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N^(6)-腺苷甲基化修饰及其对LINE-1的调控机制
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作者 张傲 岑山 李晓宇 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期209-218,共10页
长散布元件-1(long interspersed elements-1,LINE-1)是现今在人类基因组中唯一具有自主转座能力的转座子,其转座会引起细胞基因组结构和功能的改变,是导致多种严重疾病的重要因素。在转座过程中,LINE-1 mRNA是转座中间体的核心,宿主细... 长散布元件-1(long interspersed elements-1,LINE-1)是现今在人类基因组中唯一具有自主转座能力的转座子,其转座会引起细胞基因组结构和功能的改变,是导致多种严重疾病的重要因素。在转座过程中,LINE-1 mRNA是转座中间体的核心,宿主细胞对其进行相关修饰直接影响转座。N^(6)-腺苷甲基化修饰(m^(6)A)是真核细胞RNA上最丰富且动态可逆的表观遗传修饰。目前发现m^(6)A修饰也存在于LINE-1 mRNA上,参与LINE-1整个生命周期的调控,影响其转座和基因组中LINE-1相邻基因的表达,进而影响基因组稳定性、细胞自我更新与分化潜能,在人类发育和疾病中具有重要作用。本文介绍了LINE-1 m^(6)A修饰的位置、功能以及相关机制,并总结了LINE-1的m^(6)A修饰对其转座调控的研究进展,以期为相关疾病发生发展的机制研究和治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 m^(6)A修饰 逆转录转座子 line-1 基因组 基因组稳定性
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黑皮冬瓜LINE逆转座子RT序列的克隆与特征分析 被引量:2
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作者 赵芹 谢大森 +3 位作者 江彪 何晓明 罗少波 李明珠 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期466-473,共8页
根据LINE逆转座子逆转录酶保守序列设计简并引物,PCR扩增黑皮冬瓜“B98K”基因组DNA,获得580 bp左右目的条带。将PCR产物回收、克隆并测序,获得23条逆转酶序列,利用生物信息学软件分析其长度变异、碱基变化、相似性及系统进化关系。结... 根据LINE逆转座子逆转录酶保守序列设计简并引物,PCR扩增黑皮冬瓜“B98K”基因组DNA,获得580 bp左右目的条带。将PCR产物回收、克隆并测序,获得23条逆转酶序列,利用生物信息学软件分析其长度变异、碱基变化、相似性及系统进化关系。结果表明:这些序列长度在557~593 bp区间变异,同源比对核苷酸序列相似性为39.0%~99.3%,存在高度异质性,主要表现为缺失突变、移码突变与终止密码子突变,核苷酸序列聚类分析分为4个家族,家族1与家族2分别包含15和5个成员,占总序列数的65.22%和21.74%。对推导的氨基酸序列分析发现,第12位氨基酸残基处存在一保守的苯丙氨酸(Phe),多处位置存在半保守氨基酸残基;氨基酸序列相似性在20.0%~99.5%之间;其中8条序列可能具有转录活性,8条与15条序列分别发生移码与终止密码子突变。与已知物种构建系统发育进化树,发现冬瓜LINE逆转座子RT序列较保守,且与拟南芥、李、油菜等有较近的亲缘关系。研究结果为后续利用分子标记研究冬瓜种质遗传变异及基因组进化奠定基础。 展开更多
关键词 黑皮冬瓜 line逆转座子 逆转录酶 序列分析
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瓠瓜LINE逆转座子RT序列的克隆与特征分析 被引量:1
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作者 赵芹 谢大森 +3 位作者 何晓明 罗少波 彭庆务 陈俊秋 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-11,共11页
以瓠瓜[Lagenaria siceraria(Molina)Standl.]品种‘大籽葫芦’(‘Dazihulu’)和‘杂交瓠瓜’(‘Hybridbottlegourd’)为供试材料,对其基因组总DNA中的LINE逆转座子RT序列进行扩增,并对30个克隆产物的核苷酸序列及其编码的氨... 以瓠瓜[Lagenaria siceraria(Molina)Standl.]品种‘大籽葫芦’(‘Dazihulu’)和‘杂交瓠瓜’(‘Hybridbottlegourd’)为供试材料,对其基因组总DNA中的LINE逆转座子RT序列进行扩增,并对30个克隆产物的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行比对、同源性分析和系统进化分析。结果表明:瓠瓜品种‘大籽葫芦’与‘杂交瓠瓜’的基因组总DNA均包含长度约580bp的RT序列片段。