LINC01503在喉鳞癌中表达增高并促进喉鳞癌进展

目的:探讨长链非编码RNA LINC01503在喉鳞癌中的表达及其促癌作用。方法:通过qRT-PCR的方法检测LINC01503在喉鳞癌组织及细胞中的表达水平,并分析其表达水平与临床参数的关系,通过CCK-8、克隆形成实验检测LINC01503对喉鳞癌细胞增殖能力的影响,通过Transwell小室迁移及侵袭实验检测LINC01503对细胞迁移及侵袭能力的影响,通过裸鼠动物模型进行体内实验,进一步验证LINC01503促进喉鳞癌进展的生物学作用。结果:LINC01503在喉鳞癌中表达增高,其表达水平与喉鳞癌患者的临床分期、组织病理分化程度及颈部淋巴结是否转移有关。体内体外研究证实,通过质粒转染过表达LINC01503,能够促进喉鳞癌细胞的增殖、迁移及侵袭能力,能够促进裸鼠体内荷瘤的生长,而敲低LINC01503的表达能获得相反的结果。结论:LINC01503在喉鳞癌中表达增高,作为促癌基因,能够促进喉鳞癌的增殖、迁移及侵袭能力等恶性表型的进展。

肿瘤中长链非编码RNA LINC01503的表达及分子调控研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非编码RNA,在染色体修饰、转录调控以及转录后加工等水平调控基因的表达,从而影响肿瘤的发生发展,探究lncRNA在肿瘤中的分子调控机制是近几年来研究热点之一。现有研究证实LINC01503是一种在鳞状细胞癌研究中新近发现的长链非编码RNA,在结直肠癌、卵巢癌、肺癌及胶质瘤等诸多人类肿瘤中呈现显著高表达,其异常表达常与患者不良预后密切相关,并且能够通过ceRNA机制、上皮间质转化、参与多种相关信号通路以及表观遗传修饰等途径促进肿瘤细胞的恶性生物学行为,包括细胞增殖、迁移、侵袭和抗凋亡等;对LINC01503作用的研究有助于相关肿瘤的诊断、治疗及评估预后。本文就LINC01503在肿瘤中的表达及分子调控研究进展进行综述。

异甘草素调控LINC01503对肺鳞癌细胞的作用研究

背景与目的异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)是甘草中重要的药理成分,其具有一系列的生理和药理活性,同时具有显著的抗肿瘤活性,可以作为癌症靶向治疗的一种潜在药物。LINC01503是一种致癌基因,其与多种癌症的恶性生物学过程密切相关。本研究旨在探讨ISL通过调控LINC01503对肺鳞癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法收集2021年1月至2022年12月于唐山市人民医院治疗的肺鳞癌患者和健康人血浆。用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测LINC01503在肺鳞癌血浆、组织及细胞中的表达情况。用不同浓度的ISL处理肺鳞癌细胞24 h,用qRT-PCR检测LINC01503表达情况。将细胞进行分组处理:si-NC组、si-LINC01503组、DMSO(0.1%的二甲基砜)组、ISL组、pc DNA3.1(+)-NC组、pc DNA3.1(+)-LINC01503组、ISL+pc DNA3.1(+)-NC组及ISL+pc DNA3.1(+)-LINC01503组。采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验和划痕实验研究LINC01503对肺鳞癌细胞功能表型的影响。结果荧光原位杂交结果显示,肺鳞癌患者组织芯片中,肺鳞癌组织LINC01503的平均荧光强度高于癌旁组织(P<0.05)。肺鳞癌患者血浆中LINC01503的表达高于健康人血浆表达(P<0.05)。敲降LINC01503可以抑制肺鳞癌细胞的增殖、侵袭及迁移并促进调亡(P<0.05)。ISL可以抑制肺鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移并促进调亡(P<0.05)。过表达LINC01503后用ISL进行干预可逆转过表达LINC01503对肺鳞癌细胞的增殖、侵袭及迁移的促进作用及对调亡的抑制作用(P<0.05)。结论LINC01503在肺鳞癌中呈高表达,LINC01503可以促进肺鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移并抑制调亡,ISL可以通过调控LINC01503的表达抑制肺鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移,促进肺鳞癌细胞的凋亡。

