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连翘苷通过激活Hippo-YAP信号通路抑制结肠癌LS180细胞的恶性生物学行为
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作者 郑成富 周贵丰 +1 位作者 李青 陈营 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期566-572,共7页
目的:探究连翘苷(Phi)通过调控Hippo/YAP信号通路对结肠癌LS180细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:用不同浓度(0、5、10、20、40、80µmol/L)的Phi处理人结肠癌LS180细胞,MTT法检测24、48和72 h时的细胞活力。将LS180细胞分为对照组... 目的:探究连翘苷(Phi)通过调控Hippo/YAP信号通路对结肠癌LS180细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:用不同浓度(0、5、10、20、40、80µmol/L)的Phi处理人结肠癌LS180细胞,MTT法检测24、48和72 h时的细胞活力。将LS180细胞分为对照组、Phi-L(5µmol/L Phi)组、Phi-M(10µmol/L Phi)组、Phi-H(20µmol/L Phi)组、Phi-H+YAP抑制剂维替泊芬(VP)组(20µmol/L Phi+5µmol/LVP),各组均处理24 h。EdU法检测Phi对各组细胞增殖的影响,划痕愈合实验、Transwell小室法分别检测Phi对细胞迁移和侵袭的影响,免疫荧光法和WB法检测Phi对细胞Ki-67表达率和LATS1、YAP和p-YAP、MMP-2、MMP-9、E-cadherin、N-cadherin表达的影响。构建LS180细胞移植瘤裸鼠模型,观察Phi对移植瘤体积和质量的影响,免疫荧光法和WB法检测移植瘤组织中Ki-67表达率和LATS1、YAP和p-YAP蛋白的表达水平。结果:与对照组比较,Phi-L、Phi-M和Phi-H组LS180细胞EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、Ki-67阳性率、MMP-2、MMP-9、N-cadherin表达均显著降低(均P<0.05),E-cadherin、LATS1和p-YAP/YAP表达均显著升高(均P<0.05);同时使用VP则部分逆转了Phi对LS180细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用(均P<0.05)。Phi显著抑制裸鼠移植瘤生长,与对照组比较,Phi组裸鼠移植瘤体积、质量和Ki-67阳性率均显著降低(均P<0.05),LATS1和p-YAP/YAP水平均显著升高(均P<0.05)。结论:Phi可能通过激活Hippo/YAP信号通路抑制结肠癌LS180细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 连翘苷 Hippo/Yes信号通路 结直肠癌 ls180细胞 增殖 迁移 侵袭 小鼠模型
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三氧化二砷对人大肠癌ls174细胞凋亡及相关耐药蛋白基因表达的影响 被引量:6
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作者 白玉贤 易继林 隋红 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期574-576,584,共4页
目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人大肠癌ls174细胞相关耐药蛋白基因表达的影响。方法:确定三氧化二砷(As2O3)对人大肠癌ls174细胞的非细胞毒剂量,分别采用生化方法及RT-PCR方法检测非细胞毒剂量下As2O3对人大肠癌ls174细胞MRP、GST-π、T... 目的:探讨三氧化二砷(As2O3)对人大肠癌ls174细胞相关耐药蛋白基因表达的影响。方法:确定三氧化二砷(As2O3)对人大肠癌ls174细胞的非细胞毒剂量,分别采用生化方法及RT-PCR方法检测非细胞毒剂量下As2O3对人大肠癌ls174细胞MRP、GST-π、TOPO-Ⅱ表达水平的变化。结果:As2O3的非细胞毒性剂量(生长率>95%)为4.0μg/ml。以此为逆转耐药剂量可使人大肠癌ls174细胞,MRP、GST-π、TOPO-ⅡmRNA表达水平下调。结论:As2O3可部分逆转人大肠癌ls174细胞对5-氟尿嘧啶的耐药性,MRP、GST-π、TOPO-Ⅱ改变参与人大肠癌耐药机制。 展开更多
关键词 三氧化二砷 人大肠癌ls174细胞 耐药蛋白
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藤龙补中汤对结肠癌细胞LS174T增殖和凋亡的影响 被引量:19
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作者 胡兵 安红梅 +1 位作者 沈克平 杜琴 《中西医结合学报》 CAS 2010年第6期575-580,共6页