从2个瓠瓜品种中获得的30条LINE逆转座子RT核苷酸序列(编号为LsRT1至LsRT30)长度为564~599bp,碱基A、T、G和C的数量分别为143—193、157~205、104~139和83~134,AT/GC比为1.29~1.76,表现出高度异质性。缺失突变和终止密码子突变是造成瓠瓜LINE逆转座子RT核苷酸序列长度差异的主要因素。30条瓠瓜LINE逆转座子RT核苷酸序列的相似性为47.1%~99.5%,其编码的氨基酸序列相似性为26.7%~100.0%。根据核苷酸替代值,30条瓠瓜LINE逆转座子RT核苷酸序列可分为4个家族(family),分别包含14、8、1和7条序列。氨基酸序列分析结果显示:瓠瓜LINE逆转座子RT氨基酸序列包含20个保守氨基酸残基和多个半保守氨基酸残基;有14条氨基酸序列具有终止密码子突变。Family1、Family2和Family4是可能具有转座活性的逆转座子家族,分别包含8、3和5条无终止密码子的RT氨基酸序列。根据瓠瓜与其他15种植物的LINE逆转座子RT氨基酸序列构建的系统进化树,瓠瓜与葡萄(Vitis vinifera Linn.)和黄瓜(Cucumis sativus Linn.)等种类的LINE逆转座子RT氨基酸序列有较高同源性。研究结果表明:瓠瓜LINE逆转座子是一类较古老元件,LINE逆转座子可在瓠瓜与其他种类的基因组间横向传递。 展开更多
关键词 瓠瓜 line逆转座子 RT序列 序列分析 相似性 系统进化
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LINE-1 ORF-1p过表达对肝癌细胞株SMMC7721增殖和锚定非依赖性生长的影响 被引量:5
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作者 高旭东 陆荫英 +4 位作者 冯帆 王春平 王鈜 常秀娟 杨永平 《实用肝脏病杂志》 CAS 2011年第5期323-326,共4页
目的研究逆转座子L1编码蛋白ORF-1p的表达对肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖的影响。方法利用带Flag标签的L1 ORF1表达载体,转染SMMC7721细胞;采用Western blot法检测反转座子L1 ORF1编码蛋白ORF-1p的表达;采用软琼脂成集落实验和相关报告... 目的研究逆转座子L1编码蛋白ORF-1p的表达对肝癌细胞株SMMC7721细胞增殖的影响。方法利用带Flag标签的L1 ORF1表达载体,转染SMMC7721细胞;采用Western blot法检测反转座子L1 ORF1编码蛋白ORF-1p的表达;采用软琼脂成集落实验和相关报告基因检测ORF-1p表达对肝癌细胞p53、p15和p21活性的影响。结果在SMMC7721细胞中,Flag-ORF-1p表达能够显著促进该细胞的增殖(P<0.05),增强该细胞的锚定非依赖性生长(P<0.05),降低p53、p15和p21报告基因的活性。结论 L1基因编码蛋白ORF-1p能够促进肝癌细胞的生长、浸润以及肿瘤的形成。 展开更多
关键词 肝癌细胞株SMMC7721 逆转座子L1 开放读码框-1p 蛋白质转移吸印技术
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植物基因组中的非LTR反转录转座子SINEs和LINEs 被引量:7
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作者 程旭东 凌宏清 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期731-736,共6页
反转录转座子是基因组进化的推动者之一,分为LTR和非LTR两种类型。前者是真核基因组的主要组分,结构和转座方式与逆转录病毒类似。后者是最初发现于动物基因组新近发现在植物基因组中也广泛存在的新型重复序列,包括LINEs(long intersper... 反转录转座子是基因组进化的推动者之一,分为LTR和非LTR两种类型。前者是真核基因组的主要组分,结构和转座方式与逆转录病毒类似。后者是最初发现于动物基因组新近发现在植物基因组中也广泛存在的新型重复序列,包括LINEs(long interspersed nuclear elements)和SINEs(short interspersed nuclear elements)两个亚型。它们大多因自身或受宿主基因组的调控而失去转座活性。其转座机理目前还不十分清楚,推测LINEs可以自主转座,SINEs依赖其他转座子被动转座。种系分析认为LINEs可能是最古老的反转录转座子,SINEs的起源未知。文章对以上内容进行了归纳和讨论。 展开更多
关键词 非LTR反转录转座子 lineS SINES 逆转录酶
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逆转座子LINE-1在基因组中的调控作用 被引量:1
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作者 朱运峰 李冠琳 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期13-23,共11页