LINC01503通过miR-342-3p/IGF2R轴促进上皮性卵巢癌的进展

目的:探讨LINC01503在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达水平和生物学功能及其可能的作用机制。方法:收集2015年5月至2016年5月间在河北医科大学第四医院妇瘤科手术切除并经病理学确诊的85例EOC患者的肿瘤组织和输卵管组织。常规培养人EOC细胞A2780、SKOV3、OVCAR3和OV90及正常人卵巢上皮细胞IOSE80,将si-LINC01503、si-NC及miR-342-3p mimic、miR mimic NC分别转染至SKOV3和A2780细胞,分别作为si-LINC01503组、si-NC组、miR-342-3p mimic组和miR mimic NC组。q PCR法检测EOC组织和细胞中LINC01503的表达水平,Kaplan-Meier法分析LINC01503表达水平与患者生存的关系。双荧光素酶报告基因实验验证LINC01503/miR-342-3p/IGF2R轴相关分子间的靶向关系。平板克隆、划痕愈合和Transwell实验分别检测敲低LINC01503及转染miR-342-3p mimic对A2780和SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。WB法检测EOC细胞中LINC01503/miR-342-3p通路对IGF2R蛋白表达的影响。构建A2780细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲低LINC01503对移植瘤生长的影响。结果:EOC组织和细胞中LINC01503表达水平分别显著高于输卵管组织和IOSE80细胞(均P<0.01),LINC01503高表达组患者术后PFS和OS均显著短于LINC01503低表达组患者(均P<0.01)。敲低LINC01503、转染miR-342-3p mimic均可抑制EOC细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.01)。敲低LINC01503可下调IGF2R的表达(P<0.01),这一现象可通过转染miR-342-3p inhibitor挽救。敲低LINC01503可抑制A2780细胞裸鼠移植瘤的生长(P<0.01)。结论:在EOC组织和细胞中呈高表达的LINC01503与患者的不良预后密切相关,LINC01503可能通过吸附miR-342-3p影响IGF2R表达进而促进EOC的进展。

LINC01503调控ERK磷酸化促进食管鳞状细胞癌放疗抵抗的机制研究

目的探究长链非编码核糖核酸(LncRNA)LINC01503调控细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)通路磷酸化促进食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)放疗抵抗的作用机制。方法收集2014年6月~2017年12月内蒙古自治区人民医院ESCC患者癌组织及癌旁组织标本79例,采用实时荧光定量PCR检测LINC01503在ESCC组织中的表达水平,分析LINC01503与ESCC患者临床病理参数、放疗敏感性及预后的关系。构建ESCC放疗抵抗细胞株KYSE150R,检测KYSE150R细胞中LINC01503的表达;转染siRNA下调KYSE150R中LINC01503的表达。CCK8实验检测各组细胞放疗敏感性;流式细胞试验检测各组细胞周期和细胞凋亡;Western blot检测各组细胞中ERK1/2,PERK1/2,细胞周期蛋白D1(cyclin D1),细胞周期素依赖性激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4),凋亡蛋白Bcl-2和Bax蛋白表达。结果与癌旁组织相比,LINC01503在ESCC组织中表达上调(4.15±1.21 vs 0.96±0.43),差异有统计学意义(t=22.083,P<0.001)。LINC01503高表达与患者T分期、淋巴结转移、TNM分期、放疗抵抗有关,差异均有统计学意义(t=2.322~2.939,均P<0.05)。LINC01503预测预后的曲线下面积为0.780(95%CI:0.676~0.884),灵敏度和特异度分别为81.58%,67.05%。LINC01503高表达组5年生存率低于LINC01503低表达组[41.86%(18/43)vs 63.89%(23/36)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.430,P=0.035)。与si-NC组相比,si-LINC01503组KYSE150R细胞的放疗敏感性增加,差异均有统计学意义(t=17.391~33.692,均P<0.001);si-LINC01503组KYSE150R细胞周期阻滞在G0/G1期(61.47%±3.60%vs 52.15%±2.11%),细胞凋亡增加(31.95%±2.40%vs 3.68%±0.47%),差异均有统计学意义(t=4.602,20.022;P=0.004,0.002);PERK1/2(0.24±0.03 vs 1.25±0.09),cyclin D1(0.18±0.06 vs 1.40±0.14),CDK4(0.87±0.09 vs 1.37±0.16)和Bcl-2(0.16±0.03 vs 0.85±0.07)蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加(0.69±0.06 vs 0.22±0.05),差异均有统计学意义(t=4.718~18.440,均P<0.05)。结论LINC01503通过促进ERK磷酸化调控细胞周期和凋亡促进ESCC细胞放疗抵抗,是逆转ESCC放疗抵抗的潜在分子靶点。