目的:观察藤龙补中汤对结肠癌细胞LS174T增殖和凋亡的影响。方法:用不同浓度藤龙补中汤处理人结肠癌细胞LS174T和人结肠上皮细胞CRL-1790。用细胞计数检测试剂盒检测细胞增殖,平板法检测细胞克隆形成数目并计算抑制率,流式细胞术检测细... 目的:观察藤龙补中汤对结肠癌细胞LS174T增殖和凋亡的影响。方法:用不同浓度藤龙补中汤处理人结肠癌细胞LS174T和人结肠上皮细胞CRL-1790。用细胞计数检测试剂盒检测细胞增殖,平板法检测细胞克隆形成数目并计算抑制率,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,比色法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)、caspase-8和caspase-9的活性。结果:与对照组比较,藤龙补中汤对人结肠上皮细胞CRL-1790增殖无明显影响;1mg/mL藤龙补中汤作用72h,2mg/mL藤龙补中汤作用48、72h,5~20mg/mL藤龙补中汤作用24~72h均可显著抑制LS174T细胞增殖;1~20mg/mL藤龙补中汤可显著抑制LS174T细胞克隆形成;5~20mg/mL藤龙补中汤可诱导LS174T细胞凋亡,使LS174T细胞阻滞在G0/G1期,增强LS174T细胞caspase-3、caspase-8和caspase-9活性。结论:藤龙补中汤可抑制结肠癌LS174T细胞增殖,阻滞LS174T细胞于G0/G1期,促进LS174T细胞凋亡;藤龙补中汤促LS174T细胞凋亡作用可能与增加caspase-3、caspase-8、caspase-9活性相关。 展开更多
关键词 结肠癌 方剂 细胞增殖 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶 体外研究 ls174T细胞
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Ascl2 RNA干扰对结肠癌LS174T细胞EMT相关microRNA表达的影响 被引量:5
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作者 朱蓉 田音 汪荣泉 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第36期4361-4363,4367,共4页
目的探讨转录因子Ascl2对结肠癌细胞上皮间质转化(EMT)相关的微小RNA(microRNA)的影响。方法对结肠癌LS174T细胞进行Ascl2的RNA干扰质粒转染,对照质粒shRNA-control/EGFP和干扰质粒shRNA-Ascl2/EGFP转染LS174T细胞,经G418筛选建立了稳... 目的探讨转录因子Ascl2对结肠癌细胞上皮间质转化(EMT)相关的微小RNA(microRNA)的影响。方法对结肠癌LS174T细胞进行Ascl2的RNA干扰质粒转染,对照质粒shRNA-control/EGFP和干扰质粒shRNA-Ascl2/EGFP转染LS174T细胞,经G418筛选建立了稳定转染的细胞系,并分别命名为shRNA-Ctr/LS174T和shRNA-Ascl2/LS174T细胞,实时荧光定量PCR(real-time PCR)和蛋白印迹(Western-blot)实验确定干扰效果后,采用Transwell小室侵袭实验观察Ascl2干扰对细胞侵袭能力的影响,再进一步行microRNA芯片筛选与EMT相关的microRNA并行real-time PCR验证。结果干扰后细胞中Ascl2的mRNA和蛋白质表达均明显减少(P<0.01)。Ascl2干扰后LS174T细胞的侵袭能力明显下降(P<0.01)。microRNA芯片筛选出与EMT相关的microRNA-200家族(包括microRNA-200b、microRNA-200a、microRNA-429、microRNA-200c、microRNA-141)在Ascl2干扰后均出现2倍以上的上调(P<0.01)。结论 Ascl2可能通过转录调节microR-200家族,进而调控EMT从而影响结肠癌的浸润转移。 展开更多
关键词 转录因子Ascl2 微RNAS 上皮间质转化 结肠肿瘤 ls174T细胞
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Doxycycline抑制大肠癌LS174T细胞侵袭的体外实验研究 被引量:3
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作者 徐海涛 杜杰 董新舒 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期625-628,共4页
目的:观察多西环素(Doxycycline)在体外对LS174T侵袭能力的抑制作用,并尝试探讨该抑制作用的分子机制。方法:1)MTT法观察Doxycycline对LS174T细胞粘附力的影响;Transwell小室法检测不同浓度Doxycycline对细胞侵袭和运动能力的抑制作用;2... 目的:观察多西环素(Doxycycline)在体外对LS174T侵袭能力的抑制作用,并尝试探讨该抑制作用的分子机制。方法:1)MTT法观察Doxycycline对LS174T细胞粘附力的影响;Transwell小室法检测不同浓度Doxycycline对细胞侵袭和运动能力的抑制作用;2)RT-PCR法检测不同浓度Doxycycline作用48h后,MMP2的mRNA表达情况,同时明胶酶谱法检测MMP2分泌。结果:1)Doxycycline能够以剂量依赖方式抑制大肠癌LS174T细胞的体外运动和侵袭能力,但不影响其粘附能力;2)Doxycycline能够抑制LS174T细胞MMP2的mRNA表达。结论:Doxycycline在体外能够有效地抑制大肠癌LS174T细胞的侵袭、转移,其中MMP2是抑制大肠癌细胞LS174T的一个有效靶点。 展开更多
