LINC01234通过调控IGF2BP1 c-Myc对急性髓系白血病细胞增殖侵袭迁移的影响

目的:探讨LINC01234通过调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)/c-Myc对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:分析2019年3月至2021年9月在湖北省恩施州中心医院确诊的31例AML患者和在本院体检的24例健康志愿者的外周血标本。通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测分析LINC01234在AML标本和细胞系(MV-4-11、NB4、KG-1、THP-1、HL-60)中的表达模式。HL-60细胞随机记为空白对照(blank control,BC)组、sh-control组、sh-LINC01234组、sh-LINC01234+pcDNA-control组、 sh-LINC01234+pcDNA-c-Myc组。qRT-PCR检测细胞中LINC01234、IGF2BP1和c-Myc的表达。细胞计数试剂盒-8实验、transwell迁移和侵袭实验用于细胞增殖能力、细胞侵袭和迁移功能的研究。通过RNA免疫沉淀和RNA pulldown实验证实LINC01234、IGF2BP1和c-Myc在AML细胞中的调节相关性。结果:与健康志愿者标本和人骨髓基质细胞HS-5相比,LINC01234在AML标本和5种细胞系中表达均升高(P<0.05)。sh-LINC01234下调HL-60细胞中LINC01234水平后,OD值显著降低,侵袭、迁移细胞数目显著减少(P<0.05)。LINC01234结合IGF2BP1,促进IGF2BP1与c-Myc mRNA的相互作用,从而促进c-Myc mRNA的稳定性(P<0.05)。c-Myc过表达逆转了LINC01234沉默对HL-60细胞增殖、转移的阻碍作用(P<0.05)。结论:LINC01234是一种新型AML相关的lncRNA,通过竞争性结合IGF2BP1促进c-Myc mRNA的稳定性,进而促进AML细胞增殖、侵袭和迁移。

LINC01234在肿瘤中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)一般不参与基因编码和蛋白质合成,但是可在表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控目的基因表达。lncRNA的亚细胞定位对其生物学功能具有重要意义。细胞核中的lncRNA主要在转录过程中发挥作用,而细胞质中的lncRNA则倾向在转录后起作用,并影响级联信号传导通路。近年来研究发现基因间长链非编码RNA01234(LINC01234)功能较为复杂,在乳腺癌、肺癌、胃癌、肾细胞癌等多种肿瘤中均高表达,在肿瘤发生与发展中发挥重要作用,可能作为肿瘤诊断、预后的生物标记。lncRNA具有高度的稳定性和组织特异性优势,且在多种体液中能被检测到,在临床上用来作为肿瘤检测指标显示出很大的优势。本文结合国内外最新研究报道,对LINC01234在肿瘤研究中的进展作一综述。

长链非编码RNA LINC01234通过靶向微小RNA-940调控前列腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01234对前列腺癌细胞的增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及其分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测收集2017年5月至2018年7月郑州大学第一附属医院收治的20例前列腺癌患者的前列腺癌组织及癌旁组织中LINC01234、微小RNA(miRNA,miR)-940的表达水平。分别将LINC01234小干扰RNA(si-LINC01234)、乱序无意义阴性序列(si-NC)、微小RNA-940模拟物(miR-940 mimics)、阴性对照基因(miR-NC)、si-LINC01234+阴性对照(anti-miR-NC)、si-LINC01234+微小RNA 940特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-940)转染至DU145细胞。分别记作si-NC、si-LINC01234、miR-NC、miR-940、si-LINC01234+anti-miR-NC、si-LINC01234+anti-miR-940组。噻唑蓝(MTT)检测各组细胞的活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;Transwell法检测各组细胞的迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证LINC01234与miR-940的靶向关系。两组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果LINC01234在前列腺癌组织中的表达水平高于癌旁组织(1.00±0.08比2.61±0.25,t=27.430,P<0.05),miR-940在前列腺癌组织中的表达水平低于癌旁组织(1.00±0.09比0.56±0.05,t=19.112,P<0.05),差异有统计学意义;转染si-LINC01234、miR-940 mimics后细胞活力显著降低(1.29±0.11比0.71±0.06;1.24±0.09比0.79±0.07,t=13.886,P<0.05),迁移细胞数[(84.36±8.12)个比(39.41±4.22)个;(86.25±8.14)个比(44.37±4.48)个]与侵袭细胞数[(67.25±6.74)个比(28.44±3.58)个;(69.48±6.25)个比(33.47±4.18)个]显著减少(t=14.735、15.309,P<0.05),细胞凋亡率[(6.58±0.61)%比(20.36±2.14)%;(7.11±0.71)%比(18.26±1.36)%]显著升高(t=18.577,P<0.05),差异均有统计学意义;双荧光素酶报告实验证实miR-940过表达可抑制野生型(WT)-LINC01234细胞的荧光活性,LINC01234可负向调控miR-940的表达(t=328.298,P<0.05),差异有统计学意义;干扰miR-940表达可逆转抑制LINC01234表达对前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用及其对凋亡的促进作用。结论lncRNA LINC01234可能通过靶向miR-940促进前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,抑制细胞凋亡。