LncRNA LINC01503调控miR-331-3p/Nrf2/Keap1信号通路对缺氧诱导PC12细胞损伤的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)LINC01503对缺氧诱导的PC12细胞增殖、凋亡、氧化应激的影响及其对miR-331-3p/核因子相关因子(Nrf)2/Kelch样ECH相关蛋白(Keap)1信号通路的调控作用。方法采用缺氧诱导PC12细胞建立细胞损伤模型,分别将si-NC、si-LINC01503、miR-NC、miR-331-3p mimics、anti-miR-NC、anti-miR-331-3p、si-LINC01503与anti-miR-NC、si-LINC01503与anti-miR-331-3p转染至PC12细胞48 h后进行缺氧处理24 h;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测LINC01503、miR-331-3p的表达量;噻唑蓝(MTT)、流式细胞术分别检测细胞增殖、凋亡率;检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;双荧光素酶报告实验检测LINC01503与miR-331-3p的靶向关系;Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、裂解半胱天冬酶(Cleaved-caspase)-3、Nrf2、Keap1蛋白表达量。结果缺氧诱导的PC12细胞中LINC01503的表达水平明显升高,miR-331-3p表达、细胞活力及CyclinD1蛋白水平明显降低,凋亡率及Cleaved-caspase-3、Nrf2、Keap1蛋白水平、MDA、LDH的含量明显升高,而SOD的含量明显降低(均P<0.05);转染si-LINC01503或转染miR-331-3p mimics后可明显提高细胞活力、CyclinD1蛋白水平及SOD的含量(P<0.05),降低凋亡率、Cleaved-caspase-3、Nrf2、Keap1蛋白水平及MDA、LDH的含量(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC01503可充当miR-331-3p竞争性内源RNA;共转染si-LINC01503与anti-miR-331-3p可明显逆转抑制LINC01503表达对缺氧诱导的PC12细胞增殖、凋亡、氧化应激及Nrf2/Keap1信号通路的作用。结论抑制LINC01503表达可通过上调miR-331-3p的表达而促进细胞增殖及抑制氧化应激、凋亡从而减轻缺氧诱导的PC12细胞损伤,其作用机制可能与抑制Nrf2/Keap1信号通路的活化有关。

TGF-β诱导的linc01503促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、侵袭及EMT过程

目的:探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)linc01503在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)组织和细胞中的表达及其对ESCC细胞增殖、侵袭及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法:选取2012年1月至2014年12月河北医科大学第四医院收治的119例ESCC患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测ESCC组织及ESCC细胞系(Kyse150、Kyse170、Eca109、TE1和TE13)中linc01503的表达水平;分别用pGPU6-shRNAlinc01503转染、TGF-β1处理ESCC细胞,用qPCR法检测转染前后EMT相关基因及处理前后linc01503表达的变化,用MTS及Transwell小室法检测linc01503对ESCC细胞增殖及侵袭的影响。结果:linc01503在ESCC组织和细胞系中高表达(均P<0.05),ESCC组织中linc01503高表达与患者淋巴结转移、浸润深度、TNM分期有关联,并与生存期密切相关(均P<0.05)。TGF-β处理促进ESCC细胞的EMT过程,同时诱导linc01503表达明显上调。linc01503敲低明显抑制细胞的增殖及侵袭能力(均P<0.05),同时明显增加了E-cadherin的表达而降低了N-cadherin、vimentin基因的表达(均P<0.05)。结论:linc01503作为TGF-β的下游效应基因之一,促进了ESCC细胞的增殖、侵袭及EMT过程。