关键词 大肠癌ls174T细胞 DOXYCYCLINE 侵袭 转移 金属蛋白酶
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过量氟对体外培养LS8细胞中炎症因子表达的影响 被引量:1
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作者 寇明清 马志军 +1 位作者 李珏丹 阮建平 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第3期335-338,共4页
目的观察过量氟对小鼠成釉细胞样细胞(LS8细胞)中炎症因子表达的影响。方法取对数生长期LS8细胞进行培养,待细胞密度达到70%-80%时,加入含有2 mmol/L NaF的培养基分别培养0,12,24,48 h,收集细胞,qRT-PCR检测白细胞介素1β(interleukin 1... 目的观察过量氟对小鼠成釉细胞样细胞(LS8细胞)中炎症因子表达的影响。方法取对数生长期LS8细胞进行培养,待细胞密度达到70%-80%时,加入含有2 mmol/L NaF的培养基分别培养0,12,24,48 h,收集细胞,qRT-PCR检测白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)mRNA水平。另外,加入含有2 mmol/L NaF的培养基分别培养0,8,15,30,60,120 min,收集细胞,Western blotting检测p-P38、P38蛋白表达。结果NaF干预体外培养的LS8细胞后,IL-1β、TNF-α在培养24,48 h时,IL-6在培养48 h时,及NF-κB在培养12,24 h时mRNA表达均显著增加(P<0.05)。NaF干预LS8细胞30,60,120 min后,P38磷酸化显著增加(P<0.05)。结论过量氟可导致LS8细胞炎症反应发生,NF-κB及p38信号通路可能参与其中。 展开更多
关键词 氟牙症 氟化物 ls8细胞 炎症
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醋酸甲羟孕酮对人结肠癌LS174T细胞体内生长抑制的作用 被引量:1
7
作者 王伟军 王强 +3 位作者 张伟 屠小卿 张玲珍 范列英 《实用癌症杂志》 2005年第3期242-245,共4页
目的检测醋酸甲羟孕酮(MPA)对人结肠癌细胞LS174T移植瘤生长的抑制作用并初步分析其机制。方法建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机分为3组,每组10只,对照组:静脉注射或以同等容量的生理盐水灌胃;处理组分为MPA治疗组和MPA+5-Fu治疗组... 目的检测醋酸甲羟孕酮(MPA)对人结肠癌细胞LS174T移植瘤生长的抑制作用并初步分析其机制。方法建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机分为3组,每组10只,对照组:静脉注射或以同等容量的生理盐水灌胃;处理组分为MPA治疗组和MPA+5-Fu治疗组,MPA治疗组:每只每次灌胃MPA30mg/kg;MPA+5-Fu治疗组:每只每次静脉注射5-Fu30mg/kg;每只每次MPA30mg/kg灌胃,MPA灌胃每周5次,5-Fu静脉注射每周3次,共用3周。5周后处死动物,切除瘤灶、称瘤重、测瘤体积、计算抑瘤率;标本用流式细胞仪分析移植瘤细胞周期、凋亡率和细胞表面Fas/FasL表达;免疫组织化学SABC法检测移植瘤组织Fas/Fas-L表达。结果对照组、MPA治疗组、MPA+5-Fu合用组肿瘤体积分别为(1.65±0.68)cm3、(0.78±0.31)cm3、(0.23±0.12)cm3;抑瘤率分别为0、52.7%、86.1%。流式细胞仪分析细胞周期,移植瘤LS174T细胞经MPA处理后阻止G1期细胞向S期的进程,S期和G2/M期细胞相对减少,MPA+5-Fu合用组作用更明显。对照组、MPA治疗组、MPA+5-Fu合用组细胞凋亡率分别为3.6%、13.7%、28.6%,MPA作用后移植瘤LS174T细胞表面Fas和FasL表达显著增强。结论MPA对人结肠癌移植瘤LS174T细胞生长具有显著的抑制作用和诱导凋亡作用,其机制可能与MPA使LS174T细胞停滞于G1期及细胞表面Fas和FasL表达上调有关。 展开更多
关键词 醋酸甲羟孕酮 结肠癌 ls174T细胞 细胞周期 凋亡 FAS/FASL系统
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三氧化二砷诱导结肠癌LS-174T细胞凋亡及其抑制增殖作用 被引量:1
8
作者 陈红兵 葛海燕 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第18期1682-1683,共2页
关键词 三氧化二砷 结肠腺癌 ls—174T细胞 凋亡
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L-精氨酸经一氧化氮途径对人结肠癌细胞株LS174的增殖及iNOS表达和细胞周期的影响 被引量:1
9
作者 霍雄伟 高燕凤 +1 位作者 马清涌 孙学军 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2009年第11期880-885,共6页
