早发冠心病患者中LPL基因多态性与脂代谢的相关性探究

早发冠心病(premature coronary artery disease,PCAD)是冠心病(coronary heart disease, CHD)的一种特殊类型之一,其发生和发展和多种因素有关。LPL基因参与动脉粥样硬化的形成相关已被多项研究证实,越来越多的研究显示LPL基因多态性与脂质代谢紊乱有关。本文将从以下几个方面分别阐述早发冠心病患者中LPL基因多态性与脂代谢的相关性。

牦牛LPL基因外显子7多态性与生长性状相关性的研究

采用PCR-SSCP技术对5个牦牛品种共398头牦牛脂蛋白脂肪酶基因(LPL)外显子7进行了多态性研究,分析了该基因与牦牛生长性状的相关性。结果表明,牦牛LPL基因外显子7存在2个等位基因3种基因型。各群体在该基因座上呈Hardy-Weinberg平衡状态。三种基因型与牦牛部分生长性状的最小二乘法分析表明,该位点多态与牦牛的体重、体高、胸围存在显著相关(P<0.05),BB型个体体重、体高、胸围显著高于AA和AB型个体。初步推断牦牛LPL基因第7外显子可作为牦牛标记辅助选择的遗传标记之一。

兴义鸭LPL基因外显子8多态性与生长和肉质性状的关联性分析

脂蛋白脂酶(LPL)是动物脂质沉积和新陈代谢的关键酶,对生长和肉质发挥着重要作用。试验采用PCR-SSCP法和DNA直接测序技术相结合对兴义鸭LPL基因外显子8进行多态性检测,并分析其多态与生长和肉质性状的关联性。结果表明,在兴义鸭LPL基因外显子8首次检测到1个T1251C同义突变,产生三种基因型TT、TC和CC,2个等位基因T和C,基因型TT和等位基因T的频率分别为0.807 7和0.875 0,多态信息含量为0.194 8,表现为低度多态,卡方(χ2)检验表明T1251C位点的基因型分布在兴义鸭中未偏离HardyWeinberg平衡。最小二乘分析显示,TT基因型个体的宰前体重显著低于CC基因型(p<0.05),胸宽显著低于TC基因型(p<0.05),推测等位基因C可能是兴义鸭生长性状的有利等位基因,可作为生长性状的一个标记性辅助选择位点。

日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积和LPL基因表达的影响

试验旨在研究不同日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积及脂蛋白酯酶(LPL)基因mRNA表达影响。试验以3周龄北京油鸡公鸡为研究对象,将480只公鸡随机分为4组,分别饲喂4个代谢能水平的日粮(12.122、12.540、12.958和13.376MJ/kg),每个处理组5个重复,每个重复24只鸡。试验期为10周。采用荧光定量PCR方法检测LPL基因mRNA表达水平。结果表明,日粮代谢能水平对鸡体脂沉积各项指标和LPL基因mRNA表达水平影响极显著,随日粮代谢能水平提高,各项体脂沉积指标极显著上升,胸肌和腿肌IMF、皮脂重和皮脂率在ME3达到峰值,LPL基因mRNA表达水平在ME2组达到峰值(P<0.01)。LPL基因mRNA表达水平与腹脂率、皮脂重和皮脂率呈显著正相关(P<0.05)。研究结果提示,日粮代谢能水平显著影响北京油鸡体脂沉积和LPL基因mRNA表达;LPL基因表达影响北京油鸡体脂沉积状况。

湘西黄牛LPL基因第2外显子的遗传多态性及其与生长性状的关联分析

为了探讨湘西黄牛分子遗传特征及寻找与生长性状相关的分子标记,采用创造酶切位点PCR-RFLP(CRS-PCR-RFLP)和测序技术检测了湘西黄牛LPL基因第2外显子的多态性,并进行了LPL基因的基因型与湘西黄牛生长性状的关联分析。多态性分析结果表明,湘西黄牛群体LPL基因第2外显子存在g.355420C>T和g.355427T>A 2个突变位点,且都处于中度多态,其中g.355420C>T位点为本试验新发现的突变位点,g.355427T>A位点所编码的氨基酸由苏氨酸转变为丝氨酸。基因型与生长性状的关联分析结果表明,g.355420C>T位点CC基因型个体的体高、体长和体重均显著大于CT和TT基因型个体(P<0.05),C等位基因对湘西黄牛的生长性状为正效应。g.355427T>A位点的TT和AT基因型个体的体高、体长、胸围和体重均极显著大于AA基因型个体(P<0.01),T等位基因为正效应。表明LPL基因第2外显子的g.355420C>T和g.355427T>A位点对湘西黄牛生长性状有显著影响,可能为湘西黄牛生长性状的分子遗传标记位点。

