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CD30^+间变性大细胞淋巴瘤细胞系的建立及其生物学特性
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作者 姜华 侯健 +2 位作者 傅卫军 丁思奇 张波 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期490-494,共5页
由 1例非霍奇金淋巴瘤患者的胸水标本通过液体培养法建立了 1株CD3 0 + 间变性大细胞淋巴瘤细胞系 ,并对其生物学特性进行研究。所建立的细胞系可以在含 10 %小牛血清的RPMI 1640培养液中持久增殖 ,倍增时间约为 3 6小时 ,目前已传代 1... 由 1例非霍奇金淋巴瘤患者的胸水标本通过液体培养法建立了 1株CD3 0 + 间变性大细胞淋巴瘤细胞系 ,并对其生物学特性进行研究。所建立的细胞系可以在含 10 %小牛血清的RPMI 1640培养液中持久增殖 ,倍增时间约为 3 6小时 ,目前已传代 12 0余次 ,生长良好 ,暂命名为SH 1。光镜下细胞形态与典型的CD3 0 + 间变性大细胞淋巴瘤 (anaplasticlargecelllymphoma ,ALCL)细胞的形态十分类似 ,电镜下可观察到胞浆内存在较多病毒颗粒。细胞组织化学染色 :光镜下过氧化物酶POX阴性 ,糖原染色PAS阳性 ,酸性磷酸酶 (ACP)呈强阳性 ;电镜下髓过氧化物酶 (MPO )阴性 ,血小板过氧化物酶 (PPO)阴性。EB病毒核心抗原 1(EBNA 1)呈阳性。细胞免疫表型为CD3 0 + 、CD45+ 、HLA DR+ ,而EMA、CD3 4、CD3 8、CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、CD10、CD15、CD19、CD2 0均呈阴性。染色体分析示SH 1细胞系核型为二倍体或四倍体核型 ,并具有明显的结构和数量异常 ,但未见典型t(2 ;5)。结论 :所建立的细胞系为CD3 0 + ALCL细胞系。 展开更多
关键词 CD30^+细胞 CD30^+间变性大细胞 淋巴瘤细胞系 非霍奇金淋巴瘤
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Sirt1基因稳定低表达的LMH细胞系构建
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作者 郁建锋 胡悦 +4 位作者 付修虎 王中亮 徐璐 龚道清 顾志良 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2019年第2期76-82,共7页
为构建Sirtl基因低表达的LMH细胞系,根据鸡Sirtl基因的3′UTR序列设计gSmiR30、gSmiR70和gSmiR913个miRNAs,以质粒pLNCX-gSmiRn(n为30,70或91)分别过表达这3个miRNAs48h后,依次检测其对CHO-K1细胞中报告载体psiCHECH2-gSirtl-UTR672所... 为构建Sirtl基因低表达的LMH细胞系,根据鸡Sirtl基因的3′UTR序列设计gSmiR30、gSmiR70和gSmiR913个miRNAs,以质粒pLNCX-gSmiRn(n为30,70或91)分别过表达这3个miRNAs48h后,依次检测其对CHO-K1细胞中报告载体psiCHECH2-gSirtl-UTR672所表达的荧光素酶活性的影响以及对LMH细胞中Sirtl基因表达的干扰情况;然后选用干扰效果较好的pLNCX-gSmiR30包装的反转录病毒感染LMH细胞,以终浓度1μg·mL^-1的G418筛选稳定过表达gSmiR30的LMH-gSmiR30细胞系,荧光定量PCR和Westernblot检测Sirtl基因的表达。结果表明:人工设计的3个miRNAs可抑制含靶位点的海肾荧光素酶活性在97%以上;且LMH细胞中Sirtl的mRNA表达水平均能被这3个miRNAs下调40%以上;筛选得到的LMH-gSmiR30细胞中绿色荧光蛋白的表达率在99%以上,细胞内Sirt1基因的mRNA水平下降75%,SIRT1蛋白也明显减少。这一研究成功获得了Sirt1基因低表达的LMH-gSmiR30细胞系,为进一步研究Sirt1基因在鸡肝脏中的功能提供了一种很好的细胞模型。 展开更多
关键词 Sirt1基因 肝脏 反转录病毒 lmh-gsmir30细胞系
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耐紫杉醇卵巢癌细胞亚系SKOV3-TR30的建立及特征 被引量:1
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作者 傅云峰 叶大风 +3 位作者 陈怀增 吕卫国 程琪 谢幸 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2005年第6期448-450,共3页