近年来研究发现真核生物基因组中的许多重复序列以及基因的内含子参与基因表达的调控。在这些重复序列中,有一种广泛分布于基因组中的逆转座子LINE-1,目前发现其对细胞的增殖与分化以及肿瘤的发生起着非常重要的作用,具体表现为影响基... 近年来研究发现真核生物基因组中的许多重复序列以及基因的内含子参与基因表达的调控。在这些重复序列中,有一种广泛分布于基因组中的逆转座子LINE-1,目前发现其对细胞的增殖与分化以及肿瘤的发生起着非常重要的作用,具体表现为影响基因的转录及整个基因组的稳定性、参与X染色体失活及基因组进化等。在正常细胞的分化调控中,基因的激活与沉默具有时间与空间的特异性,实现其"预定"的、有序的、不可逆转的分化过程。主要阐述了逆转座子LINE-1的结构特征和其在基因组中的调控作用及这些作用影响基因表达从而调节生物体的生命活动。研究LINE-1的调控机制对认识细胞的时空调控以及癌症的发生与发展具有重要的价值。 展开更多
关键词 基因表达调控 line-1逆转座子 细胞增殖分化 癌症
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逆转座子LINE-1在脑胶质瘤中异常活化的临床意义 被引量:1
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作者 王春辉 孟繁凯 +2 位作者 费邵阳 陈莫 郑林杰 《中国实验诊断学》 2020年第8期1308-1310,共3页
目的检测逆转座子LINE-1在脑胶质瘤中的表达水平,探讨其异常激活与肿瘤病理特征和患者生存预后的关联;方法收集30例脑胶质瘤组织,利用qPCR检测逆转座子LINE-1ORF1的表达水平,并分析LINE-1表达水平与肿瘤病理分类的关系,利用Kaplan-Meire... 目的检测逆转座子LINE-1在脑胶质瘤中的表达水平,探讨其异常激活与肿瘤病理特征和患者生存预后的关联;方法收集30例脑胶质瘤组织,利用qPCR检测逆转座子LINE-1ORF1的表达水平,并分析LINE-1表达水平与肿瘤病理分类的关系,利用Kaplan-Meirer生存曲线分析LINE-1异常活化与患者生存预后的关系;结果与癌旁组织相比,脑胶质瘤组织中LINE-1的表达水平显著升高,同时在WHO分级Ⅲ-Ⅳ级肿瘤组织LINE-1的表达量明显高于Ⅰ-Ⅱ级,Ki-67高表达的脑胶质瘤组织LINE-1也有着更高的表达(P<0.05),与LINE-1低表达的脑胶质瘤患者相比,LINE-1高表达的脑胶质瘤患者生存期显著缩短。结论逆转座子LINE-1在脑胶质瘤中存在异常活化,有潜力成为不良预后的分子标志物。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 逆转座line-1 临床病理特征 预后
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逆转录转座子LINE-1的活性调控及其在癌症中的作用 被引量:1
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作者 朱绮霞 李一向 +2 位作者 成春燕 胡文进 周礼芹 《广西科学》 CAS 2018年第3期268-273,共6页
逆转座子长散布核元件-1(LINE-1)是一种跳跃基因,约占人类基因组的17%。LINE-1采用"复制-粘贴"的方式,以RNA为媒介,在基因组中进行转座易位。一般地,细胞中LINE-1的转座活性受到严格调控。而在肿瘤细胞中,LINE-1异常活化,以... 逆转座子长散布核元件-1(LINE-1)是一种跳跃基因,约占人类基因组的17%。LINE-1采用"复制-粘贴"的方式,以RNA为媒介,在基因组中进行转座易位。一般地,细胞中LINE-1的转座活性受到严格调控。而在肿瘤细胞中,LINE-1异常活化,以逆转座依赖或非依赖的方式,影响基因组的稳定性:前者可以改变靶基因表达、引起染色质重排或协助其他转座子(如SINEs等)进行转座;后者为表观遗传的方式,通过产生内源的调节性RNAs、形成LINE-1嵌合性转录、形成新的剪切位点或启动位点来改变临近基因的表达等。本文主要介绍LINE-1的组成及其转座活性调控,并讨论LINE-1转座在肿瘤中的功能,以期为LINE-1的深入研究、肿瘤的形成机制及治疗探索提供一些参考。 展开更多
关键词 逆转座子 line-1 癌症
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家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫LINE类反转录转座子R4的鉴定及系统进化分析 被引量:2
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作者 刘兰兰 吴春漫 +2 位作者 张小燕 许金山 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期681-687,共7页
