2013-2019年广西边境地区低致病性禽流感病毒监测分析

为了解广西边境地区低致病性禽流感病毒(low pathogenic Avian influenza virus,LPAIV)的流行情况,本研究对2013-2019年在广西边境地区的规模养殖场和活禽市场采集的33964份家禽棉拭子样品,采用鸡胚接种方法进行病毒分离,并结合血凝抑制试验和RT-PCR等方法鉴定禽流感病毒的亚型。结果显示,共有3892份样品分离到LPAIV,2013-2019年的样品病毒分离率分别为17.39%、11.23%、13.59%、9.31%、9.09%、9.12%和15.21%,总分离率为11.46%,其中2013年样品的病毒分离率最高。分离到的LPAIV包括H1、H3、H4、H6、H9、H10和H117种亚型,样品病毒分离率分别为0.14%、4.37%、0.19%、4.06%、2.69%、0.01%和0.003%。其中活禽市场分离到H1、H3、H4、H6、H9、H10和H117种亚型流感病毒,样品病毒分离率分别为0.19%、5.53%、0.21%、5.29%、3.41%、0.01%和0.004%,总分离率为14.64%;而养殖场分离到H3、H4、H6和H94种亚型流感病毒,样品病毒分离率分别为1.26%、0.12%、0.79%和0.78%,总分离率为2.95%,养殖场的分离率远低于活禽市场(14.64%)。鸡源样品的病毒分离率为5.77%,水禽样品的病毒分离率为15.10%,环境样品的病毒分离率为21.67%,水禽和环境样品的病毒分离率远高于鸡。结果表明,当前广西边境地区家禽携带多种亚型LPAIV,水禽是高风险禽群,应进一步加强监测和防控;活禽市场污染严重,应进一步加强对活禽市场的监管力度,建立和实施更加科学有效的活禽市场运营机制。

孔雀低致病性禽流感病毒株的分离与鉴定

用鸡胚分离方法从发病孔雀脑组织中分离病毒；将分离病毒进行血凝试验、血凝抑制试验、致病指数试验和半数致死量试验。结果表明，该株病毒可凝集鸡红血球，血凝性可被已知的禽流感（H9N2）抗体所抑制，脑内致病指数在1．6-2．5范围内，半数致死量，致病指数为50％，表明该病毒为低致病力禽流感毒株。

1株野鸟源H5N2亚型禽流感病毒对SPF鸭的致病性分析

旨在初步评估野鸟源H5N2亚型禽流感病毒（AIV）对幼龄鸭的致病力，为研究AIV的致病机制和禽流感发生机制提供理论依据。本研究以2周龄SPF鸭（绍兴麻鸭）为模型，模仿自然感染1株H5N2亚型LPAIV，对其致病性进行了初步研究。结果表明，试验鸭临床症状不明显，病毒在鸭消化道更能进行有效复制，排毒时间较长，具有直接接触感染的能力。病毒感染鸭7～14d可产生HI抗体，在第3周达最高值。病毒仅能在盲肠扁桃体和法氏囊2个器官组织中较高水平复制，却对法氏囊、肺、胸腺和胰腺造成不同程度的损伤。结果提示，幼龄鸭在AIV传播中起到一定作用，至于是否与真正自然状态下的感染有差异，还需进一步试验证实。

2015—2019年广西柳州市活禽市场低致病性禽流感病毒监测

为了解广西柳州市活禽市场低致病性禽流感病毒的流行及分布情况,2015年6月—2019年5月持续在柳州市8个活禽市场采集鸡鸭喉头/泄殖腔棉拭子样品1 425份(麻花鸡500份、麻鸭925份),通过SPF鸡胚培养,采用HA和HI试验进行鉴定,并对结果进行统计分析。结果显示:共检出阳性样品156份,阳性率为10.95%(156/1 425);分离出6种亚型,阳性率从高到低依次为H3、H4、H9、H6、H11和H13,其中H13亚型为广西地区首次报道发现,样品来源于麻鸭;从种属分布和混合感染情况来看,鸭群中6种亚型均有感染,但以H3、H4亚型为主,主要表现为混合感染,而鸡群中只有4种亚型,以H9亚型为主。结果表明,柳州市活禽交易市场低致病性禽流感病毒亚型复杂,尤其是麻鸭,且有新亚型出现,病毒变异重组风险加剧,需要坚持活禽市场禽流感病毒长期监测。

