浑浊红球菌LPD06283蛋白的生物信息学分析

试验旨在探究浑浊红球菌PD630 (Rhodococcus opacus PD630) LPD06283蛋白的结构与功能。采用生物信息学方法对LPD06283蛋白的理化性质、亲水性、疏水性、双性α螺旋、同源性、信号肽、跨膜区、二级结构、结构域、三级结构、磷酸化修饰位点、相互作用蛋白质进行研究。结果显示,LPD06283蛋白是一种稳定酸性亲水蛋白,N端疏水区形成双性α螺旋,与红球菌RHA1 (Rhodococcus jostii RHA1) MLDS蛋白的亲缘关系较近,无信号肽和跨膜区;LPD06283蛋白的二级结构由α螺旋(81.88%)、β转角(3.62%)和无规则卷曲(14.49%)构成,N端存在一个载脂蛋白结构域,三级结构采用综合法预测得到且质量较高;LPD06283蛋白含有19个磷酸化位点,相互作用最强的蛋白质是XRE家族DNA结合蛋白。研究表明,LPD06283蛋白可能参与浑浊红球菌的脂质代谢,可作为微生物油脂研发的潜在靶标。

脂质-鱼精蛋白-DNA复合物的构建及其对细胞的体外转染

目的 研究新型非病毒载体脂质-聚阳离子-DNA(LPD)复合物的制备方法及其对体外细胞的转染率。方法 用薄膜-挤压法制备空白阳离子脂质体,与鱼精蛋白-DNA复合物在室温孵育后,得到LPD;用透射电镜观察其形态,用激光粒度仪测定其粒径和zeta电位;LPD与DNA酶I溶液在37℃下孵育不同时间后,用琼脂糖凝胶电泳观察其降解情况;用荧光法测定其包封率;用X-gal染色法考察了LPD对张氏(Chang)肝细胞,HepG2肝癌细胞和SMMC-7721肝癌细胞的转染率。结果 LPD的形态近似于球体,平均粒径为143.5 nm,平均zeta电位为+32.6 mV;37℃下核酸酶作用2 h后,LPD中的DNA几乎无降解;平均包封率为93.42％;LPD对张氏(Chang)肝细胞、HepG2肝癌细胞和SMMC-7721肝癌细胞的转染率分别为(69±6)％,(43±7)％和(96.2±1.8)％。结论 LPD是一种制备工艺简单、体外稳定性好、转染率高,具有应用潜力的非病毒载体系统。

低蛋白饮食治疗对延缓糖尿病肾病慢性肾衰进展的疗效分析

目的 观察在不补充α 酮酸或必需氨基酸的前提下 ,给优质低蛋白饮食治疗对糖尿病肾病 (DN)所致慢性肾衰 (CRF)患者肾功能进展情况的影响。方法 5 4例慢性肾功能不全患者按实际蛋白摄入量分为两组 ,优质低蛋白饮食治疗组 (LPD 蛋白质摄入量为 0 .60± 0 .0 7g .kg- 1 .d- 1 ) 3 4例 ,正常蛋白饮食组 (蛋白质摄入量为 1.0± 0 .0 6g·kg- 1 ·d- 1 ) 2 0例 ,观察患者顺应性及肾功能进展情况。结果 患者对低蛋白饮食有良好的耐受性 ,3 4例患者都能坚持LPD治疗。LPD组和正常蛋白饮食组肾功能不全下降速度分别为 0 .2 62± 0 .0 15ml·min- 1 ·月 - 1 和 0 .684± 0 .0 86ml·min- 1 ·月- 1 ,LPD组显著慢于正常蛋白饮食组 (P <0 .0 1) ,LPD组患者平均 62 .6± 8.6个月进入透析治疗 ,而正常蛋白饮食组平均 2 6.4± 3 .5个月进入透析治疗 ,比LPD组提前 3～ 4年。结论 LPD在不补充α 酮酸或必需氨基酸的前提下 ,患者有良好的耐受性 ,并能有效延缓慢性肾衰的进展 ,推迟开始透析治疗的时间 ,成为延缓DN所致慢性肾衰进展的重要方法之一。

低蛋白饮食在延缓慢性肾功能衰竭恶化方面的疗效、作用机理、副作用及其应有的对策

对慢性肾功能衰竭的患者而言，在现有的治疗方法中，采用低蛋白饮食是延缓慢性肾功能衰竭的有效方法，但饮食的蛋白含量也并非越低越好。本章就低蛋白饮食疗法的治疗疗效、作用机理、影响疗效的因素、依从性、副作用及应用前景等方面的研究进展予以述评。

慢性肾脏病3～5期患者对优质低蛋白饮食依从性的质性研究

慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）现已成为危害人类健康的主要慢性疾病之一。在中国,其患病率为10.8%[1],并呈逐年上升的趋势,严重威胁着我国国民健康。药物治疗是目前CKD治疗的主要手段,但是药物治疗的费用昂贵,给患者个人和家庭甚至国家带来巨大的经济负担,因此需要寻找其他方式,在缓解患者和社会经济负担的同时,辅助药物治疗,起到防治CKD的效果。CKD是一种生活方式疾病,

LPD加α-酮酸治疗中老年肾病综合征

中老年肾病综合征(NS)患者通常存在一定程度的肾功能不全和严重的低蛋白血症,目前为止尚无有效的治疗方法.输注白蛋白及其它胶体渗透液已被证实会带来肾小管和/或间质的进一步损害.本文采用前瞻性方法,采用低蛋白质饮食(LPD)加α-酮酸治疗中老年NS,发现该方法能有效纠正低蛋白血症,保护肾功能,且不发生或加重营养不良、贫血等症状.