反转录转座子在物种基因组的进化中发挥重要作用,LINE元件属于non-LTR反转录转座子的类型之一。通过生物信息学分析方法,鉴定了一个全长3 855 bp的柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)LINE元件R4Na和一个全长3 970 bp的家蚕微孢子虫(Nosema bom... 反转录转座子在物种基因组的进化中发挥重要作用,LINE元件属于non-LTR反转录转座子的类型之一。通过生物信息学分析方法,鉴定了一个全长3 855 bp的柞蚕微孢子虫(Nosema pernyi)LINE元件R4Na和一个全长3 970 bp的家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)LINE元件R4Nb。R4Na在柞蚕微孢子虫基因组中有4个呈串联排列的完整拷贝,其余拷贝序列结构和R4Nb的拷贝序列结构有很大差异,显示二者的变异程度很大,暗示2种微孢子虫比较古老。利用转录组高通量测序库比对,R4Nb反转录酶编码区插入的外源序列具有转录活性,暗示这段外源序列可能被招募为外显子。依据LINE元件的反转录酶结构域序列构建2种微孢子虫以及东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)、西方蜜蜂微孢子虫(Nosema apis)、按蚊微孢子虫(Anncaliia algerae)的系统进化树,结果显示R4Na和R4Nb与其它昆虫微孢子虫的R4元件具有一定相似性,而且R4元件家族在昆虫微孢子虫基因组分化过程中形成明显的3个进化群。研究结果证明家蚕微孢子虫和柞蚕微孢子虫的基因组中均存在LINE类反转录转座子,为研究2种微孢子虫的基因组结构提供了新的线索。 展开更多
关键词 家蚕微孢子虫 柞蚕微孢子虫 基因组 line类反转录转座子 系统进化
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逆转录转座子LINE-1与肿瘤的发生和发展 被引量:10
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作者 刘茜 王瑾晖 +1 位作者 李晓宇 岑山 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期93-102,共10页
LINE-1是现今人体内存在的唯一具有自主转座活性的转座子,约有500 000个拷贝,占人类基因组总量的17%。LINE-1是通过转录和逆转录在内的转座过程产生新的DNA拷贝,并使新产生的DNA拷贝插入基因组的不同位置。LINE-1转座会影响基因组中其... LINE-1是现今人体内存在的唯一具有自主转座活性的转座子,约有500 000个拷贝,占人类基因组总量的17%。LINE-1是通过转录和逆转录在内的转座过程产生新的DNA拷贝,并使新产生的DNA拷贝插入基因组的不同位置。LINE-1转座会影响基因组中其他基因的表达或调控,因而会对基因组的稳定性产生影响,从而导致基因疾病或肿瘤的发生。本文总结了近年来国际上对LINE-1转座与肿瘤的发生和发展之间关系的研究进展,为肿瘤的治疗和机制研究提供一些线索。 展开更多
关键词 转座 逆转录转座子 基因组 line-1 肿瘤 基因稳定性 逆转录酶
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SLFN14抗LINE-1分子机制研究 被引量:1
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作者 毛洋 丁寄葳 +2 位作者 陈淑敏 岑山 李晓宇 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期669-679,共11页
长散在核重复序列1 (long interspersed nuclear element-1, LINE-1)是迄今为止发现的人体基因组中唯一具有自主转座活性的逆转录转座子,其转座常引起宿主基因组不稳定,从而导致包括癌症在内的各种严重基因疾病的发生。宿主因子在宿主抗... 长散在核重复序列1 (long interspersed nuclear element-1, LINE-1)是迄今为止发现的人体基因组中唯一具有自主转座活性的逆转录转座子,其转座常引起宿主基因组不稳定,从而导致包括癌症在内的各种严重基因疾病的发生。宿主因子在宿主抗LINE-1转座中发挥着重要作用。宿主因子SLFN14作为免疫系统重要组成员,具有抗病毒活性。本实验室研究发现SLFN14对于LINE-1的转座具有抑制作用。为进一步探究其具体的作用机制,通过对LINE-1复制周期中的转录、翻译、逆转录、整合环节进行实验分析,证实SLFN14能够通过影响LINE-1 mRNA转录过程及其半衰期,降低LINE-1 mRNA的水平,从而影响LINE-1蛋白及cDNA表达水平,最终导致LINE-1复制受阻。同时,通过对SLFN14活性中心的定位,本研究还发现SLFN14的抗LINE-1活性与其核糖核酸内切酶结构域和核糖体结合结构域密切相关。上述研究结果展示了SLFN14调控LINE-1复制的机制,进一步完善了宿主因子调控网络,为控制因LINE-1复制引起的基因组不稳定提供了新思路。 展开更多
关键词 转座 逆转录转座子 line-1 SLFN14 5’-UTR内部启动子区
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神经系统中LINE-1转座的研究进展 被引量:1
12
作者 毛洋 李晓宇 《中国医药导报》 CAS 2019年第5期27-29,46,共4页
