伊犁马LTF基因多态性与产奶量相关性分析

本试验以研究伊犁马乳铁转运蛋白(lactotransferrin,LTF)基因多态性及其与泌乳性状的关系为目标,针对伊犁马LTF基因外显子和启动子设计了17对引物,以伊犁马DNA为模板,通过PCR扩增及PCR-RFLP法检测224匹伊犁马LTF基因多态性,并与其中73匹有产奶量记录的伊犁马进行关联分析,研究该基因多态性与泌乳性状之间的关系。结果显示,在伊犁马LTF基因中检测到1个SNP:c.173G>A,该SNP位点是发生在CDS区上的错义突变,致LTF编码蛋白第58位精氨酸突变为赖氨酸。与其120d日均产奶量进行关联分析,结果显示,虽然该位点不同基因型个体的日均产奶量差异并不显著(P>0.05),但可以发现各基因型的产奶量GG>GA>AA,由此可为中国乳用马的选育提供一定的参考。

胃癌细胞株MGC803中LTF基因的表达及其启动子甲基化相关性研究

目的检测胃癌细胞株MGC803内乳铁蛋白(LTF)基因的甲基化和表达情况,探讨LTF的DNA启动子区甲基化异常与其在胃癌内表达的相关性。方法用亚硫酸氢盐测序PCR方法检测MGC803启动子区甲基化状态,使用real-time PCR和Western blot分别检测LTF在MGC803内的mRNA和蛋白表达水平。同时使用去甲基化剂5-aza-CdR处理胃癌细胞株,观察给药前后的DNA甲基化状态和mRNA表达情况。结果 MGC803启动子甲基化率达59.8%,使用5-aza-CdR处理的两组(2μmol/L组和10μmol/L组)和空白对照组甲基化率差异、LTF的mRNA表达差异均有统计学意义(均P<0.05),并且随着MGC803启动子甲基化程度的下降,其mRNA和蛋白表达增加;而不同浓度药物处理组间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 LTF基因在胃癌细胞株MGC803内表现为较高甲基化状态,而且LTF的表达和其启动子区甲基化情况相关,使用去甲基化剂能逆转DNA的甲基化情况从而使其mRNA重新表达。

LTF基因在胃癌细胞株BGC823中的表达及其与启动子甲基化的相关性

目的:检测Lactotransferrin(LTF)基因在胃癌细胞株BGC823内的甲基化和表达情况,探讨LTF的DNA启动子区甲基化异常与其在胃癌内表达的相关性。方法:用亚硫酸氢盐测序PCR方法(BSP)检测BGC823启动子区甲基化状态,使用real-time PCR和Western blot法分别检测LTF基因在BGC823内的mRNA和蛋白表达水平。同时使用去甲基化剂5-aza-CdR处理胃癌细胞株,观察给药前后的DNA甲基化状态和mRNA表达情况。结果:BGC823启动子甲基化率达53.6%,使用5-aza-CdR后,药物处理的两组(药物浓度2μmol/L组和药物浓度10μmol/L组)和对照组甲基化率差异和LTF的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),并且随着BGC823启动子甲基化程度的下降,其mRNA和蛋白表达增加。而药物处理组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LTF基因在胃癌细胞株BGC823内表现为较高甲基化状态,而且LTF的表达和其启动子区甲基化情况相关,使用去甲基化剂能逆转DNA的甲基化情况从而使其mRNA重新表达。

LTF基因在多种肿瘤里的表达及机制研究

研究发现对大多数肿瘤来说,人体染色体3p21.3区域存在一群高密度分布的肿瘤抑制基因簇(TSGs),LTF基因(lactotransferrin,LTF)是位于高频缺失区(CER1)的一员。LTF的抗肿瘤机制是多种多样的,如通过调节NK细胞的活动,调节细胞G1蛋白的表达,抑制肿瘤细胞的分化,增强其凋亡。在小鼠实验中,LTF基因能抑制动物肿瘤模型中细胞的生长。研究认为LTF在鼻咽癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胃癌、恶性胶质瘤、口腔鳞癌等多种肿瘤里表达下调,是抑癌基因或者候选抑癌基因。总结多种肿瘤,LTF在肿瘤里表达下调的机制大致可分为基因水平相关和表观遗传学相关,前者包括杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)和基因突变,后者包括启动子甲基化和组蛋白去乙酰化修饰相关,本文主要介绍LTF在多种肿瘤内失活和表观遗传学机制的联系。