不可分型流感嗜血杆菌LPD基因分布及其重组表达产物免疫保护作用

目的：了解无荚膜型流感嗜血杆菌（NTHi）临床菌株中外膜脂蛋白D（LPD）基因分布及其序列保守性，确定重组表达的LPD（rLPD）免疫原性和免疫保护性。方法采用PCR检测NTHi临床菌株中LPD基因，T-A克隆后测序。构建LPD基因原核表达系统，采用Ni-NTA亲和层析法提纯表达的rLPD。采用SDS-PAGE和Bio-Rad凝胶图像分析系统检测rLPD表达情况及其产量。采用ELISA和Westernblot检测rLPD的抗原性和免疫反应性。采用小鼠感染模型了解rLPD对NTHi致死性感染的免疫保护效果。结果所有NTHi菌株均检出LPD基因，其核苷酸和氨基酸序列相似性分别高达98.0％～99.4％和98.5％～100％。所构建的原核表达系统能高效表达rLPD。rLPD免疫家兔可产生高效价抗体，NTHi全菌兔抗血清及NTHi感染患儿血清能识别rLPD并与之结合。ELISA结果显示，93.6％（58/62）和53.2％（32/62）NTHi感染患儿血清分别rLPD-IgM和rLPD-IgG阳性。100μg或200μgrLPD对NTHi致死性感染小鼠的免疫保护率分别为60.0％或73.3％。结论LPD基因在NTHi菌株中广泛分布且序列保守，其重组表达产物rLPD具有良好的免疫原性及一定的免疫保护作用，可作为NTHi基因工程疫苗候选抗原之一。

基于MAPKs信号通路探讨补肾助孕方改善BN大鼠黄体功能的作用机制

目的:探讨补肾助孕方降低黄体功能不全(LPD)自然模型-棕色挪威(BN)大鼠卵巢凋亡水平的可能作用机制。方法:使用随机数表法将50只SPF级雌性BN大鼠分为模型组、地屈孕酮组(0.002 g·kg^(-1))、补肾助孕方低、中、高剂量组(4.5、9、18 g·kg^(-1)),给予相应药物剂量灌胃,每天1次,给药3个动情周期。使用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠c-Jun氨基酸末端激酶(JNK)、磷酸化(p)-JNK、细胞外信号调节激酶(ERK)、p-ERK、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、p-p38MAPK、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2的蛋白表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠JNK、ERK、p38 MAPK、Bax、Bcl-2 mRNA表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清孕酮(P)和雌二醇(E;)水平,苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢形态。结果:与模型组比较,补肾助孕各剂量组使用1个周期后,大鼠动情周期恢复情况差异有统计学意义(P<0.05);补肾助孕方低剂量组卵巢组织形态有所改善,中、高剂量组卵巢组织各级卵泡结构清晰,囊状卵泡及闭锁卵泡减少,颗粒细胞层数较多,黄体数增多、境界清晰、体积较大,以新鲜黄体为主;补肾助孕方低、中、高剂量组大鼠卵巢组织Bcl-2 mRNA表达水平上调,Bax mRNA表达水平下调(P<0.05,P<0.01);补肾助孕方高剂量组大鼠卵巢组织JNK、p38 MAPK mRNA水平显著下调(P<0.01);补肾助孕方低、中剂量组大鼠卵巢组织ERK mRNA表达水平上调(P<0.05)。与模型组比较,补肾助孕方中、高剂量组Bcl-2蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),补肾助孕方各剂量组Bax蛋白表达水平显著下调(P<0.01);补肾助孕方各剂量组大鼠卵巢组织中JNK、ERK、p38 MAPK蛋白表达水平差异无统计学意义;补肾助孕方中、高剂量组大鼠卵巢组织中p-ERK蛋白表达水平显著升高(P<0.01),p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。补肾助孕方低、中、高剂量组E;水平呈不同程度升高(P<0.05,P<0.01),补肾助孕方中剂量组P水平明显升高(P<0.05)。结论:补肾助孕方能够改善BN大鼠血清性激素,恢复动情周期,减少卵泡闭锁及囊泡化、维持黄体形态及功能,从而改善黄体功能,治疗黄体功能不全,其机制可能与调控MAPKs信号通路降低BN大鼠卵巢组织凋亡水平有关。