长散在核重复序列1(LINE-1)属于逆转录转座子,至今仍在人类基因组中保留自主转座的活性,并在基因组中占有很高的比例,其频繁转座会引起基因组不稳定,导致严重的后果。通常宿主细胞运用多种机制对其转座进行严格控制,所以LINE-1在大多数... 长散在核重复序列1(LINE-1)属于逆转录转座子,至今仍在人类基因组中保留自主转座的活性,并在基因组中占有很高的比例,其频繁转座会引起基因组不稳定,导致严重的后果。通常宿主细胞运用多种机制对其转座进行严格控制,所以LINE-1在大多数体细胞中是无活性的,然而近年来有研究证实在神经元细胞中LINE-1可以表达并转座,插入基因组的不同位置,导致每个神经元细胞在基因水平上都是独特的。此外,LINE-1的转座可能在长期记忆等方面具有一定生理学意义,也有可能产生一些病理影响。希望本文能对全面了解LINE-1在神经系统中的情况提供一些线索。 展开更多
关键词 line-1 大脑 神经系统 逆转录转座
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Identification and Characterization of Reverse Transcriptase Fragments of Long Interspersed Nuclear Elements (LINEs) in the <i>Morus notabilis</i>Genome 被引量:1
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作者 Bi Ma Youchao Xin +2 位作者 Lulu Kuang Fei Hou Ningjia He 《American Journal of Molecular Biology》 2017年第3期138-152,共15页
Reverse transcriptase (rt) fragments from LINE retrotransposons in the mulberry genome were analyzed in terms of heterogeneity, phylogeny, and chromosomal distribution. We amplified and characterized conserved domains... Reverse transcriptase (rt) fragments from LINE retrotransposons in the mulberry genome were analyzed in terms of heterogeneity, phylogeny, and chromosomal distribution. We amplified and characterized conserved domains of the rt using degenerate primer pairs. Sequence analyses indicated that the rt fragments were highly heterogeneous and rich in A/T bases. The sequence identity ranged from 31.8% to 99.4%. Based on sequence similarities, the rt fragments were categorized into eight groups. Furthermore, similar stop codon distribution patterns among a series of clones in the same group indicated that they underwent a similar evolutionary process. Interestingly, phylogenetic analyses of the rt fragments isolated from mulberry and 13 other plant species revealed that two distantly related taxa (mulberry and Paeonia suffruticosa) grouped together. It does not appear that this phenomenon resulted from horizontal transposable element transfer. Fluorescence in situ hybridization analysis revealed that most of the rt fragments were concentrated in the subtelomeric and pericentromeric regions of the mulberry chromosomes, but that these elements were not abundant in the mulberry genome. Future studies will focus on the potential roles of these elements in the subtelomeric and pericentromeric regions of the mulberry genome. 展开更多
关键词 iMorus notabilis line retrotransposonS Reverse Transcriptase CHARACTERIZATION Fluorescence in site Hybridization
