LINC00491靶向调控miR-532-3p对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨LINC00491对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能的作用机制。方法:qRT-PCR检测LINC00491、miR-532-3p的表达量;Pearson法分析前列腺癌组织中LINC00491与miR-532-3p表达量的相关性;体外培养人前列腺癌细胞22RV1,采用脂质体转染法将si-NC、si-LINC00491、miR-NC、miR-532-3p mimics、si-LINC00491与anti-miR-NC(共转染)、si-LINC00491与anti-miR-532-3p(共转染)分别转染至22RV1细胞;CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Transwell检测细胞的迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验与qRT-PCR验证LINC00491与miR-532-3p的靶向调控作用;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量。结果:前列腺癌组织中LINC00491的表达量高于癌旁组织(P<0.05),而miR-532-3p的表达量低于癌旁组织(P<0.05);LINC00491与miR-532-3p呈负相关(r=-0.858 2,P<0.001);分别转染si-LINC00491与miR-532-3p mimics后细胞存活率和MMP-2、MMP-9蛋白水平降低(P<0.05),S期细胞比例降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),G0/G1期细胞比例升高(P<0.05);LINC00491可靶向调节miR-532-3p表达;共转染si-LINC00491与anti-miR-532-3p可恢复si-LINC00491对细胞生物学行为的作用。结论:干扰LINC00491表达可通过上调miR-532-3p表达抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移及侵袭。

姜黄素调控LINC00491/miR-532-3p轴抑制前列腺癌发生发展的机制研究

目的探讨姜黄素调控LINC00491/miR-532-3p轴抑制前列腺癌发生发展的机制。方法取人前列腺癌细胞株22RV1体外培养后分为正常对照组、姜黄素组、姜黄素+si-LINC00491组、姜黄素+si-LINC00491+miR-532-3p inhibitor组。RT-PCR检测LINC00491、miR-532-3p表达水平;双荧光素酶实验检测LINC00491、miR-532-3p的靶向关系;细胞计数试剂盒8(CCK8)、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭等肿瘤恶性行为;Western blot检测细胞增殖相关KI67、凋亡相关半胱氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、迁移侵袭相关基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达。取60只BALB/c裸小鼠建立前列腺癌皮下移植瘤模型,将建模成功的裸小鼠随机分为空白对照组、姜黄素组、姜黄素+oe-LINC00491组、oe-LINC00491组、姜黄素+sh-LINC00491组和sh-LINC00491组。观察瘤块大小、侵袭、转移和腹腔播散情况,记录动物生存期;RNA FISH检测LINC00491在原发癌灶和转移癌灶中的定位和表达水平的变化;TdT介导的dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)染色检测细胞凋亡;RT-PCR检测LINC00491、miR-532-3p表达水平;Western blot检测KI67、Caspase 3、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果姜黄素可抑制前列癌细胞及前列腺癌荷瘤裸小鼠癌组织中LINC00491的表达,促进miR-532-3p的表达,抑制LINC00491表达可加强姜黄素的作用,而下调miR-532-3p的表达可逆转抑制LINC00491表达对姜黄素作用的影响。荧光素酶实验结果显示,LINC00491可靶向调控miR-532-3p的表达。体外细胞实验结果显示,姜黄素可提高人前列腺癌细胞凋亡率,降低细胞迁移和侵袭能力,抑制细胞增殖相关KI67、迁移侵袭相关MMP-2、MMP-9蛋白表达,促进凋亡相关Caspase 3蛋白表达,且下调LINC00491表达可加强姜黄素对前列癌细胞恶性行为及上述蛋白表达的作用,下调miR-532-3p表达可逆转下调LINC00491表达对前列癌细胞恶性行为及上述蛋白表达的作用。动物体内实验结果同样显示,姜黄素可提高前列腺癌荷瘤裸小鼠生存期,抑制肿瘤生长和转移,促进癌组织细胞凋亡,抑制KI67、MMP-2、MMP-9蛋白表达,促进Caspase 3蛋白表达,且下调LINC00491表达可加强姜黄素对前列腺癌荷瘤裸小鼠癌组织生长、转移及上述蛋白表达的作用。结论动物实验表明,姜黄素可通过靶向调控LINC00491/miR-532-3p轴,抑制KI67、MMP-2、MMP-9表达,促进Caspase 3表达,发挥抑制前列腺癌发生发展的作用。