LHX1基因在肝癌患者中的潜在临床价值和功能初步研究

目的探讨LHX1基因在肝癌患者组织中的表达及与临床资料关联性和与肝癌的关系。方法收集并选取具有较为完整临床资料信息的肝癌患者新鲜癌组织样本90例、对应的癌旁组织40例和正常肝组织20例提取RNA,并逆转录成cDNA。采用RT-qPCR和免疫组化法分析LHX1基因在正常肝组织、肝癌癌旁组织和肝癌癌组织中的表达情况。确定LHX1在三组组织中的表达是否存在差异,分析LHX1基因表达与肝癌患者临床病理资料信息间的关系。通过MTS和Transwell实验确定LHX1基因在肝癌细胞的增殖和转移中的作用。结果与正常肝组织或肝癌癌旁组织相比,LHX1基因在肝癌组织中表达上调明显;LHX1表达与肝癌患者的肿瘤体积(P=0.002)和临床分期(P=0.001)关系密切,与患者性别、年龄、肿瘤位置和病理分级无相关性(P>0.05);基因功能研究发现,LHX1基因表达能够显著激活肝癌细胞的增殖能力和明显促进肝癌细胞的迁移及侵袭能力。结论 LHX1基因在肝癌中通过增强细胞增殖和促进细胞转移发挥促癌作用。

牙鲆Lhx1基因的克隆和表达分析

Lhx1基因对于哺乳动物卵巢缪勒氏管的形成具有重要作用,但鱼类中的报道仅限于其在体轴和肾脏形成中的作用,尚未见到其与性别及性腺发育相关的报道。本研究克隆获得了牙鲆(Paralichthys olivaceus)Lhx1a和Lhx1b开放阅读框(ORF)序列,长度分别为1224 bp和1206 bp(GenBank注册号为:JX999940、JX999941),同源序列比较显示牙鲆Lhx1a和Lhx1b基因均具有两个LIM及一个HOX结构域,符合Lhx1进化保守性。这两个基因在牙鲆雌、雄成鱼各组织RT-PCR差异表达谱不尽相同,Lhx1a在精巢中弱表达,卵巢中不表达,在其他组织中雌、雄表达谱差异不大,都只在脑和眼组织有弱表达;而Lhx1b的表达在性腺中相对较高,且卵巢的表达量高于精巢。进一步检测牙鲆Lhx1a和Lhx1b在雌、雄性腺发育各期的表达谱,发现这两个基因表达集中于Ⅲ、Ⅳ期性腺,Lhx1a在精巢中弱表达,Lhx1b卵巢中的表达明显高于精巢,而在Ⅰ、Ⅱ、Ⅱ、Ⅴ期性腺几乎均不表达。由此推断牙鲆Lhx1a和Lhx1b均为性别相关基因,但在两性性腺发育中的作用可能各有不同。