ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）在大多数受检细胞（１０６／１２７）引起荷包牡丹碱敏感的去极化，而胞体膜对０．０１～０．１０ｍｍｏｌ／Ｌ促性腺素释放激素（ＬＨＲＨ）或０．００１～０．０１ｍｍｏｌ／ＬＰ物质（ＳＰ）仅有轻微的去极化或无反应。若将此两种肽类物质在ＧＡＢＡ作用之前分别加至ＳＧ细胞，这时ＧＡＢＡ所引起的反应便大为减弱。结果提示，肽类物质ＬＨＲＨ及ＳＰ对ＧＡＢＡ_Ａ受体介导的初级传入终末突触前抑制具有调制作用。

贵州省地方性克汀病垂体-性腺系统功能对 LHRH 兴奋试验的反应

在已经加碘得到控制的碘缺乏性疾病病区,观察了地方性克汀病垂体--性腺系统对促黄体激素释放因子(LHRH)试验的反应。结果:男性克汀病病人组血清黄体生成激素(LH)和卵泡刺激素(FSH)基础值显著高于对照组,但其血清睾酮(T)值则显著低于对照组。静脉注射 LHRH100μg15分钟后,克汀病病人组血清 FSH 反应高于正常人组,LH 反应与正常对照组相似。两组血清 T 值于试验后无显著变化。静脉注射接着静脉滴注 LHRH,克汀病病人组 FSH 反应高于正常人,其 LH 最大增值和反应倍数均低于对照组,正常人组 LH、FSH 呈双相反应,克汀病病人组则无此反应。血清 T,正常人组试验后2-3小时显著升高,克汀病病人组无则显著变化。结果表明克汀病病人不仅有原发性 Leydig 和 Sertoli 细胞功能低下,而且还有垂体促性腺激素储备和再合成功能的减低。

LHRH-PE40与正常肝组织和肝癌细胞表面LHRH受体结合特性的比较研究

目的 探讨重组促性腺激素释放激素 绿脓杆菌外毒素 4 0 (LHRH PE4 0 )与正常肝脏组织和肝癌细胞表面受体结合特性的差异。方法 用放射性配基结合分析的方法测定亲和力和受体容量。结果 LHRH PE4 0与肝癌细胞HEPG细胞的亲和力Kd为 (0 .4 3± 0 .12 )nmol·L-1,受体容量Bmax为 (0 .37± 0 .15 )nmol·mg-1,与正常肝脏组织未见结合。结论 重组毒素LHRH PE4 0和肝癌细胞HEPG的表面受体有较强的结合 ,而和正常肝脏组织无特异性结合。

性早熟女童骨龄指数与LHRH激发试验LH峰值的关系探讨

对临床诊断为性早熟女童 5 3例均作黄体生成素释放激素 (LHRH)激发试验 ,摄左手腕正位片并用CHN法软件测定骨龄 ,将骨龄除以年龄得骨龄指数 (BAI) ,分别对ICPP(特发性中枢性性早熟 )组及非中枢性性早熟组女孩BAI和黄体生成素 (LH)峰值作直线相关性检验。结果 :非中枢性性早熟组女童BAI与LH峰值无相关性 ,ICPP组BAI与LH峰值呈直线正相关。结果提示LHRH激发试验有助于ICPP和非中枢性性早熟的鉴别诊断 ,BAI值越高 。

介绍一种LHRH脉冲式静脉给药促排卵新方法

介绍一种ＬＨＲＨ脉冲式静脉给药促排卵新方法邓晓惠许燕雪康曼华（山东医科大学附属医院）黄体生成素释放激素（ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅｒｅｌｅａｓｉｎｇｈｏｒｍｏｎｅ，ＬＨＲＨ）脉冲式静脉给药（ｐｕｌｓａｔｉｌｅｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓａｄｍｉｎ...

环境因素和促黄体素释放激素类似物(LHRH-A)对鲤促性腺激素(GtH)分泌和排卵的影响

环境因素对硬骨鱼类GtH的分泌和生殖活动起着重要的调节作用。本文为进一步探讨环境因素对鱼类生殖活动的调节作用机理的研究结果。