目的探讨L-精氨酸经一氧化氮(NO)途径对人结肠癌细胞株LS174的增殖及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和细胞周期的影响。方法LS174细胞经不同浓度L-精氨酸干预后,采用MTT法检测细胞增殖活性,硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO的含量,流式... 目的探讨L-精氨酸经一氧化氮(NO)途径对人结肠癌细胞株LS174的增殖及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达和细胞周期的影响。方法LS174细胞经不同浓度L-精氨酸干预后,采用MTT法检测细胞增殖活性,硝酸还原酶法检测细胞培养液中NO的含量,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot和免疫细胞化学染色SP法检测iNOS蛋白的表达。结果低浓度(0.125mmol/L)的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有促进作用,高浓度(0.5、2、8及32mmol/L)的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有抑制作用;培养液中的NO浓度伴随L-精氨酸浓度的增加而升高;与对照组相比,高浓度(0.5、2、8及32mmol/L)L-精氨酸处理48h后S期细胞比例增加(P<0.05,P<0.01),低浓度(0.125mmol/L)者差异则无统计学意义(P>0.05);随着L-精氨酸浓度的增加,iNOS蛋白的表达较对照组有增高趋势,浓度越高,效果越明显。结论L-精氨酸通过诱导iNOS的表达,可提高NO的生成;低浓度的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有促进作用,高浓度的L-精氨酸对LS174细胞的增殖有抑制作用;高浓度的L-精氨酸诱导细胞周期停滞于S期。 展开更多
关键词 L-精氨酸 一氧化氮 诱导型一氧化氮合酶 细胞周期 人结肠癌细胞ls174 细胞增殖
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外源性PTEN基因稳定转染对大肠癌LS1747细胞周期及凋亡的影响
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作者 张阳德 何剪太 陈辉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2002年第24期1-4,共4页
目的 :研究外源性基因PTEN对人类大肠癌LS174 7细胞周期及凋亡的影响。方法 :以携带有PTEN基因的真核表达载体体外转染人类大肠腺癌细胞LS174 7,筛选阳性克隆的细胞并扩增培养 ,鉴定转染成功后采用流式细胞仪、透射电镜、DNA琼脂糖电泳 ... 目的 :研究外源性基因PTEN对人类大肠癌LS174 7细胞周期及凋亡的影响。方法 :以携带有PTEN基因的真核表达载体体外转染人类大肠腺癌细胞LS174 7,筛选阳性克隆的细胞并扩增培养 ,鉴定转染成功后采用流式细胞仪、透射电镜、DNA琼脂糖电泳 ,检测转染PTEN基因后LS174 7细胞的凋亡以及观察三种细胞生长曲线。结果 :流式细胞仪显示 ,细胞周期从G1期到S期发生抑制 ,并在G1期峰前出现 1个明显的凋亡峰。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现。细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞特有的“梯状”条带。转染空载体及未转染的LS174 7细胞未见凋亡表现。转染PTEN的LS174 7细胞与空白质粒载体转染的LS174 7细胞和LS174 7细胞的生长速度相比 ,后两者生长速度较快。结论 :将外源性PTEN基因导入LS174 7细胞后 ,可以抑制细胞周期 ,并可诱导细胞凋亡 ,这可能是PTEN基因抑制大肠癌细胞增殖的重要机制之一。 展开更多
关键词 大肠癌 ls1747细胞周期 基因转染 细胞凋亡 抑癌基因 外源性PTEN基因
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大麻提取物对人结肠癌细胞LS174T体内外抑制及诱导凋亡作用
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作者 毕志彬 胡文庆 +1 位作者 赵曙 赵睿 《长治医学院学报》 2011年第3期168-171,共4页
目的:研究大麻提取物在体内外对人结肠癌细胞LS174T的生长抑制及诱导凋亡作用。方法:体外培养结肠癌细胞,加以不同浓度(500,250,125,62.5,31.25μg/mL)的大麻提取物培养72 h,用MTT法检测大麻提取物对结肠癌细胞抗增殖的作用;用DNA末端... 目的:研究大麻提取物在体内外对人结肠癌细胞LS174T的生长抑制及诱导凋亡作用。方法:体外培养结肠癌细胞,加以不同浓度(500,250,125,62.5,31.25μg/mL)的大麻提取物培养72 h,用MTT法检测大麻提取物对结肠癌细胞抗增殖的作用;用DNA末端原位标记染(TUNEL)法检测大麻提取物对结肠癌细胞的诱导凋亡作用;建立结肠癌小鼠模型,将实验动物随机分为五组:空白对照组、阳性药物组、低剂量组(25 mg/kg)、中剂量组(50 mg/kg)、高剂量组(100 mg/kg),每组5只小鼠,2周后处死动物测定肿瘤的重量和体积。结果:不同浓度的大麻提取物处理细胞72 h后,结肠癌细胞的抑制率分别为(93.12±2.66)%(、74.56±4.62)%(、62.37±3.77)%(、36.84±6.24)%(、19.16±4.24)%,各组间抑制率相比,差异有统计学意义(P<0.05);用TUNEL法可检测到典型的结肠癌细胞凋亡形态;在结肠癌小鼠模型上给药组肿瘤生长被抑制,其肿瘤体积、重量均较对照组减小,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:大麻提取物在体内外具有抑制结肠癌细胞LS174T增殖及诱导凋亡的作用,且呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 大麻提取物 抗肿瘤药物 人结肠癌细胞ls174T 抗增殖 凋亡