H6亚型禽流感病毒研究进展

禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)是一种单股负链RNA病毒,可对禽类和哺乳动物造成严重的呼吸系统疾病。H6 AIV属于低致病性禽流感病毒(LPAIV),在野鸟和家禽中广泛存在。研究表明,H6 AIV的基因片段中出现氨基酸残基突变时,使其具有跨越种属障碍而感染哺乳动物的潜在风险,对人类的生命安全及家禽产业经济发展造成威胁。因此,加强对H6 AIV的监控对畜牧业生产和公共卫生安全至关重要。论文从H6 AIV遗传进化特征、H6 AIV在家禽和野鸟中感染情况、受体结合特征对H6 AIV跨物种传播的影响、H6 AIV对哺乳动物的致病力及对公共卫生安全造成的威胁等方面进行了论述。

低致病性禽流感H9N2感染蛋鸡引发肠毒综合征诊治

蛋鸡养殖场的鸡肠毒综合征是由低致病性禽流感(H9N2)感染引起,虽不会一次性造成家禽大批死亡,也会给养禽业造成严重的经济损失。试验表明,通过科学合理的治疗措施,疗效显著。

低致病性禽流感H9N2病毒感染鸡群引起巴氏杆菌的内源性感染

为研究低致病性禽流感H9N2病毒感染鸡群的变化,用107.4EID50/0.1mlH9N2病毒,0.5ml/只,接种1月龄SPF鸡。结果5日后引起鸡群发病,并引起一些个体发生死亡,剖检发现喉头充血、肺淤血,气囊膜增厚,皮下胶样浸润、出血,腺胃乳头出血,十二指肠出血。肝、脾、肾、肺常见有灰黄色坏死灶。无菌取肺组织做细菌培养时发现在血平板上有灰白色露珠状菌落,挑取菌落做碱性美蓝染色镜检发现两极浓染的球杆状菌;经生化和PCR检验确认该菌属于多杀性巴氏杆菌。低致病性禽流感H9N2病毒感染鸡群可引起巴氏杆菌的内源性感染,从而导致鸡群的高发病率与高死亡率现象。

1株野鸭源H6N2亚型AIV对SPF鸭的致病性

本研究选取2周龄SPF鸭(绍兴麻鸭)自天然孔感染1株野鸭源H6N2亚型LPAIV,评价其对幼龄鸭的致病性。结果显示,试验感染鸭临床症状较轻微,病毒在鸭消化道复制能力较呼吸道内更强,且具有水平传播的能力。仅能在盲肠扁桃体和法氏囊2个组织器官中检测到病毒,但可对法氏囊等多个组织器官造成不同程度的损伤。此外感染鸭可产生HI抗体,并在第21天达到高峰。结果表明,该株H6N2亚型LPAIV对幼龄鸭的致病力较低,在AIV病毒传播中幼龄鸭起到了一定作用,为研究H6N2亚型LPAIV的致病机制及AIV发病机理提供了理论数据。

2株欧亚与北美谱系重排H6N8亚型禽流感病毒的遗传进化及分子特征分析

目的解析监测中发现的欧亚与北美谱系重组H6N8亚型禽流感病毒的遗传进化及分子特征,为禽流感病毒跨洲际传播及基因重排研究提供支持。方法2019年秋季在图牧吉地区采集雁鸭类粪便样品,分离H6N8亚型禽流感病毒并进行全基因序列测定,分析其遗传进化及分子特征。结果共采集雁鸭类粪便及拭子样品5062份,分离到2株H6N8LPAIV(TMJ43、TMJ120)。遗传进化分析显示,分离株病毒NA与北美的阿拉斯加地区所分离的H3N8亚型AIV的NA节片聚集在同一进化分支,HA和其它6个内部基因节片均属于欧亚进化分支,且两株禽流感病毒分别有不同的重配发生。2株H6N8亚型禽流感病毒为欧亚谱系与北美谱系基因重排毒株,其中N8基因最近一次欧亚与北美基因节片重排发生在2016年。分子特征分析显示,HA蛋白的碱性裂解位点为PQIETR↓GLF,符合低致病性禽流感病毒的特征。在NP蛋白,发生了具有增强鸡禽流感毒力的A184K突变。在TMJ43,NS1蛋白发生了能增强哺乳动物毒力的A/P42S突变。结论在我国内蒙古地区分离的2株H6N8亚型禽流感病毒为欧亚谱系和北美谱系的重排毒株,两毒株均发生了增强家禽和哺乳动物感染能力的突变。表明北美毒株通过候鸟迁徙进入我国,与欧亚谱系毒株发生重配并在野鸟中频繁出现,可为禽流感病毒的跨洲际传播研究提供信息支持。