LSD1抑制剂抑制非小细胞肺癌A549细胞侵袭、迁移及上皮间质转化

目的:探究赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1(lysine-specific demethylase 1,LSD1)抑制剂对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)A549细胞侵袭、迁移及上皮间质转化的影响。方法:将体外培养的人非小细胞肺癌A549细胞分为对照组和LSD1抑制剂组,在细胞进入对数生长期时,向实验组细胞中分别加入不同浓度的LSD1抑制剂,培养24 h。CCK-8法用于细胞增殖检测,划痕实验用于细胞迁移检测,Transwell小室法用于细胞侵袭检测,裂解细胞提取总蛋白后通过蛋白质免疫印迹技术(Western blot,WB)检测A549细胞中上皮细胞标志物E型钙黏蛋白(E-cadherin)、间充质细胞标志物N型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平。结果:与对照组相比,LSD1抑制剂组细胞增殖率、穿膜细胞数和划痕愈合率显著降低(P<0.05);LSD1抑制剂组相较于对照组,E-cadherin表达量升高,N-cadherin和Vimentin的表达量均降低(P<0.05)。结论:LSD1抑制剂可抑制非小细胞肺癌A549细胞的侵袭、迁移及上皮间质转化。

LSD1抑制剂对前列腺癌细胞体外生物学行为的调控

目的研究赖氨酸特异性去甲基化酶-1(lysine specific demethylase 1,LSD1)抑制剂优降宁对人雄激素非依赖性前列腺癌细胞增殖、迁移以及上皮间质转化等体外生物学行为的影响。方法分别用不同浓度的优降宁(0、1、3 mmol/L)处理肿瘤细胞0~72 h,使用CCK8法检测细胞存活率。选用0、3 mmol/L优降宁处理48 h,用流式细胞仪检测比较细胞的凋亡以及细胞周期分布情况,用划痕实验及Transwell小室迁移实验比较细胞的运动能力,用Western-blot实验比较上皮间质转化过程中的关键基因的蛋白表达差异,最终用RT-q PCR进一步验证m RNA水平的变化,以阐明LSD1抑制剂优降宁对前列腺癌细胞的影响。结果 1、3 mmol/L的优降宁均能够显著降低DU145细胞的存活率以及集落形成数,以3 mmol/L剂量处理细胞48 h最为显著。3 mmol/L优降宁处理48 h后能显著增加前列腺癌细胞的凋亡率,使得停留在G2期的细胞明显增加。处理组划痕愈合速率明显减慢,相同时间穿过小室的细胞数明显减少。蛋白水平和m RNA水平结果一致表明上皮间质转化过程受到显著抑制。结论 LSD1抑制剂能够通过促进细胞凋亡、阻滞细胞周期显著抑制前列腺癌细胞的增殖,减弱肿瘤细胞的迁移运动能力,并且显著抑制肿瘤细胞上皮间质转化过程,LSD1可成为前列腺癌治疗的潜在靶点。

二苯乙烯类LSD1抑制剂的分子对接及分子动力学模拟研究

本研究基于二苯乙烯的结构活性关系,设计了10个组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)新型抑制剂.采用分子对接的方法并根据对接打分结果对得分最高的化合物进行分子动力学模拟,研究分析小分子和LSD1的相互作用机制,并对其进行ADME(吸收、分布、代谢和排泄)预测.分子对接和分子动力学结果显示设计的小分子与蛋白结合能力更强更稳定,ADME预测结果显示小分子具有良好的生物利用度和类药性.新设计的10个小分子可以作为LSD1抑制剂先导化合物,为新型LSD1抑制剂的研究设计提供新的方法和思路.