芪玉三龙方干扰miRNA21/PTEN/PI3K信号轴抑制LLC肺癌细胞增殖

目的:探讨芪玉三龙方抑制LLC肺癌细胞增殖的分子机制。方法:LLC肺癌细胞常规传代培养,分别设置为LLC组、空白血清组、siRNA组、含药血清组。MTT法筛选芪玉三龙方最佳作用浓度和作用时间。RT-qPCR、Western Blot及免疫荧光法检测miRNA21/PTEN/PI3K信号轴相关分子表达。结果:芪玉三龙方含药血清呈浓度依赖性抑制LLC肺癌细胞活性。与LLC组比较,siRNA组和含药血清组miRNA21 mRNA表达显著降低(P<0.01),PTEN蛋白和mRNA表达显著上升(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、eIF4E、p70S6K蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),含药血清组PI3K蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:芪玉三龙方可抑制miRNA21的转录,使PTEN表达有所上升,下调PI3K/AKT/mTOR信号轴关键分子表达,从而温和抑制LLC肺癌细胞增殖。

CIK细胞对LLC小鼠肺癌细胞株诱导凋亡的影响

目的探讨干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-2及CD3抗体诱导细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对LLC小鼠肺癌细胞株存活率和凋亡相关因子14-3-3ζ及p-Bad蛋白表达的影响。方法常规CIK细胞的体外培养方法培养CIK细胞为效应细胞,LLC小鼠肺癌细胞株为靶细胞,通过复合培养体系(Transwell培养板)将CIK细胞与LLC小鼠肺癌细胞株建立共培养体系。根据培养时间不同分3组(10、15、20 d)运用四甲基唑蓝(MTT)比色法检测LLC小鼠肺癌细胞的存活率。Western印迹检测CIK细胞14-3-3ζ、p-Bad蛋白表达变化。结果光镜下观察发现,成功地诱导出CIK细胞。培养20 d时LLC肺癌细胞的存活率明显低于10 d组和15 d组(P<0.01)。Western印迹检测LLC小鼠肺癌细胞中14-3-3ζ、p-Bad的表达均有下调。结论随着培养时间的延长CIK细胞对LLC小鼠肺癌细胞的存活率逐渐降低并能促进LLC小鼠肺癌细胞的凋亡。

藏药巴夏嘎中鸭嘴花碱的体外抗肿瘤活性研究

目的研究从藏药巴夏嘎中提取、分离得到的有效成分鸭嘴花碱对肿瘤细胞的增殖抑制作用,对比其对不同肿瘤细胞活性的大小。方法根据MTT法,将提取、分离得到的鸭嘴花碱分别对人肺癌细胞株A549、人卵巢癌细胞株A2780、人肝癌细胞株HepG2和Lewis肺癌细胞株LLC进行细胞增殖抑制作用实验。结果鸭嘴花碱对A2780、HepG2和LLC细胞株的IC50分别为71.73、22.21、7.31μg.mL-1,而对A549细胞株IC50>100μg.mL-1。结论鸭嘴花碱对LLC细胞具有明显的细胞增殖抑制作用。