应用Proofman-LMTIA技术双重检测当归和东当归

通过梯型熔解温度核酸等温扩增技术(Ladder-shape melting temperature nucleic acid isothermal amplification,LMTIA)与校对酶介导探针(Proofreading enzyme-mediated probe cleavage,Proofman)联合的方法对当归和东当归进行双重检测。以ddH2O为阴性模板,当归和东当归基因组DNA为阳性模板,测定当归和东当归引物的最适温度、灵敏度及稳定性,并进行了真实样品检测。结果表明,应用Proofman-LMTIA双重检测当归和东当归,引物测定的最适温度为62℃,当归引物灵敏度低至10 pg/μL,东当归引物灵敏度低至1 pg/μL,具有良好的稳定性。7份市售当归样品经检测均为当归。该研究可为当归和东当归的鉴别提供一种新的检测方法。

核酸等温扩增技术检测动物源食品研究进展

综述了依赖核酸序列的扩增(NASBA)、链替代扩增(SDA)、滚环扩增(RCA)、环介导等温扩增(LAMP)、赖解旋酶恒温基因扩增(HDA)、重组酶聚合酶扩增(RPA)、梯型熔解温度等温扩增(LMTIA)几种主要核酸等温扩增检测技术的发展及其基本原理、特点和在动物源食品检测中的应用,并对几种主要核酸等温扩增检测技术的特点及应用进行比较。

核酸检测技术鉴别转基因食品

转基因作物给农民乃至社会带来巨大的效益,但其安全性备受争议,转基因食品的检测引发了学者的高度重视。重点介绍了几种常用的鉴别转基因食品的核酸检测技术,如基因芯片技术、PCR、环介导等温扩增(Loop-med-iated Isothermal Amplification,LAMP)、重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)、交叉引物等温扩增(Cross Prime Amplification,CPA)。对这些技术的原理、优缺点进行了总结并对其进行展望。提出梯型熔解温度等温扩增(Ladder-Shape Melting Temperature Isothermal Amplification,LMTIA)技术,推进核酸检测技术的研究及在转基因食品检测中的应用。在转基因食品的检测中,RT-PCR,LAMP,LMTIA等均能检出0.01%以下的含量,可用于定量检测,表明这些核酸技术在转基因食品的检测有很好的应用前景。