湘西黄牛LPL基因exon5的多态性与生长性状的相关性

脂蛋白脂酶(LPL)是机体脂质和脂蛋白代谢的关键酶,在脂质代谢、转运和能量代谢方面发挥着重要作用,影响着动物的生长发育。为探讨湘西黄牛LPL基因的分子遗传特征和寻找与生长性状相关的分子标记,采用PCR产物测序的方法检测了湘西黄牛LPL基因的SNP位点,并进行了LPL基因exon 5的g.365458G>A位点进行了群体遗传多态与生长性状的关联分析。SNP检测结果表明,LPL基因在Intron 4上新发现了3个SNP(g.365186A>C、g.365248C>T和g.365249C>T),在exon5的182 bp处检测到了1个SNP(g.365458G>A)。g.365458G>A位点的多态性检测结果表明,g.365458G>A位点存在AA、AG和GG 3种基因型,呈中度多态,且达到了Hardy-Weinberg平衡状态。多态性与生产性状的相关性分析结果表明,湘西黄牛AA基因型个体的体高和胸围显著大于GG基因型个体(P<0.05),AA基因型个体的体长和体重极显著大于GG基因型个体(P<0.01)。A等位基因对湘西黄牛的体高、体长、胸围和体重都为正效应,而G等位基因都为负效应。推测LPL基因exon5的g.365458G>A位点有可能作为湘西黄牛生长性状的分子遗传标记位点。

LPL基因多态性与黑羽番鸭肉质性状的相关性分析

采用PCR-SSCP技术对黑羽番鸭LPL基因部分序列进行了多态性研究,分析不同基因型与肉质性状的关联。结果表明:在第3内含子上发现了2个SNPs,分别为G120A、A128G,形成了HH、HI、II 3种基因型。群体纯合度为0.5001,多态信息含量为0.3749。II型公鸭胸肌中Pro含量显著高于HI型,II型Val、Met、Phe含量显著高于HH型;HI型母鸭胸肌中His含量显著性高于II型;II型公鸭腿肌中Asp含量显著高于HI型,HH型His含量显著高于II型,II型Pro含量显著高于HH型,II型Ile、Phe含量显著高于HH型、HI型;HI型母鸭腿肌中Gly含量显著高于II型,HI型Arg含量显著高于HH型(P<0.05)。

猪生长肥育期背最长肌LPL基因表达与肌内脂肪含量相关研究

选取健康、体重接近10kg的杜洛克×长白×大约克去势公猪36头，体重达10，20，35，50，80，110kg时各屠宰6头。从背最长肌提取总RNA，反转录为cDNA，以猪B-actin基因作为内参，利用实时荧光定量RT-PCR技术，对各阶段LPL mRNA进行相对定量分析；结合IMF含量及大理石纹评分，分析LPL基因表达水平对IMF含量等的影响。结果表明：LPL mRNA、IMF含量及大理石纹评分随体重增加均呈上升趋势，其中LPL mRNA表达量80kg阶段显著高于10～50kg阶段（P〈0．05），肌内脂肪和大理石纹评分110kg均高于10～50kg阶段（P〈0．01）；IMF含量与大理石纹评分和LPL基因表达水平均呈现极显著正相关（P〈0．01）。