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利用RAPD技术筛选家蚕抗核型多角体病分子标记 被引量:19
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作者 刘晓勇 姚勤 陈克平 《江苏大学学报(自然科学版)》 EI CAS 2004年第1期17-20,共4页
在含有抗核型多角体病毒(NPV)病主效基因的家蚕品种NB和高敏感品种306及其近等基因系BC9中,采用500个RAPD随机引物分别在各个品系的DNA混合物中进行扩增以筛选分子标记,获得与家蚕抗NPV病有关的3个分子标记:OPF 072023、OPJ 131300、OPM... 在含有抗核型多角体病毒(NPV)病主效基因的家蚕品种NB和高敏感品种306及其近等基因系BC9中,采用500个RAPD随机引物分别在各个品系的DNA混合物中进行扩增以筛选分子标记,获得与家蚕抗NPV病有关的3个分子标记:OPF 072023、OPJ 131300、OPM 161200 其中OPF 072023标记通过各回交代检测,证明获得的标记真实、可靠 又对该分子标记的片段进行克隆、测序 通过该片段的生物信息学分析。 展开更多
关键词 家蚕 近等基因系 核型多角体 分子标记 逆转位子
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<i>At</i>L1 a Non-LTR Retrotrasposon Fragment in the Genome of <i>Arabidopsis thaliana </i>with Homology to Plants and Animals
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作者 Giovanna Visioli Elena Maestri +2 位作者 Eugenia Polverini Angelo Pavesi Nelson Marmiroli 《American Journal of Plant Sciences》 2013年第4期806-816,共11页
We report the isolation of AtL1, a 249 bp non-LTR retrotransposon fragment from Arabidopsis thaliana by fingerprinting mRNAs extracted from A. thaliana plants, ecotype Columbia, in different heat stress conditions. So... We report the isolation of AtL1, a 249 bp non-LTR retrotransposon fragment from Arabidopsis thaliana by fingerprinting mRNAs extracted from A. thaliana plants, ecotype Columbia, in different heat stress conditions. Southern blot and PCR analysis suggested that AtL1 occurs as a single- or low-copy insert in the genome of A. thaliana ecotype Columbia. The presence of AtL1 in the genome of different Arabidopsis ecotypes was confirmed by PCR amplification and sequencing thus excluding all possible contamination. A preliminary scan of the AtL1 nucleotide sequence against the EMBL and NCBI databases revealed a high degree of similarity to a group of LINE type L1 retrotransposons of mammals and with a cDNA sequence of Artemisia annua. A phylogenetic analysis of LINE elements from animals and plants placed AtL1 and A. annua sequences in close proximity to some mammalian sequences but distant from the other plants LINE elements including those from Arabidopsis. 展开更多
关键词 Arabidopsis Heat Shock Plant retrotransposonS line retrotransposonS Horizontal TRANSPOSON Transfer (HTT)