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氟对体外培养LS8细胞增殖、氧化应激与凋亡的作用研究 被引量:2
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作者 李珏丹 崔敏 +3 位作者 许莹 郭晶 阮建平 程政 《中国美容医学》 CAS 2019年第9期89-92,共4页
目的:观察氟化物对小鼠成釉细胞样细胞(LS8细胞)增殖、氧化应激以及凋亡的影响。方法:取对数生长期的LS8细胞,在培养液中分别加入终浓度为0、0.5、1、2、4和8mM的氟化钠(NaF)溶液,培养24h和48h后,CCK-8检测细胞增殖;倒置显微镜观察细胞... 目的:观察氟化物对小鼠成釉细胞样细胞(LS8细胞)增殖、氧化应激以及凋亡的影响。方法:取对数生长期的LS8细胞,在培养液中分别加入终浓度为0、0.5、1、2、4和8mM的氟化钠(NaF)溶液,培养24h和48h后,CCK-8检测细胞增殖;倒置显微镜观察细胞形态;生化方法检测细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;qRT-PCR检测过氧化氢酶(Cat)、谷胱甘肽过氧化物酶1(Gpx-1)和谷胱甘肽S转移酶(Gst)mRNA水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting检测caspase-9和caspase-3蛋白表达改变。结果:过量氟抑制LS8细胞增殖,且随着NaF浓度增加,细胞增殖呈下降趋势;过量氟显著增加LS8细胞内MDA含量,降低SOD活性及Gpx-1、GstmRNA表达水平;过量氟引起LS8细胞形态改变和细胞凋亡,且伴随着caspase-9,caspase-3表达的显著增加。结论:过量氟抑制LS8细胞增殖,扰乱细胞的氧化与抗氧化平衡并诱发氧化应激,持续的氧化应激最终导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 氟化物 ls8细胞 增殖 氧化应激 凋亡
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不同母乳低聚糖对肠道LS174T杯状细胞黏蛋白分泌相关基因表达的影响 被引量:1
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作者 许文君 姚倩倩 +3 位作者 高亚男 郑楠 韩荣伟 王加启 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第22期7438-7445,共8页
目的分析不同母乳低聚糖对肠道LS174T杯状细胞黏蛋白分泌相关基因表达的影响。方法以人肠道LS174T细胞为研究对象,将2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose,2’-FL)、3’-唾液酸乳糖(3’-sialyllactose,3’-SL)和低聚半乳糖(galactooligo... 目的分析不同母乳低聚糖对肠道LS174T杯状细胞黏蛋白分泌相关基因表达的影响。方法以人肠道LS174T细胞为研究对象,将2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose,2’-FL)、3’-唾液酸乳糖(3’-sialyllactose,3’-SL)和低聚半乳糖(galactooligosaccharide,GOS)3种低聚糖和乳糖对细胞的作用时间分成24 h组和48 h组,分别在细胞稳态和细胞炎症状态下,以黏蛋白2(mucin 2,MUC2)及其相关基因[三叶因子-3(trefoil factor 3,TFF3)、抵抗素样蛋白B(recombinant resistinlike beta,RETNLB)、碳水化合物磺基转移酶5(carbohydrate sulfotransferase 5,CHST5)、半乳糖-3-O-磺基转移酶2(galactose-3-O-sulfotransferase 2,GAL3ST2)]的表达水平为评价指标,通过实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)试验确定影响肠道LS174T杯状细胞黏蛋白分泌相关基因表达的母乳低聚糖。结果在正常状态下,GOS作用后,MUC2及黏蛋白分泌相关基因表达量无显著变化(P>0.05);作用48 h时,3’-SL可显著提高RETNLB基因表达量(P<0.05);在炎症状态下,2’-FL和GOS可极显著促进MUC2、CHST5和TFF3的表达(P<0.01),表明在炎症状态下,2’-FL和GOS可促进杯状细胞分泌黏蛋白。结论在细胞炎症状态下,2’-FL和GOS可提高肠道LS174T杯状细胞黏蛋白分泌相关基因的表达量。 展开更多
