LINC01285促进结直肠癌细胞的增殖和转移

目的探究长链非编码RNA LINC01285在结直肠癌(CRC)中的表达特点及临床意义,阐明潜在的生物学功能及调控机制。方法基于Starbase生物数据库检索LINC01285在CRC及癌旁组织中的表达量;收集本单位结直肠癌患者的CRC样本及周围正常样本各70例,分组为肿瘤组与非肿瘤组;利用荧光定量PCR实验(RT-qPCR)验证本中心CRC队列、肿瘤细胞中LINC01285的表达量,并分析其与患者临床病理参数及无瘤生存时间的关系。采用脂质体转染技术构建LINC01285低表达细胞株并分为si-Control(对照组)、si-LINC01285-1(敲低组1)、si-LINC01285-2(敲低组2)3个组,采用CCK-8实验、流式细胞学、Transwell法及蛋白印迹法检测LINC01285对结直肠癌细胞的增殖、凋亡及转移能力的影响及潜在的调控机制。结果Starbasev3.0公共数据库获取TCGA-COAD转录组测序数据发现LINC01285在癌组织中的表达量明显高于正常组织(P=0.00016);RT-qPCR结果显示:与非肿瘤组相比,LINC01285在肿瘤组表达水平显著上调(P=0.0002),其表达量与肿瘤组织学分化程度(P=0.036)、T分期(P=0.000)、淋巴结转移(P=0.001)、TNM分期(P=0.000)、Duke分期(P=0.009)和无瘤生存时间(P=0.0102)密切相关。相比于正常结直肠粘膜细胞,CRC细胞(尤其在SW620和HT-29)内LINC01285的表达水显著高表达(P<0.001)。相比于si-Control组,脂质体转染的细胞(si-LINC01285-1、si-LINC01285-2)内LINC01285表达量显著下降(P<0.001)。同时相比于si-Control组,LINC01285敲低CRC细胞组的增殖能力明显降低(P<0.001)、早期凋亡、晚期凋亡及总凋亡率明显升高(P<0.05)。相比于si-Control组,LINC01285敲低组的CRC细胞迁移和侵袭能力显著下降(P<0.001),且上皮间质转化相关通路的E-钙粘蛋白表达量显著升高(P<0.001)、N-钙粘蛋白显著下调(P<0.001)。结论LINC01285的表达与CRC的预后高度相关,可调节上皮-间质转化通路影响CRC细胞的增殖、凋亡与转移能力。