转染OPN-002-siRNA对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和OPN、TGF-β1、PCNA表达的影响

目的观察经动脉外膜转染OPN-002-siRNA对大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生和骨桥蛋白(OPN)、转化生长因子β1(TGF-β1)及增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响。方法通过前期细胞实验筛选出最敏感的OPN-002-siRNA序列作为动物实验转染基因。72只Wistar大鼠,随机分为假手术组、球囊损伤组、OPN-SCR-siRNA转染组和OPN-002-siRNA转染组。用免疫荧光、HE染色、real-time RT-PCR和Western blot观察大鼠颈动脉球囊损伤后内膜增生情况和OPN、TGF-β1及PCNA的表达变化,以及OPN-002-siRNA对它们的影响。结果 (1)球囊损伤术后3天未见明显的新生内膜,7天内膜开始增厚,14天时内膜增厚显著。(2)OPN、TGF-β1 mRNA和蛋白水平于术后3、7、14天时持续升高,而PCNA mRNA和蛋白水平均于术后3天开始升高,7天达高峰,14天时下降。(3)与球囊损伤组、OPN-SCR-siRNA转染组比较,OPN-002-siRNA转染组在各个时间点新生内膜厚度明显减轻(P<0.001),OPN、TGF-β1、PCNA mRNA和蛋白表达显著减少(P<0.001)。结论 OPN-002-siRNA可能通过特异性抑制OPN、TGF-β1、PCNA的表达,从而减轻血管损伤后的内膜增生。

水飞蓟宾糖基化衍生物对肝癌细胞凋亡和周期的影响

目的探讨水飞蓟宾糖基化衍生物对肝癌细胞凋亡和细胞周期的影响。方法将肝癌细胞LIXC-002随机分为空白对照组(Control)、水飞蓟宾糖基化衍生物治疗组(SLB-X2,3、10、30μmol/L)和水飞蓟宾对照组(SLB,30μmol/L),化合物孵育LIXC-002细胞24 h,分别采用流式细胞术和Annexin VFITC/PI法对LIXC-002细胞周期变化及细胞凋亡情况进行检测。结果与SLB组比较,SLB-X2组能够明显提高LIXC-002细胞凋亡率(均P<0.05),而且呈剂量依赖性,在相同浓度下(30μmol/L),SLB-X2的细胞凋亡率是SLB组的2倍。SLB-X2能够将LIXC-002细胞阻滞在G2/M期,且作用强于SLB。结论SLB-X2能够通过促进肝癌细胞凋亡,使肝癌细胞周期阻滞在G2/M期,发挥抗肝癌作用。

雄激素受体N末端结构域抑制剂的设计、合成与活性评价

目的以EPI-002为先导化合物,设计合成其衍生物并进行活性评价。方法以双酚A为起始原料,通过取代、Lewis酸催化开环等反应合成EPI-002衍生物,并进行前列腺癌细胞增殖抑制活性以及免疫印迹测试。结果合成共计5个EPI-002衍生物a~e,部分化合物对前列腺癌细胞增殖抑制活性优于EPI-002与恩杂鲁胺。同时,免疫印迹实验显示出化合物b与c能够下调AR-FL、AR-V7以及下游蛋白FKBP51与TMPRSS2。