LINC00612靶向结合Bcl-2抑制Aβ1-42孵育的神经元凋亡

目的探讨LINC00612对β-淀粉样蛋白(amyloid proteinβ,Aβ)1-42孵育的SH-SY5Y细胞凋亡的影响。方法利用Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞建立阿尔茨海默病神经元损伤模型。应用qRT-PCR实验检测Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞中LINC00612的表达。将LINC00612过表达质粒转染至Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞,Western blot实验检测Bcl-2的表达,Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡。RNA-pulldown和RIP实验检测LINC00612与Bcl-2的结合作用。结果LINC00612在Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞中低表达。过表达LINC00612显著增加Bcl-2表达量,降低细胞凋亡。RNA-pulldown和RIP实验结果显示LINC00612能够与直接Bcl-2结合。结论过表达LINC00612能够上调Bcl-2表达量,抑制Aβ1-42孵育的SH-SY5Y细胞凋亡。

LINC00612靶向miR-30d对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响

为探讨长基因间非编码RNA 00612(LINC00612)靶向微小RNA(miR)-30d对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响,该研究采用实时定量PCR检测心肌梗死患者血浆中LINC00612、miR-30d的相对水平。建立大鼠心肌细胞H9C2缺氧/复氧损伤模型。将空载体质粒(pcDNA)、LINC00612过表达载体(pcDNA-LINC00612)、miRNA抑制物阴性对照(anti-miR-NC)、miR-30d抑制物(anti-miR30d)、pcDNA-LINC00612+miR-30d模拟物分别转染至H9C2细胞,缺氧/复氧处理后,采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,商品试剂盒检测细胞中超氧化物岐化酶(SOD)活性以及细胞培养液中肌酸激酶(CK)和乳酸盐脱氢酶(LDH)水平。该研究得出与健康对照者比较,心肌梗死患者血浆中LINC00612的相对水平显著降低(P<0.05),miR-30d的相对水平显著升高(P<0.05)。缺氧/复氧显著下调LINC00612的表达(P<0.05),上调miR-30d的表达(P<0.05),降低细胞活力、SOD活性(P<0.05),并增加凋亡率以及细胞培养液中CK、LDH的水平(P<0.05)。过表达LINC00612或抑制miR-30d显著增加细胞活力、SOD活性(P<0.05),并降低凋亡率以及细胞培养液中CK、LDH水平(P<0.05)。过表达miR-30d显著降低细胞活力、SOD活性(P<0.05),并增加凋亡率以及细胞培养液中CK、LDH水平(P<0.05)。过表达miR-30d可明显减弱LINC00612过表达对缺氧/复氧心肌细胞活力、凋亡、氧化损伤的影响(P<0.05)。总之,LINC00612靶向miR-30d可减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡和氧化应激损伤。