目的:建立可靠的耐紫杉醇细胞模型。方法:采用中等剂量间歇作用法结合低剂量持续诱导法及克隆稀释技术,从人卵巢癌细胞系SKOV3建立对紫杉醇耐药的亚系SKOV3-TR30;MTT法测定药物的细胞毒作用;HE染色和透射电镜观察细胞形态的特征:流式细... 目的:建立可靠的耐紫杉醇细胞模型。方法:采用中等剂量间歇作用法结合低剂量持续诱导法及克隆稀释技术,从人卵巢癌细胞系SKOV3建立对紫杉醇耐药的亚系SKOV3-TR30;MTT法测定药物的细胞毒作用;HE染色和透射电镜观察细胞形态的特征:流式细胞术检测两种细胞的细胞周期分布。结果:SKOV3-TR30的耐药指数达27.5,对多西紫杉醇、和美新、阿霉素、诺考达唑有不同程度的交叉耐药性,对铂尔定无交叉耐药性。与SKOV3相比,SKOV3-TR30的倍增时间延长,G0/G1期细胞比率下降,体积较大,多核更明显,胞浆中细胞器也更丰富。结论:成功建立了耐紫杉醇的卵巢癌细胞亚系SK-OV3-TR30,为深入研究肿瘤对紫杉醇耐药的机制、寻找逆转耐药的措施提供了可靠的体外实验模型。 展开更多
关键词 紫杉醇 抗药性 多药 卵巢肿瘤 细胞系 SKOV3-TR30
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移植前AS30D肝癌细胞状态决定其移植后在大白鼠体内的生长周期 被引量:1
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作者 维帕威.维萨瓦托尔 贾萨达.萨卡尔库 +4 位作者 卡莫尔波恩.朗格洛杰金达 堪察那.肯库 拉皮班.因班凯乌 万塔尼.拉塔纳萨克 达朗尼.布里帕克蒂.劳森 《实验动物科学》 2003年第z1期34-,共1页
Objective\ Pre transplant status of AS 30D hepatoma cell line was evaluated in Sprague Dawley rats. Cells from different sources, a) in vivo, from the other transplanted Sprague Dawley rats, b) in vitro, from cultured... Objective\ Pre transplant status of AS 30D hepatoma cell line was evaluated in Sprague Dawley rats. Cells from different sources, a) in vivo, from the other transplanted Sprague Dawley rats, b) in vitro, from cultured cell, and c) cryopreservation, from the liquid nitrogen storage tank, were transplanted into 5 week old female Sprague Dawley rats (respectively n=5, 3, and 5). Each animal received intraperitoneal injection of 0 5 ml cell suspension containing 1 5×10 6 cells. The results showed no significant difference among groups, in the quality parameters of cell transplantation, such as fluid volume, cell concentration, total cell, cell viability, and the daily consumption of food and water. However, the cell growth duration following the transplantation was lengthened at least one half fold or 5 days, when other sources of cells than the in vivo, were transplanted into rat abdominal cavity. Thus, the variety of pre transplant status of the AS 30D cells would enhance flexibility in cell preparations for the successful transplantation in different time frame. 展开更多
关键词 AS-30D 肝癌 细胞系 移植 Sprague Dawley 大白鼠
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微小RNA-30b对直肠癌细胞系松软蛋白4及程度细胞凋亡基因4表达的影响 被引量:3
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作者 徐芳 殷宏 +3 位作者 秦岩 吴凡 王娅南 张娟 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期1736-1739,共4页