金定鸭LPL基因内含子5多态性对生产性能的影响

LPL基因是动物脂肪代谢和沉积以及畜禽肉质研究的重要候选基因。根据鸡的LPL基因组序列和鸭的LPL基因mRNA序列外显子的高度同源区设计1对特异性引物对金定鸭LPL基因内含子5进行扩增,利用PCR-SSCP方法检测单核苷酸多态,并分析其对体重、体尺、屠体和肉质性状的遗传效应,结果表明,所扩增片段大小为347 bp,内含子序列为187 bp,检测到3种基因型:AA、AB和BB,AA为优势基因型,A为优势等位基因,序列比对发现在内含子内存在4个SNP,分别为T243A、A244T、G265A和G269A,遗传杂合度为0.09,属低遗传杂合度,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡;AB基因型个体的半潜水长、胸深、胫长和胫围显著高于AA基因型(P<0.05),其他各基因型在各指标之间的差异均不显著(P>0.05),研究结果提示AB基因型是体尺性状的有利基因型。

伊犁马LPL基因多态性及其与肉质性状关联性分析

【目的】研究伊犁马脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因多态性及其对肉质性状的影响,为专门化肉用马选种提供技术支撑。【方法】以41匹成年伊犁马为研究对象,采集颈静脉血液样本及其三角肌、背阔肌、臂三头肌、腹外斜肌和臀中肌5个部位肌肉样本,提取伊犁马DNA样本并测定肉质性状,利用PCR测序法筛选LPL基因突变位点并进行多态性分析,结合伊犁马肉质性状数据与LPL基因多态性进行关联性分析。【结果】所选马匹中共检测出2个突变位点(g.715T>C和g.12074C>A),均为内含子突变,2个位点均只检测出2种基因型,为低度多态位点。g.715T>C位点TT基因型马匹背阔肌和臀中肌失水率显著高于TC基因型马匹(P<0.05),背阔肌剪切力极显著大于TC基因型马匹(P<0.01),腹外斜肌剪切力极显著小于TC基因型马匹(P<0.05),三角肌和臀中肌剪切力显著大于TC基因型马匹(P<0.05);g.12074C>A突变位点CC基因型马匹臂三头肌和臀中肌失水率极显著低于CA基因型马匹(P<0.01),背阔肌和腹外斜肌失水率显著低于CA基因型马匹(P<0.05),臂三头肌熟肉率极显著高于CA基因型马匹(P<0.01),三角肌和腹外斜肌熟肉率与CA基因型马匹呈显著差异(P<0.05),臂三头肌和腹外斜肌剪切力极显著高于CA基因型马匹(P<0.01)。【结论】LPL基因g.715T>C和g.12074C>A位点是影响伊犁马肉质性状的潜在位点。

不同品种猪LPL基因的PCR-RFLP分析

采用PCR-RFLP技术,对东北民猪、大白猪、长白猪和杜洛克等4个猪种的LPL基因的多态性进行了检测。结果表明:LPL基因片段经EcoRⅠ内切酶消化后获得3种基因型:AA型(1901bp)、AB型(1901bp/1223bp/678bp)和BB型(1223bp/678bp),卡方检验结果表明各基因型的分布在各猪种间差异不显著(P>0.05)。

枣梨、山楂口服液对高脂血症胰腺炎患者脂代谢及LPL基因的影响

目的:研究枣梨、山楂口服液对高脂血症胰腺炎(hvperlipidemia pancreatitis,HAP)患者脂代谢及脂蛋白酯酶(lipoproteinesterase,LPL)基因表达的影响。方法:选取2017年12月至2018年12月就诊于我院肝胆胰外科的60例HAP患者为研究对象,分为对照组与实验组各30例。对照组予以常规的禁食、胃肠减压、抑制胰酶分泌、抑酸、抗感染等治疗;实验组在对照组基础上加用精制枣梨、山楂口服液进行干预,持续2周后测定血清中总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)等生化指标,以此评定枣梨、山楂对HAP患者降血脂的作用;用实时荧光定量RT-PCR法测定肝组织中LPL的mRNA表达水平,Western blot测定LPL蛋白含量,从分子水平研究枣梨、山楂口服液降血脂的机制。结果:两组患者治疗前后血清TC、TG、HDL-C、LDL-C等指标比较差异均具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,实验组患者LPLmRNA及蛋白在肝脏组织中的表达量明显升高,差异具有统计学意义(t=3.791,P=0.006)。结论:枣梨、山楂口服液能有效调控HAP患者LPL基因的表达,进而缓解胰腺炎病情进展。

