大肠杆菌热稳定肠毒素的检测分析

目的:探讨大肠杆菌热稳定肠毒素的检测方法与效果。方法:采用三种方法检测大肠杆菌的热稳定肠毒素。结果:酶联免疫吸附实验与双向琼脂扩散实验的LT检出率与实验灵敏度比乳鼠罐胃实验要高,而且酶联免疫吸附实验能同时测定十几个样品。结论:三种方法检测大肠杆菌热稳定性肠毒素,其中酶联免疫吸附实验方法特异性强、重复性好;双向琼脂扩散实验是测定LT的经典方法,敏感性较高;乳鼠实验被认为是测定ST的常规方法,但其检出不高且受很多因素制约。

猪大肠埃希菌肠毒素基因的多重PCR检测

以产肠毒素性大肠埃希菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)耐热肠毒素(STa、STb)基因和不耐热肠毒素(LT)基因保守序列为靶序列,设计合成了3对可扩增目的片段为182、108和336 bp的引物,建立了检测ETEC耐热肠毒素基因和不耐热肠毒素基因的多重PCR方法.该方法对肠出血性大肠埃希菌(EHEC)EDL933、猪链球菌Streptcoccus、鼠伤寒沙门氏杆菌Salmonella typhimrium和猪肺疫巴氏杆菌Pasteurella pneumotropic的检测结果均为阴性,并且能检测到102cfu/mL稀释度的标准菌.对11株分离自广东佛山地区腹泻仔猪的待检菌株进行检测,结果为:含STa基因的菌株为5株;含STb基因为2株;含LT基因为3株,其中2株同时具有STb和LT基因.结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查.

山东省部分ETEC肠毒素与质粒图谱分析

产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是常见的腹泻病原菌之一,有关其致病性、毒力等方面已有一些文献报道。ETEC不耐热肠毒素(LT)的产生受质粒控制,目前测定LT肠毒素的主要方法是平板免疫溶血试验和LT基因DNA—DNA分子杂交试验。为了解ETEC质粒携带情况与其平板免疫溶血试验结果的关系。

猪大肠杆菌不耐热肠毒素基因的PCR检测

以产肠毒素性大肠埃希氏菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)保守序列为靶序列,设计合成了一对可扩增336 bp目的片段的引物,建立了检测ETEC不耐热肠毒素(LT)基因的PCR方法。该方法对987p+、鼠伤寒沙门氏杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和链球菌的检测结果均为阴性。对15株分离自腹泻仔猪的待检菌株进行检测,有3株LT基因阳性。结果表明:该方法的特异性和敏感性较高,可用于ETEC的临床快速诊断和流行病学调查。

LAMP技术快速检测产肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素

目的:建立环介导恒温扩增快速检测肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素的方法。方法:采用环介导恒温扩增反应(LAMP)技术扩增肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素特异性基因,优化反应条件,并与传统PCR比较。结果:与传统的PCR技术相比,LAMP法更加简便快速,且在等温条件下进行,具有更高的灵敏性及特异性。结论:该方法灵敏度高,特异性强,操作简便快速,不需要复杂仪器设备,为检测产肠毒素性大肠埃希菌的LTⅠ毒素提供了一个快速简便的新方法。

LAMP技术检测食品中产肠毒素大肠埃希氏菌

产肠毒素大肠埃希氏菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一种重要的引起人畜共患病的致病菌,能引起水样便及酸中毒,建立快速、准确的检测方法对预防和控制产肠毒素大肠埃希氏菌的感染具有重要意义。基于ETEC不耐热肠毒素LT基因序列,设计LAMP引物检测产肠毒素大肠埃希氏菌。结果表明:LAMP检测产肠毒素大肠埃希氏菌的检出限为32.9cfu/mL,人工污染生猪肉的检出限为55cfu/g。LAMP将可以成为替代PCR的核酸扩增新技术,为快速检测产肠毒素大肠埃希氏菌构建了一个技术平台。

采取被动免疫措施预防仔猪黄白痢

选择妊娠母猪48头,分为试验组和对照组各24头,于分娩前20～28天,以混有仔猪黄白痢新鲜粪便的饲料免疫试验组母猪,分舍饲养,并对两纽母猪及其产后的仔猪进行临床观察。试验结果表明:试验组比对照组发病率下降11％,成活率提高4.8％,药费减少0.09元/头.本试验的意义在于可为集体化。工厂化养猪预防仔猪黄白痢提供参考。