韩国产学合作先导工程探略

产学合作先导工程(LINC)是韩国政府继区域创新型大学建设工程(NURI)后,为实现韩国地方大学与地方产业的共同发展而实施的一项重要工程。LINC工程采取扩大资助范围,增强产学合作多样化、特性化,提高产学合作持续性三大推进策略,注重技术革新型与现场实践型两类人才的培养,探索出了比较成型的产学合作先导模式,增强了地方大学的核心竞争力并促进地方经济发展。

一个线虫长非编码RNA的单细胞精度表达谱分析以及基因敲除研究

秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)中长非编码RNA(long non-protein coding RNA gene,lncRNA)的结构和功能是近年来的研究热点之一。数据表明长非编码基因linc-5在线虫的胚胎和早期幼虫均有较高表达,提示其在线虫的胚胎发育过程中具有非常重要的作用。选取线虫两个物种C.elegans和C.briggsae为实验材料,构建启动子与荧光报告基因(mCherry)融合载体;通过基因枪整合到基因组上,得到纯合转基因线虫品系;结合在线虫中建立的单细胞精度的表达谱分析技术,对线虫两个物种幼虫L1时期的表达谱比较,说明linc-5在物种间具有非常强的保守性;在线虫中利用基因组编辑工具CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated system)技术成功敲除linc-5基因,为进一步研究linc-5的功能提供了良好基础。

海鞘细胞核骨架与细胞质骨架连接复合体相关基因的克隆及表达分析

为了研究LINC(Linker of nucleoskeleton and cytoskeleton)复合体相关基因KASH(Klarsicht/Anc/Syne-1)和SUN(Sad1/UNC84)在海鞘(Ciona robusta)细胞核位置决定中的角色和作用,本研究鉴定并分别克隆了海鞘LINC复合体中编码2种Cr_KASH蛋白和2种Cr_SUN蛋白的基因。荧光定量PCR方法分析了上述4个基因在海鞘胚胎各个时期的表达量,发现在胚胎发育的尾芽延伸期,几种基因的表达量均有不同程度的提高。原位杂交方法揭示Cr_KASH1、Cr_SUN1和Cr_SUN2特异表达在海鞘胚胎的脊索组织中,而Cr_KASH2则特异表达在肌肉组织。在NIH/3T3细胞中的亚细胞定位分析证实,上述LINC复合体蛋白与不同的细胞骨架交联。通过破坏细胞骨架微丝和微管蛋白的聚合发现会影响KASH和SUN在细胞中的定位和结构,暗示海鞘LINC复合体成分和细胞质骨架蛋白协同作用调控细胞核的形态和位置。本文研究结果表明,在海鞘不同胚胎发育阶段和不同组织中,细胞核骨架或许通过不同LINC蛋白组分与细胞骨架结合影响细胞核的行为。