长链非编码RNA LINC01977在结直肠癌中的表达及临床意义

目的研究长链非编码RNA LINC01977对结直肠癌(CRC)及细胞系增殖的影响,分析与病理特征之间的关系,探讨LINC01977对结直肠癌的临床意义。方法收集2020年6月-2022年6月在郑州市中心医院首次确诊为CRC的50例患者的组织标本及临床病理资料,实时聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CRC组织和正常组织中LINC01977的表达情况;检测LINC01977在结肠正常上皮细胞系NCM460和CRC细胞系Caco2、HCT8、HT29、SW620、HCT116、SW480中表达水平。分析LINC01977与患者临床病例特征之间的相关性。通过特异性siRNA敲低HCT116、SW480靶基因表达,将细胞分为对照组(si-NC组)和实验组(si-LINC01977组),检测敲低效率,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成与EdU试验检测细胞增殖情况。结果LINC01977在CRC组织中表达为5.582(0.190,10.714),正常组织为2.151(0.022,6.076),差异有统计学意义(P<0.05)。LINC01977在HCT116中的表达量5.237(4.716,6.018)、SW480中的表达量7.246(6.287,7.826),均高于结肠上皮NCM460细胞表达量1.001(0.880,1.060),差异均有统计学意义(P均<0.05)。在癌症基因组图谱(TCGA)数据库中,LINC01977的表达量与CRC患者总生存期(OS)、无病生存期(DFS)及TNM分期相关(P<0.05);临床样本中LINC01977的表达量与肿瘤分化程度(χ^(2)=7.735,P=0.021)、TNM分期(χ^(2)=6.848,P=0.033)、淋巴结转移(χ^(2)=3.872,P=0.049)显著相关;CCK-8试验表明在培养48和72 h时,si-LINC01977(HCT116)组与si-NC(HCT116)组相比,细胞增殖差异均有统计学意义(t=11.424、20.699,P均<0.05);48和72 h时,si-LINC01977(SW480)组与si-NC(SW480)组相比,细胞增殖差异均有统计学意义(t=15.701、18.557,P均<0.05)。si-NC(HCT116)组克隆形成率显著高于si-LINC01977(HCT116)组(t=11.920),si-NC(SW480)组克隆形成率显著高于si-LINC01977(SW480)组(t=10.408),差异均有统计学意义(P均<0.05)。EdU实验表明si-NC(HCT116)组细胞数目显著高于si-LINC01977(HCT116)组(t=7.564),si-NC(SW480)组细胞数目显著高于si-LINC01977(SW480)组(t=9.866),差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论LINC01977在CRC组织和细胞系中高表达并具有显著的临床意义,敲低LINC01977可抑制CRC细胞增殖,在CRC中具有促癌因子的作用,有望成为CRC早期诊断及评估预后的潜在分子标志物。