关键词 母乳低聚糖 ls174T杯状细胞 2’-岩藻糖基乳糖 3’-唾液酸乳糖 低聚半乳糖 黏蛋白2 黏蛋白分泌相关基因
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人结肠癌细胞裸鼠肝转移模型及其血中CK20 mRNA表达的研究 被引量:7
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作者 陆飞 沈洪薰 +3 位作者 陈瑞新 钱晶晶 陈莉 陈玉泉 《南通医学院学报》 2002年第1期22-23,26,共3页
目的 :建立人结肠癌裸鼠肝转移模型 ,检测血中 CK2 0 m RNA表达 ,应用于结肠癌肝转移的防治研究。方法 :BAL B/ C裸鼠 12只 ,腹腔内注射戊巴比妥钠麻醉 ,经脾脏注入指数生长期的人结肠癌低分化腺癌细胞悬液( L S174 t) 0 .1m l,含细胞数... 目的 :建立人结肠癌裸鼠肝转移模型 ,检测血中 CK2 0 m RNA表达 ,应用于结肠癌肝转移的防治研究。方法 :BAL B/ C裸鼠 12只 ,腹腔内注射戊巴比妥钠麻醉 ,经脾脏注入指数生长期的人结肠癌低分化腺癌细胞悬液( L S174 t) 0 .1m l,含细胞数 1× 10 6 个 ,切除脾脏 ,喂养 2 0天后 ,建立人结肠癌裸鼠肝转移模型。随后 ,心脏采血检测血中 CK2 0 m RNA表达 ,处死裸鼠观察腹腔内肿瘤生长和肝转移癌灶数目及大小 ,作病理组织学检查。采用巢式逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)法 ,检测裸鼠血中 CK2 0 m RNA表达。结果 :12只裸鼠均建立人结肠癌裸鼠肝转移模型 ,无1只死亡。初期活跃如常体形无改变 ,10天后裸鼠出现消瘦、精神差 ,摄食量减少。裸鼠尸解肝脏表面均有灰白色转移癌结节形成 ,其它脏器未发现转移癌灶。病理组织学示肝转移癌灶具有人结肠癌低分化腺癌特征。血中 CK2 0 m RNA均阳性表达。结论 :经脾脏注入 L S174 t细胞悬液可建立人结肠癌裸鼠肝转移模型 ,裸鼠血中 CK2 0 m RNA阳性表达 ,证实血中存在着结肠癌细胞 ,是形成肝转移灶的条件。 展开更多
关键词 ls174t细胞 肝转移 裸鼠 CK20MRNA 巢式逆转录聚合酶链反应 结肠癌
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Expression of EJ-Ras in Embryonic Stem Cells (ES-5) and its Effects on the Characteristics of ES-5 Cells
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作者 高健刚 何维 +2 位作者 李秀玲 丛笑倩 姚鑫 《Developmental and Reproductive Biology》 1996年第2期9-10,T001-T002,共4页
Embryonic stem cells (ES-5) were transfected with PSV 2-neo-EJ-Ras and the cell colonies were chosen in the selection medium containing Geneticin. Southern-blot analysis showed that all the transfected cells possessed... Embryonic stem cells (ES-5) were transfected with PSV 2-neo-EJ-Ras and the cell colonies were chosen in the selection medium containing Geneticin. Southern-blot analysis showed that all the transfected cells possessed the whole EJ-Ras DNA. Northern-blot analysis demonstrated that the selected clones express higher level of Ras mRNA than the control. When the transfected ES-5 cells were injected into the flanks of nude mice, they formed bigger tumors and more stem cell nests were found. The chimeric ability of the transfected ES-5 cells decreased when the cells were injected into the blastocysts which were then transferred back into the uterine of foster mother. We propose that the over-expression of EJ-Ras in ES-5 cells increase the proliferation ability but decreases the chimeric potential of cell. 展开更多
关键词 Embryonic stem cell ONCOGENES TRANSFECTION Proliferation ability Chimeric potential.