目的探讨微小RNA-30b对结肠癌细胞株松软蛋白4(Sox4)及程度细胞凋亡基因4(Pdcd4)表达的影响。方法用10%新生牛血清培养结肠癌HCT116和SW480细胞株,各分为干预组与模型组。p LVTHM/miR-30b慢病毒载体转染,细胞培养基培养6 h。用免疫印迹... 目的探讨微小RNA-30b对结肠癌细胞株松软蛋白4(Sox4)及程度细胞凋亡基因4(Pdcd4)表达的影响。方法用10%新生牛血清培养结肠癌HCT116和SW480细胞株,各分为干预组与模型组。p LVTHM/miR-30b慢病毒载体转染,细胞培养基培养6 h。用免疫印迹法与荧光定量PCR法对Sox4及Pdcd4表达进行测定。结果与模型组比较,干预组Sox4整合光密度值明显降低,干预组Pdcd4整合光密度值明显增高(P<0.01);与模型组比较,干预组Sox4蛋白表达较低,干预组Pdcd4表达增高(P<0.01)。结论 MicroRNA-30b能够显著降低直肠癌细胞系Sox4蛋白的表达。 展开更多
关键词 直肠癌细胞系 松软蛋白4 程度细胞凋亡基因4 靶向治疗 微小基因30b
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miRNA-30在肿瘤细胞中的作用 被引量:2
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作者 张骞 王锡山 《中华结直肠疾病电子杂志》 2013年第4期180-183,共4页
microRNA( miRNAs)是一种长度约为22核苷酸的非编码的单链小RNA,由内源基因编码,主要功能是负性调节靶基因的表达。从1993年Lee和Ambros[1]在C.elegans中发现lin-4以来,至今发现的miRNAs已经超过1000种。成熟的miRNAs分子的形... microRNA( miRNAs)是一种长度约为22核苷酸的非编码的单链小RNA,由内源基因编码,主要功能是负性调节靶基因的表达。从1993年Lee和Ambros[1]在C.elegans中发现lin-4以来,至今发现的miRNAs已经超过1000种。成熟的miRNAs分子的形成过程包含若干个步骤:miRNAs基因通过RNA 聚合酶Ⅱ转录合成原始 microRNA ( pri-microRNA),pri-microRNA具有5’端的帽子、3’端的polyA尾的结构;pri-microRNA 经过两次酶的剪切产生成熟的miRNAs。动物 pri-microRNA第一次剪切在细胞核内,经Dorsha酶剪切产生大小约70个核苷酸并形成茎环结构的microRNA前体( pre-microRNA);pre-microRNA通过Ran-GTP依赖性核浆转运子Exportin5从核内转移至细胞质中。在细胞质中,Dicer酶将pre-microRNA剪切形成一个不完全配对的双链RNA片段即microRNA和microRNA*双体,其中一条形成成熟的21~23个核苷酸长度的microRNA分子,另一条则可能迅速降解。成熟的microRNA形成RNA诱导复合体(RNA-induced silencing complex,RISC),从而引起靶基因mRNA降解或翻译抑制。 miRNA与靶基因的mRNA 3’端非翻译区(3’-UTR)完全或部分结合,使得mRNA降解或抑制翻译产物的生成,从而参与调控个体发育、细胞凋亡、增殖及分化。目前报道的miRNAs 靶基因大约有5300个。一个miRNA可以与多个mRNA结合,而一个mRNA可以同时被多个miRNAs 调节,据统计约30%的基因受到 miRNA 的调节。 展开更多
关键词 microRNA MIRNAS 肿瘤干细胞 POLYA miRNA-30 细胞衰老 乳腺癌细胞系 萤光素酶 细胞周期 CASPASE
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TIP30基因在肝癌组织中的表达及意义
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作者 张霞 陈曦 +1 位作者 陈樟树 欧阳学农 《福州总医院学报》 2006年第4期200-201,共2页
CC3基因是1997年shtivelman用RNA差异显示技术比较高转移性小细胞肺癌及低转移性小细胞肺癌细胞系时首先发现的一种与肿瘤转移有关的基因。1998年肖华等亦发现一种分子量为30kd的转录共分子,可特异性地提高HIV-1增殖调节蛋白Tat的转录... CC3基因是1997年shtivelman用RNA差异显示技术比较高转移性小细胞肺癌及低转移性小细胞肺癌细胞系时首先发现的一种与肿瘤转移有关的基因。1998年肖华等亦发现一种分子量为30kd的转录共分子,可特异性地提高HIV-1增殖调节蛋白Tat的转录,并命名为TIP30(Tatinteractingprotein30)。序列分析发现与CC3为同一蛋白。此基因的1.6kb的RNA转录产物在人的心、胎盘、肺、肝、肾、胰腺等正常组织和某些肿瘤细胞系中广泛存在。近年来的研究表明。TIP30基因具有抑制肿瘤转移、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管形成等作用。目前TIP30蛋白在肝癌组织中的表达、在肝癌发生发展过程中可能存在的作用未见文献报道。 展开更多
关键词 TIP30基因 肝癌组织 抑制肿瘤转移 肺癌细胞系 细胞肺癌 差异显示技术 转录产物 肿瘤细胞凋亡
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