过度表达LYL1的髓系白血病细胞基因表达谱分析

目的检测LYL1在髓系白血病细胞中所调控的可能靶基因。方法建立过度表达LYL1的白血病稳定细胞株,应用全基因组表达芯片测定其基因表达谱。结果初步筛选出可能受LYL1调控的靶基因或EST共444个,其中表达上调335个,表达下调109个。文中列出了表达明显上调和下调的部分转录因子、原癌基因、抑癌基因、细胞因子或受体、信号转导分子及细胞凋亡相关蛋白。值得注意的是,上调基因中包括与红系分化密切相关的转录因子LMO2与GATA1和许多原癌基因,包括RAS家族成员、EHM2、Pin1、PAX8、RAF-1、GRAP-2及WNT5A等;下调基因中包括抑癌基因p53等。结论研究可能受LYL1调控的靶顺序对于解释其在髓系白血病细胞的作用有重要意义。

转录因子LMO2与LYL1在髓系白血病细胞的异常表达与相互作用

目的探讨转录因子LMO2与LYL1在髓系白血病细胞的表达、相互作用及意义。方法荧光实时定量聚合酶链反应、基因转染与免疫共沉淀实验等。结果LMO2在51．1％的未缓解急性髓系白血病（AML）患者表达增强，LYL1在62．2％的AML患者表达增强，二者共同高表达的患者比例为31．1％，表达水平有正相关性。基因转染实验显示LMO2与LYL1的表达相互激活。应用免疫共沉淀证明髓系白血病细胞中LMO2-LYL1复合物的存在。结论LMO2与LYIL1在白血病细胞的表达异常和相互作用可能是引起髓系造血细胞增殖分化异常的重要因素。

转录因子LYL1在白血病患者中的表达及作用研究

目的探讨转录因子LYL1在不同白血病患者中的表达及在白血病发病中的作用。方法应用荧光实时定量聚合酶链反应检测LYL1在不同类型白血病患者中的表达情况；应用特异性小干扰（si）RNA抑制LYL1的表达，观察LYL1表达下调对于白血病细胞系K562细胞增殖和分化能力的影响。结果与正常骨髓CD34^＋细胞相比，LYL1在多数急性髓系白血病（AML）（急性早幼粒细胞白血病除外）和急性淋巴细胞白血病（ALL）患者中都有异常高表达，AML完全缓解患者表达水平（1．400）较AML未缓解患者（9．985）明显下降（P〈0．01）；部分慢性粒细胞白血病（CML）患者的检测结果显示LYL1在CML急变期的表达（7．831）高于慢性期（1．672）（P〈0．01）。联合使用三种特异性siRNA可使K562细胞LYL1表达水平明显下调且对细胞生长和集落形成能力有一定抑制作用。结论在AML、ALL患者中均有LYL1异常表达。通过siRNA干扰抑制特定癌基因表达对于抑制白血病细胞的增殖有一定效果，在治疗恶性血液病方面具有临床应用潜力。

原癌基因LMO2在白血病细胞的表达及对细胞增殖的影响

目的检测原癌基因LMO2在各种白血病中的表达情况,观察该基因表达量的改变对白血病细胞增殖的影响,探索LMO2在白血病发病中的作用。方法荧光实时定量聚合酶链反应;Western印迹实验;基因转染建立高表达LMO2的白血病细胞株;siRNA干扰技术;细胞克隆形成实验。结果LMO2基因在很多急性髓系和淋巴系白血病患者的表达水平高于慢性白血病患者及正常骨髓细胞,但LMO2转染的K562细胞克隆形成率下降,提示该基因在髓系白血病细胞的表达异常是一种伴随结果而不具有致癌作用。强表达LMO2的Molt-4细胞克隆形成率增加,应用特异siRNA可有效地下调其在Molt-4细胞的表达并使细胞克隆形成率下降,提示LMO2在T细胞白血病细胞中的表达有助于维持其增殖潜力。结论LMO2基因表达异常在T淋巴细胞中具有致癌作用,但在髓系细胞转化中可能只是一种伴随现象。