抑制lncRNA LINC01503通过靶向调控miR-335-5p对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)LINC01503对肺癌细胞活力、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:将人肺癌H1299细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-LINC01503组(转染si-LINC01503)、pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-LINC01503组(转染pcDNA-LINC01503)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-335-5p组(转染miR-335-5p mimics)、si-LINC01503+anti-miR-NC组(共转染si-LINC01503和anti-miR-NC)、si-LINC01503+anti-miR-335-5p组(共转染si-LINC01503和anti-miR-335-5p)、miR-NC+WT-LINC01503组(共转染miR-NC和WT-LINC01503)、miR-NC+MUT-LINC01503组(共转染miR-NC和MUT-LINC01503)、miR-335-5p+WT-LINC01503组(共转染miR-335-5p和WT-LINC01503)和miR-335-5p+MUT-LINC01503组(共转染miR-335-5p和MUT-LINC01503)。采用RT-qPCR检测miR-335-5p和LINC01503的表达水平;Western blot检测蛋白表达;MTT法检测细胞活力;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力的变化;双萤光素酶报告基因实验验证LINC01503与miR-335-5p的靶向关系。结果:与正常肺组织相比,肺癌组织中LINC01503表达水平显著升高,miR-335-5p表达水平显著降低(P<0.05);与Ⅰ/Ⅱ期阶段相比,Ⅲ/Ⅳ期肺癌组织中LINC01503表达水平显著升高,miR-335-5p表达水平显著降低(P<0.05);LINC01503高表达的患者短期生存率显著低于LINC01503低表达的患者(P<0.05)。与正常支气管上皮细胞系BEAS-2B相比,肺癌细胞系H1299、A549和SPC-A-1中miR-335-5p的表达水平显著降低,LINC01503的表达水平显著升高(P<0.05);过表达miR-335-5p、抑制LINC01503表达均可抑制H1299细胞的活力、迁移和侵袭,抑制细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达(P<0.05)。LINC01503靶向调控miR-335-5p的表达,干扰miR-335-5p表达能逆转抑制LINC01503表达对H1299细胞活力、迁移和侵袭的抑制作用。结论:抑制lncRNA LINC01503表达可抑制肺癌细胞的活力、迁移和侵袭,其机制可能与靶向调控miR-335-5p有关。

非小细胞肺癌组织长链非编码RNA LINC01503与微小RNA-335-5p的表达及其临床意义

目的探究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中长链非编码RNA(lncRNA) LINC01503、微小RNA(miR)-335-5p的表达及其临床意义。方法选取2016年1—12月于安徽医科大学附属宿州医院诊治的88例NSCLC患者,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织和癌旁组织中lncRNA LINC01503、miR-335-5p的表达量,分析癌组织中lncRNA LINC01503、miR-335-5p表达的相关性及随访期间患者的生存情况。结果 NSCLC癌组织中lncRNA LINC01503表达量明显高于癌旁组织[(2.63±0.30)比(1.05±0.21)],miR-335-5p表达量明显低于癌旁组织[(1.14±0.23)比(1.92±0.22)],差异均有统计学意义(均P <0.001)。TNMⅢ期患者癌组织中lncRNA LINC01503表达量高于TNMⅠ~Ⅱ期、miR-335-5p表达量低于TNMⅠ~Ⅱ期,差异均有统计学意义(均P <0.001)。癌组织中lncRNA LINC01503与miR-335-5p的表达量呈负相关(r=-0.612,P <0.001)。lncRNA LINC01503高表达患者3年生存率及平均生存时间显著低于/短于lncRNA LINC01503低表达患者,miR-335-5p高表达患者3年生存率及平均生存时间显著高于/长于miR-335-5p低表达患者(均P <0.05)。结论 NSCLC癌组织中lncRNA LINC01503表达量升高,miR-335-5p表达量下降,二者表达量呈负相关,可能成为提示NSCLC预后新的肿瘤标志物。