盐酸小檗碱介导LINC01619/miR-27a/FOXO1通路改善糖尿病肾病模型db/db小鼠内质网应激作用研究

目的研究盐酸小檗碱改善糖尿病肾病模型小鼠肾功能的作用及机制。方法取8只C57BL/KS-db(db/m)雄性小鼠作为对照组,24只C57BL/KS-db(db/db)雄性小鼠随机分为模型组、盐酸二甲双胍(300 mg·kg^(−1))组和盐酸小檗碱(300 mg·kg^(−1))组,ig给药,每天给药1次,连续给药8周,对照组和模型组ig相同体积的蒸馏水。称体质量及肾脏质量,计算肾脏指数;采用全自动生化分析仪检测尿液中尿肌酐、24 h尿蛋白,以及血样中血肌酐、尿素氮的水平,计算肌酐清除率;采用苏木素-伊红(HE)染色、糖原过碘酸-雪夫(PAS)染色和马松(Masson)染色检测肾脏组织病理损伤程度;采用酶联免疫吸附剂测定(ELISA)法检测肾脏组织活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)水平;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肾脏组织LINC01619/miR-27a表达水平;采用Western blotting法检测肾脏组织叉头框蛋白O1(FOXO1)/葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白表达情况。结果与模型组比较,盐酸小檗碱组空腹血糖、体质量、肾脏指数、24 h尿蛋白、血肌酐和血尿素氮显著降低(P<0.01),尿肌酐和肌酐清除率显著升高(P<0.01);肾脏组织病理损伤程度明显改善;肾脏组织ROS和MDA水平显著降低(P<0.001),GSH、GSH-Px、CAT和SOD活性显著升高(P<0.05);肾脏组织中IL-1β、IL-6、TNF-α和MCP-1水平显著下降(P<0.05);肾脏组织中LINC01619表达显著升高(P<0.01),miR-27a表达显著降低(P<0.01);肾脏组织中FOXO1蛋白表达显著升高(P<0.01),而GRP78和CHOP蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论盐酸小檗碱可改善db/db小鼠的肾功能,其作用机制可能与调控LINC01619/miR-27a/FOXO1通路,改善内质网应激有关。