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Inhibitory effects of docetaxel on expression of VEGF, bFGF and MMPs of LS174T cell 被引量:6
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作者 Xue-LiangGuo Geng-JinLin +6 位作者 HongZhao YangGao U-PingQian San-RongXu Li-NaFu Qingxu Jie-JunWang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2003年第9期1995-1998,共4页
AIM: To study the effects of non-cytotoxJc concentrations of docetaxel on some important angiogenic factors of LS174T Cells.METHODS: The non-cytotoxic concentration of docetaxel and the activity of gelatinase were det... AIM: To study the effects of non-cytotoxJc concentrations of docetaxel on some important angiogenic factors of LS174T Cells.METHODS: The non-cytotoxic concentration of docetaxel and the activity of gelatinase were determined with MTT and gelatin zymography respectively, the expression of VEGF (vascular endothelial growth factor), bFGF (basic fibroblast growth factor), MMP (matrix metalloproteinase) 2 and MMP 9 was investigated with RT-PCR and Western blot.RESULTS: The maximum non-cytotoxic concentration of docetaxel on LS174T Cells was 1.0 ng/ml. Compared with the solvent control group, 0.1, 0.5, 1.0 ng/ml of docetaxel could downregulate the expression of VEGF, bFGF, MMP 2and MMP 9 and suppress the activity of gelatinase.CONCLUSION: Our study suggests that the non-cytotoxic concentrations of docetaxel have strong antiangiogenic activity on LS174T Cells, which suggests docetaxel may be a promising antiangiogenic agent. 展开更多
关键词 ls174T细胞 结肠直肠癌 血管内皮生长因子 碱性纤维生长因子 基质金属蛋白酶 逆转录聚合酶链反应
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促肾上腺皮质激素释放因子对肠道杯状细胞分泌产物的影响 被引量:1
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作者 李霞 李理想 +3 位作者 李铭 陈飞雪 左秀丽 李延青 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第4期44-49,共6页
目的探讨促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)对肠道杯状细胞分泌产物的影响。方法首先用不同浓度的CRF作用于LS174T细胞以确定最佳作用浓度;用10^(-10)mol/L的CRF作用于LS174T细胞,利用Real-time q PCR、Western blotting、免疫荧光染色和EL... 目的探讨促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)对肠道杯状细胞分泌产物的影响。方法首先用不同浓度的CRF作用于LS174T细胞以确定最佳作用浓度;用10^(-10)mol/L的CRF作用于LS174T细胞,利用Real-time q PCR、Western blotting、免疫荧光染色和ELISA技术对肠道杯状细胞分泌产物的表达量进行检测。结果 Realtime q PCR结果显示,与PBS对照组相比,CRF作用6 h后,黏蛋白2(M UC2),岩藻糖基转移酶-2(FUT2)和三叶因子-3(TFF3)的mRNA表达量均下降(P<0.05)。细胞免疫荧光和ELISA的结果显示,CRF作用6 h后,MUC2的蛋白表达量降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,CRF作用24 h后,FUT2和TFF3的蛋白表达水平均下降(P<0.05)。结论 CRF可以通过改变LS174T细胞分泌产物的表达,从而破坏肠黏膜屏障功能。 展开更多
关键词 促肾上腺皮质激素释放因子 肠黏膜屏障 ls174T细胞
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槲皮素对结肠癌细胞侵袭和畸胎瘤衍生生长因子-1表达的影响 被引量:2
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作者 魏金文 范钰 +2 位作者 张尤历 钟锡明 王崇强 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期573-574,共2页
槲皮素(quercetin)是一种天然的黄酮类化合物,广泛分布于蔬菜、水果及常见中草药中。已有研究发现,槲皮素可抑制多种肿瘤细胞的增殖,是颇具应用前景的抗癌药物之一,但机制尚不清楚。本研究采用槲皮素处理结肠癌LS174T细胞。观察... 槲皮素(quercetin)是一种天然的黄酮类化合物,广泛分布于蔬菜、水果及常见中草药中。已有研究发现,槲皮素可抑制多种肿瘤细胞的增殖,是颇具应用前景的抗癌药物之一,但机制尚不清楚。本研究采用槲皮素处理结肠癌LS174T细胞。观察其对癌细胞锚着不依赖性增殖、侵袭和畸胎瘤衍生生长因子1(teratocarcinoma—derived growth factor-1,TDGF-1)基因表达的影响,以探讨其抗癌机制。 展开更多