黑羽番鸭LPL基因多态性与肉质性状的关系

采用PCR-SSCP技术对黑羽番鸭脂蛋白脂酶(LPL)基因进行多态性研究,分析该基因与常规肉品质、肌肉营养成分等指标的相关性。结果表明:黑羽番鸭LPL基因第3内含子上发现了A4G突变,群体纯合度为0.5054,多态信息含量为0.3723,形成了EE、EF、FF 3种基因型。EF型母鸭腿肌失水率显著高于FF型(P<0.05,下同)。EF型公鸭腿肌中镁含量显著高于FF型。EE型公鸭胸肌中Ala含量显著高于EF型、FF型;FF型母鸭胸肌中Asp、His含量显著高于EF型;FF型公鸭腿肌中Ser、Pro含量显著高于EE型;EE型母鸭腿肌Lys含量显著高于EF型,EF型Cys、Val含量显著高于FF型。

12周龄大围山微型鸡与艾维茵肉鸡肌肉营养成分及LPL基因表达差异研究

为研究云南地方鸡种大围山微型鸡与艾维茵肉鸡肌肉营养成分中粗脂肪含量与脂蛋白脂酶(LPL)基因mRNA表达差异,屠宰同批12周龄大围山微型鸡和艾维茵肉鸡各20只,测定肌肉营养成分含量和LPL基因表达量。结果显示:在胸肌和腿肌中,大围山微型鸡粗灰分含量、粗蛋白含量、粗脂肪含量均显著高于艾维茵肉鸡,在胸肌和腿肌中大围山微型鸡水分的含量显著低于艾维茵肉鸡,且胸肌和腿肌中大围山微型鸡LPL基因表达量分别为3.98、5.72,均高于艾维茵肉鸡的3.70、3.54。可见,大围山微型鸡肌肉粗蛋白、粗脂肪等营养成分优于艾维茵肉鸡,LPL基因促进脂肪沉积,因此LPL基因可作为影响家禽脂肪沉积的重要候选基因。

舍内氨气浓度对鸭肝脏PPARα、FABP1及LPL基因表达的影响

为探究舍内不同氨气浓度对鸭肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、脂肪酸结合蛋白1(FABP1)和脂蛋白脂肪酶(LPL)基因的表达影响,将36只43周龄山麻鸭随机分为2组,即舍内氨气浓度10 mg·L^-1组和75 mg·L^-1组,饲养至10、20和30 d时采用荧光定量PCR法检测氨气对鸭肝脏PPARα及其信号通路中脂代谢相关基因FABP1和LPL表达的变化。结果表明:与10 mg·L^-1氨气组相比,75 mg·L^-1氨气组饲养至10、20、30 d时,鸭肝脏中PPARα、FABP1和LPL表达量均显著下降。相关性分析表明,在氨气应激状态下,PPARα表达量上升伴随LPL表达量显著上升,同时FABP1表达量上升,LPL表达量极显著上升。这说明高浓度氨气对鸭肝脏中PPARα、FABP1和LPL表达有显著影响,且PPARα和FABP1表达量与LPL表达量均呈正相关关系,这一研究有助于阐明鸭PPARα信号途径在氨气应激状态下对脂代谢调节的作用。

猪LPL基因部分序列的克隆及多态性分析

脂蛋白脂酶是一种多功能蛋白,其主要作用是催化乳糜微粒和极低密度脂肪酸的甘油三酯水解,是影响脂肪沉积的关键酶之一。对猪LPL基因部分序列进行克隆测序,并利用PCR-SSCP方法对其进行分子扫描,寻找多态位点,分析不同基因型在不同猪种间的分布规律。χ2独立性检验表明,野猪、民猪、大白猪、长白猪、杜洛克之间不同基因型的分布差异极其显著(P<0.01)。

LPL基因表达量与高黎贡山猪脂肪酸含量的关联分析

为了研究LPL基因表达量对高黎贡山猪肌肉脂肪酸含量的调控作用,本实验采用实时荧光定量PCR技术测定LPL基因在高黎贡山猪3个组织中的相对表达量,用气相色谱-质谱联用法对背最长肌脂肪酸含量进行测定,并将LPL基因相对表达量与肌肉脂肪酸含量进行关联分析。结果显示,LPL基因在高黎贡山猪3个组织中的相对表达趋势为:背脂>背最长肌>肝脏;LPL基因在肝脏组织中的相对表达量与肌内十六酸、亚油酸、二十二碳六烯酸、ω-3PUFA、ω-6PUFA含量呈显著负相关;在背最长肌组织中的相对表达量与ω-6/ω-3PUFA呈显著正相关;在背脂组织的相对表达量与肌肉脂肪酸含量无显著相关性。说明LPL基因对高黎贡山猪肌肉脂肪酸含量具有一定的调控作用,但能否作为影响高黎贡山猪脂肪酸沉积的主效基因还有待进一步验证。