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节瓜抗感镰刀菌酸突变体LINE逆转座子RT序列特征分析 被引量:3
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作者 赵芹 谢大森 +4 位作者 何晓明 江彪 罗少波 彭庆务 陈俊秋 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1986-1994,共9页
根据LINE逆转座子逆转录酶(RT)保守序列设计简并引物,PCR扩增节瓜g DNA,获得580 bp左右目的片段;PCR产物克隆测序后经相关生物信息学软件分析,获得41条来自感枯萎病材料及其抗性突变体的RT序列。感、抗材料的序列长度变化范围分别为548~... 根据LINE逆转座子逆转录酶(RT)保守序列设计简并引物,PCR扩增节瓜g DNA,获得580 bp左右目的片段;PCR产物克隆测序后经相关生物信息学软件分析,获得41条来自感枯萎病材料及其抗性突变体的RT序列。感、抗材料的序列长度变化范围分别为548~590 bp与573~590 bp,存在明显缺失突变,核苷酸序列相似性分别为73.6%~98.9%与46.1%~99.3%;核苷酸序列聚类分析分为5个家族,家族I包含29个序列,为节瓜LINE逆转座子主要家族成员。对推导氨基酸序列分析发现,感、抗材料分别包含25个与4个保守氨基酸,抗性突变体半保守氨基酸数目略少,氨基酸序列相似性分别为53.5%~100%与10.3%~100%;与抗性突变体相比,感病材料终止密码子突变发生率较高(23条,100%),移码突变生率略低(11条,47.82%);仅发现1条抗性突变体序列具转录活性。两种材料均存在较高缺失突变、终止密码子突变与移码突变发生率,表现高度异质性。将节瓜RT序列与已知物种相应序列构建系统发育进化树,表明节瓜LINE逆转座子RT序列较保守,与拟南芥、葡萄、李等亲缘关系较近。 展开更多
关键词 节瓜 抗感镰刀菌酸突变体 line逆转座子 逆转录酶 比较分析
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东乡野生稻基因渐渗系中逆转座子逆转录酶序列的克隆及表达分析 被引量:6
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作者 陈雅玲 罗向东 +3 位作者 张帆涛 戴亮芳 胡标林 谢建坤 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期138-144,共7页
以东乡野生稻(Oryza rufipogon)耐冷渐渗系IL5335、IL5243及其双亲为试材,克隆到75条存在高度异质性的Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列,经聚类分析将这些逆转录酶序列分为7个家族;家族6和7含有65条逆转录酶序列,序列间的相似性为44.9%... 以东乡野生稻(Oryza rufipogon)耐冷渐渗系IL5335、IL5243及其双亲为试材,克隆到75条存在高度异质性的Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列,经聚类分析将这些逆转录酶序列分为7个家族;家族6和7含有65条逆转录酶序列,序列间的相似性为44.9%–99.3%;家族1–5仅含10条逆转录酶序列,其中8条来源于耐冷渐渗系,它们与亲本的序列相似性为29.2%–52.8%,分析发现这些序列曾发生缺失或插入突变。实时荧光定量PCR检测结果显示,IL5335和IL5243中的houba、osr15及osr17逆转录酶的表达量均远高于受体亲本(表达量增加1.50–5.07倍),表明渐渗杂交诱发改变了IL5335和IL5243中逆转录酶序列的结构及其表达活性。该结果为今后水稻表观遗传学研究及外源优异基因利用奠定了基础。 展开更多
关键词 东乡野生稻 表达活性 渐渗系 逆转座子
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人类反转座核元件甲基化研究进展 被引量:1
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作者 徐洁 付光平 +1 位作者 杜情情 李淑瑾 《中国法医学杂志》 CSCD 2014年第5期447-450,共4页
人类反转座核元件LINE-1序列和Alu序列甲基化水平的变化与多种疾病的发生、发展有密切的联系,因此是相关疾病,尤其肿瘤和癌症预测、诊断、治疗及预后的新标记。近年来,二者在法医学方面的研究也逐渐展开,主要集中在同卵双生子的鉴别、... 人类反转座核元件LINE-1序列和Alu序列甲基化水平的变化与多种疾病的发生、发展有密切的联系,因此是相关疾病,尤其肿瘤和癌症预测、诊断、治疗及预后的新标记。近年来,二者在法医学方面的研究也逐渐展开,主要集中在同卵双生子的鉴别、年龄的鉴定、组织的鉴定等方面,有望成为法医DNA分析领域新一代的遗传标记。本文综述LINE-1序列和Alu序列甲基化在医学、法医学等领域的研究进展,希望能为相关研究和应用提供参考。 展开更多
关键词 法医物证学 人类反转座核元件 甲基化 line-1 ALU
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