关键词 细胞侵袭 槲皮素 生长因子-1 畸胎瘤 结肠癌 ls174T细胞 黄酮类化合物 衍生生长因子
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腺病毒驱动KDR启动子介导CD/TK融合基因系统对血管内皮细胞的靶向杀伤作用 被引量:1
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作者 苏国强 黄宗海 +4 位作者 俞金龙 厉周 范应方 宋慧娟 张进华 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期190-193,共4页
目的 探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的融合基因体系,对人脐血管内皮细胞ECV30 4的选择性杀伤作用。方法 将质粒pAdEasy -KDR- CDglyTK在2 93细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的ECV30 4细胞株和不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同... 目的 探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的融合基因体系,对人脐血管内皮细胞ECV30 4的选择性杀伤作用。方法 将质粒pAdEasy -KDR- CDglyTK在2 93细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的ECV30 4细胞株和不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药5 - 氟胞嘧啶(5 -fuorocytosine ,5 -FC)和/或丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV) ,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应;并以流式细胞仪检测细胞周期的变化,电镜观察细胞的病变。结果 所得病毒对两种细胞细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加;表达KDR的ECV30 4细胞对前药的具有较高的敏感性,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P均<0 . 0 1) ;融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P均<0 . 0 1) ;且观察到该体系明显的旁观者效应。流式细胞术检测治疗后ECV30 4细胞G1期比率增多及S期细胞减少(P均<0 . 0 1) ,同时,电镜下可见ECV30 4有凋亡和坏死改变。结论 KDR基因启动子可调控融合基因体系选择性杀伤人血管内皮细胞。 展开更多
关键词 KDR启动子 靶向杀伤作用 基因系统 驱动 ECV304细胞 ls174T细胞 选择性杀伤作用 流式细胞仪检测 流式细胞术检测 人血管内皮细胞 旁观者效应 CD 5-氟胞嘧啶 基因体系 腺病毒介导 293细胞 基因启动子 体外感染 不同浓度 丙氧鸟苷 杀伤效应 细胞周期 电镜观察
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miR-23a/PTEN轴在结直肠癌发生发展中的作用机制 被引量:2
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作者 朱锋锋 邓帅 徐峰 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2021年第6期603-607,共5页
目的分析微小RNA-23a(miR-23a)与磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)调控轴在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)LS513细胞中的表达情况,并探讨二者对CRC发生发展的影响。方法将LS513细胞分为空白对照组(NG组,细胞不做特殊处理)、阴性对照... 目的分析微小RNA-23a(miR-23a)与磷酸酶及张力蛋白同源物基因(PTEN)调控轴在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)LS513细胞中的表达情况,并探讨二者对CRC发生发展的影响。方法将LS513细胞分为空白对照组(NG组,细胞不做特殊处理)、阴性对照组(NC组,加入5μl Lipofectamine3000和50 pmol/μl NC)、抑制miR-23a表达组(miR-23a-inhibitor组,转染miR-23a-inhibitor序列)。采用实时荧光定量PCR法检测LS513细胞miR-23a、PTEN mRNA水平;MTT法检测LS513细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;蛋白质印迹法检测增殖、迁移侵袭及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路相关蛋白水平变化。结果与NG组、NC组比较,miR-23a-inhibitor组LS513细胞中miR-23a水平显著降低(P<0.05),PTEN mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。MTT法检测结果显示与NG组、NC组比较,miR-23a-inhibitor组增殖抑制率显著升高[(16.62±3.21)%vs(16.65±3.26)%vs(47.55±13.61)%](P<0.05),PCNA蛋白表达显著降低(P<0.05)。与NG组、NC组比较,miR-23a-inhibitor组LS513细胞迁移数[(287.25±58.32)vs(285.37±58.43)vs(136.87±36.53)]、侵袭数[(242.53±50.95)vs(239.87±50.62)vs(103.77±30.06)]均显著减少(P<0.05),且MMP-9、E-cadlerin蛋白表达显著降低(P<0.05)。与NG组、NC组比较,miR-23a-inhibitor组LS513细胞中p-PI3K/PI3K、p-ATK/ATK蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论抑制miR-23a表达可能上调PTEN基因表达抑制PI3K/Akt通路活化,进而抑制LS513细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 结直肠癌 微小RNA-23a 磷酸酶及张力蛋白同源物基因 ls513细胞 增殖 迁移
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