Epstein—Barr病毒反义LMP1基因对鼻咽癌细胞CNE2株生长的抑制

将０．６ｋｂＬＭＰ１前段基因反向插入逆转录病毒载体（ｐＺＩＰ）中，构建成ｐＺＩＰ－反义ＬＭＰ１载体，再转入ＰＡ３１７包装细胞中，用Ｇ４１８筛选抗性克隆，获得产生１．７×１０５（ＣＦＵ／ｍｌ）反义ＬＭＰ１病毒的ＰＡ３１７细胞克隆。收集反义ＬＭＰ１病毒液，用于感染鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ２）。杂交实验证实ｐＺＩＰ－反义ＬＭＰ１载体基因整合到ＣＮＥ２细胞的ＤＮＡ中，并且有载体基因ＲＮＡ的表达。观察反义ＬＭＰ１基因对ＣＮＥ２细胞生长的影响，发现反义ＬＭＰ１基因可降低细胞生长速度，减弱ＣＮＥ２细胞在裸鼠体内的致肿瘤性。原位杂交证实，肿瘤组织中持续存在着反义ＬＭＰ１基因。以上结果说明，ＥＢＶ反义ＬＭＰ１基因对ＣＮＥ２细胞的生长有明显的抑制作用。

儿童淋巴瘤患者EBV-LMP1基因C末端30bp缺失突变检测

目的研究儿童淋巴瘤来源的EBV-LMP1基因C末端30bp缺失突变情况并分析其意义。方法应用巢式聚合酶链反应技术（Nested-PCR）扩增免疫组化检测EBV-LMP1或原位杂交检测EBV-EBERS阳性的霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和淋巴结反应性增生病理标本中EBV-LMPI基因，并进行序列分析。结果EBV-LMP1羧基端30bp缺失的del-LMP1的检出率在霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和淋巴结反应性增生分别为11／25、3／8和5／15，三组间差异无统计学意义（P=0．793，X^2=0．463）。经序列分析发现，所扩增的EBV-LMP1基因型可分为三个亚型：B95．8、China1和China2。结论EBV羧基端30bp缺失的del-LMP1基因型广泛存在EBV阳性的儿童霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤和淋巴结反应性增生病例中，与疾病本身没有关系。儿童来源的EBV-LMP1基因型主要可分为B958、China1和China2三个亚型。