宿主蛋白LSm1-7复合体在登革病毒RNA复制中的作用研究

目的探讨LSm1-7复合体在登革病毒(DENV)RNA复制中的作用。方法 DENV感染HepG2细胞后,在不同时间点(2、24、36、48h)收集细胞和提取总mRNA,实时定量PCR(RT-qPCR)分析LSm1表达水平;将LSm1的siRNA和非特异对照siRNA两次转染HepG2细胞后感染DENV-2,24h后收集细胞,提取总mRNA,RT-qPCR分析LSm1表达水平与病毒RNA表达水平;利用LSm1抗体与dsRNA抗体对DENV感染细胞进行免疫荧光染色,激光共聚焦分析LSm1与dsRNA共定位情况。结果与2h比较,随着时间的推移,DENV-2 RNA和LSm1 RNA水平逐渐升高;与对照组siNC比较,siLSm1组LSm1 RNA水平明显降低,沉默效率达78.2%;与对照组siNC比较,siLSm1组DENV RNA含量降低35.6%;LSm1-7复合体在DENV感染HepG2细胞后募集到核周围,与DENV dsRNA共定位。结论 LSm1-7复合体可能作为DENV复制复合物的组成部分,正调控DENV RNA的复制。

LSm1-7复合体在病毒复制中作用的研究进展

LSm蛋白家族属于一类RNA结合蛋白,广泛存在于真核细胞生物、细菌、古菌和植物中。LSm是Sm样蛋白的缩写。1966年Sm抗原首先在系统性红斑狼疮患者中被发现,并因患者StephanieSmith而得名[1]。随后Sm蛋白复合体被发现,由SmB′/B（B和B′是异构体）、SmD1、SmD2、SmD3、SmE、SmF、SmG 7个蛋白组成,与4个snRNAs（U1、U2、U4和U5）结合形成snRNPs。