LINC00341通过MAPK通路抑制肺腺癌细胞增殖

目的探讨LINC00341对肺腺癌细胞增殖的影响及其潜在机制。方法在公共数据集SEO和TCGA中分析肺腺癌中LINC00341 mRNA的表达,ROC曲线分析其诊断价值,对RMA和OKAYAMA数据进行生存分析,并通过美国密歇根大学医院肺癌样本进行RNA-seq验证和ROC曲线分析;结合基因本体(gene otology,GO)分析LINC00341基因生物学功能;通过siRNA沉默LINC00341的表达,根据不同处理分为对照组(NT)和沉默组(siLINC00341),并验证细胞转染效率;采用WST-1和平板克隆实验检测细胞增殖能力;RNA亚细胞定位检测LINC00341定位,Western blotting检测其对MAPK信号通路相关蛋白表达水平的影响。结果LINC00341在肺腺癌组织中低表达(3个数据集P<0.0001),ROC曲线分析表明其可作为肺腺癌的诊断标记物,同时低表达LINC00341与患者较好的预后相关(P=0.004)。GO富集分析结果表明LINC00341主要与RNA聚合酶II启动子转录调控、蛋白质结合等有关。沉默LINC00341可以促进肺腺癌细胞的增殖(P<0.05)和克隆形成(P<0.05),且MAPK信号通路蛋白STAT3和ERK均被激活(P<0.05),RNA定位显示LINC00341主要分布在细胞核。结论LINC00341可能在转录水平调控MAPK通路,进而抑制肺腺癌发展,并可作为肺腺癌重要的诊断和预后标志物。

LINC00341通过靶向miR-187对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的 探讨LINC00341对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的靶向影响及机制。方法 将LINC00341过表达载体(pcDNA3.1-LINC00341)转染前列腺癌细胞DU145,检测细胞的增殖力、细胞凋亡及迁移和侵袭能力,蛋白质印记(Western blot)法检测Cyclin D1、P21、Bcl-2、Bax、MMP-2和E钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。双荧光素酶报告实验联合RT-qPCR验证LINC00341对miR-187的靶向调控关系。将miR-187模拟物(miR-187 mimics)和pcDNA3.1-LINC00341共转染DU145细胞,采用上述方法检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力变化。结果 过表达LINC00341抑制DU145细胞Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2的表达,促进P21、Bax和E-cadherin蛋白的表达水平,抑制DU145细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。miR-187是LINC00341的靶基因,LINC00341靶向负性调控miR-187表达。过表达miR-187可逆转LINC00341过表达对DU145细胞的增殖、迁移侵袭抑制作用和凋亡促进作用。结论 LINC00341通过靶向下调miR-187抑制DU145细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。