妊娠期糖尿病患者LPL基因多态性与胰岛素抵抗关系

目的:探讨LPL基因多态性与妊娠期糖尿病患者胰岛素抵抗的相关性。方法:选取2019年1月-2020年4月本院分娩的妊娠期糖尿病患者93例作为GDM组,同期分娩的健康产妇105例作为正常组,采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析法分析胎盘组织LPL Hind基因多态性,统计分析两组对象及子代空腹血糖(FBG)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(IR)、体质指数(BMI)以及胰岛素抵抗指数(IR)与LPL多态性的关系。结果:GDM组H+等位基因的频率(82.8%)高于正常组(64.8%),H+H+基因型患者TC、TG、HDL、LDL、FINS、BMI与非H+H+基因型患者存在差异(均P<0.05);GDM组组织中LPL Hind基因多态性与胰岛素抵抗指标呈正相关性;GDM组H+H+基因型产妇子代BMI、IR、FINS均高于非H+H+基因型产妇子代(均P<0.05)。结论:LPL基因多态性是妊娠糖尿病患者胰岛素抵抗有关,可能影响其子代胰岛素抵抗发生异常。

民猪LPL基因真核表达载体的构建

为了进一步分析脂蛋白脂酶(Lipoprotein lipase,LPL)基因的生物学功能。采用克隆测序的方法获得了民猪LPL基因的完整CDS序列,将其克隆到pMD-18T载体上,将测序验证正确的基因序列插入到pcDNA3.1(+)质粒载体中,构建了pcDNA-LPL真核表达载体。结果表明,所得序列与GenBank中登录的猪LPL基因同源性为99.30%,说明LPL基因的真核载体构建成功。该研究为在细胞水平上研究LPL的表达和功能奠定了试验基础,为进一步分析LPL基因功能提供了理论依据。

牦牛LPL基因组织表达及其突变与乳质性状的关联分析

【目的】检测牦牛脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因在不同组织中的表达量及其突变位点,评估基因突变对甘南牦牛乳质性状的影响,丰富牦牛乳质性状分子遗传数据。【方法】采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测甘南牦牛LPL基因在不同组织中的相对表达量;应用单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)技术检测LPL基因在青海牦牛、天祝白牦牛、甘南牦牛、西藏牦牛及野血牦牛5个群体中的突变,应用一般线性模型分析基因突变与甘南牦牛乳质性状的相关性。【结果】甘南牦牛LPL基因在皮下脂肪和心脏中高表达,在背最长肌、乳腺、肝脏、脾脏、肾脏、大肠、小肠、皱胃、瘤胃中低表达,在肺脏中表达量最低。在5个牦牛群体LPL基因的exon 3区,exon 6区和exon 7区均未检测到多态性,在intron 2区检测到2处单碱基突变,形成M和N 2种等位基因,其中M为优势等位基因(频率为67.11%~83.21%);在exon 4-intron 4区也检测到2处单碱基突变,形成A和B 2种等位基因,其中等位基因A为西藏牦牛优势等位基因(频率为63.95%),其他4类群牦牛中B为优势等位基因(频率59.75%~69.71%)。5个类群牦牛LPL基因在intron 2区和exon4-intron 4区为中低度多态。关联分析表明,甘南牦牛LPL基因intron 2区基因型MM个体、exon 4-intron 4区基因型AB个体和两区域单倍型组合H1H2(M-A/M-B)的乳脂率、乳蛋白率及总固体物质含量均高于其他个体,且乳脂率显著高于其他个体(P<0.05)。【结论】5个类群牦牛LPL基因intron 2区和exon4-intron 4区各存在2处单碱基突变,且显著影响了甘南牦牛的乳脂率,可作为牦牛乳脂性状潜在的遗传标记。