长链非编码RNA LINC00313通过铁死亡抵抗促进肺癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC00313促进肺癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法:选用肺癌细胞株A549、H466、H1299、H522,通过实时荧光定量PCR检测LncRNA LINC00313在肺癌细胞中的表达。采用Transwell实验和划痕实验等表型实验检测肺癌细胞侵袭和迁移情况。敲除LINC00313,CCK-8实验及流式细胞仪检测过量GPX4对肺癌细胞增殖和细胞凋亡的影响。LINC00313基因敲除后,检测在Erastin或RSL-3处理的A549细胞内的铁水平及ROS含量,探讨LINC00313与肺癌细胞铁死亡的关系。结果:与正常细胞相比,肺癌细胞中LINC00313的表达明显升高(P<0.05);表型实验结果显示LINC00313促进肺癌细胞增殖,同时抑制其凋亡。Transwell实验和划痕实验结果表明LINC00313可以促进肺癌细胞侵袭和迁移。GPX4过表达可以逆转LINC00313敲除导致肺癌细胞的增殖下降和凋亡增加。在Erastin或RSL3处理的A549细胞中,LINC00313基因敲除后细胞内的铁和Fe^(2+)水平下降,脂质过氧化ROS(Lipid ROS)含量产生显著减少。结论:肺癌细胞中LINC00313表达明显升高,过表达LINC00313可以促进肺癌细胞侵袭和迁移,作用机制可能与促进肺癌细胞铁死亡抵抗,从而导致肺癌的发生及转移有关。

马齿苋多糖通过调控LINC00313/miR-566表达影响乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖和凋亡

目的探讨马齿苋多糖(POP-A)通过调控LINC00313/miR-566轴对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡的影响。方法采用不同浓度(1.25、2.5、5mg/mL)的POP-A处理人乳腺癌细胞MDA-MB-231,分别将si-NC、si-LINC00313转移至MDA-MB-231细胞,分别将pcDNA、pcDNA-LINC00313转染至MDA-MB-231细胞后加入浓度为5mg/mL POP-A处理24h;采用MTT法检测细胞增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用qRT-PCR法检测LINC00313与miR-566的表达量;双荧光素酶报告实验检测LINC00313与miR-566的靶向关系;Western blot法检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)蛋白表达量。结果不同剂量的POP-A可明显提高细胞增殖抑制率、凋亡率、Bax蛋白水平及miR-566的表达水平(P<0.05),降低Ki-67、Bcl-2蛋白水平及LINC00313的表达水平(P<0.05);转染si-LINC00313可明显提高细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05),降低Ki-67、Bcl-2蛋白水平(P<0.05);转染pcDNA-LINC00313可明显逆转POP-A对MDA-MB-231细胞增殖及凋亡的作用。结论马齿苋多糖可通过下调LINC00313而上调miR-566从而抑制乳腺癌细胞增殖及诱导细胞凋亡。

干扰LINC00313可促进miR-302的表达影响宫颈癌细胞增殖及凋亡

目的 探讨lncRNALINC00313对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其对miR-302的调控作用。方法 采用qRT-PCR法检测宫颈癌组织、癌旁组织中LINC00313的表达水平;体外培养人宫颈癌细胞SiHa,分为si-NC组(转染si-NC)、si-LINC00313组(转染si-LINC00313)、si-LINC00313+anti-miR-302组(共转染si-LINC00313、anti-miR-302)、si-LINC00313+anti-miR-NC组(共转染si-LINC00313、anti-miR-NC)。qRT-PCR检测LINC00313、miR-302表达水平;MTT实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率;双荧光素酶报告实验检测LINC00313、miR-302的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白水平。结果 与癌旁组织比较,宫颈癌组织LINC00313的表达水平显著升高(P<0.05);转染si-LINC00313可明显降低OD值、S期细胞比例及Bcl-2蛋白水平(P<0.05),提高G0-G1期细胞比例、凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC00313可靶向结合miR-302;抑制miR-302表达可逆转干扰LINC00313对SiHa细胞增殖及凋亡的影响。结论 干扰LINC00313可通过上调miR-302抑制宫颈癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。