乳腺浸润性微乳头状癌FEZ1/LZTS1基因的表达及启动子区域甲基化的研究

背景与目的研究FEZ1/LZTS1基因在乳腺浸润性微乳头状癌中的表达,分析其与淋巴结转移等相关病理学特征的关系,并从FEZ1/LZT1基因启动子区域甲基化角度探讨IMPC浸润转移的分子机制。 方法采用免疫组织化学LSAB法检测100例IMPC中FEZ1／LZTS1的表达，选取100例IDC-NOS作为对照，比较其差异并分析FEZ1／LZTS1的表达与淋巴结转移等相关病理学特征的关系；运用重亚硫酸盐处理基因组DNA—PCR扩增一直接测序的方法对冻存9例纯型IMPC、9例混合型IMPC、9例正常乳腺组织及4s例IDC组织DNA中FEZ1／LZTS1基因启动子区域甲基化状态进行检测；

LZTS1的表达与乳腺癌化疗药物敏感性关系的研究

目的探讨亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(leucine zipper tumor suppressor 1,LZTS1)与乳腺癌化疗药物敏感性的关系。方法对122例乳腺癌手术标本行体外胶滴包埋原代细胞培养药敏检测(collagen gel droplet-embedded culture-drug sensitivity test,CD-DST),检测分析LZTS1表达与化疗药物敏感性的关系。免疫组织化学检测278例经新辅助化疗的乳腺癌患者活检样本中LZTS1蛋白表达情况,分析其与临床病理特征的关系。观察LZTS1表达与化疗药物敏感性及化疗反应的关系。结果 122例乳腺癌中LZTS1表达与紫杉醇及长春瑞滨的化疗药物敏感性呈正相关(r=0.311,r=0.206;均P<0.05),与其他药物(表柔比星、氟尿嘧啶及顺铂)敏感性无相关性(r=0.121,r=0.083,r=0.017;均P>0.05)。Logistic回归分析显示,含紫杉醇方案(紫杉醇+多柔比星、紫杉醇+表柔比星或紫杉醇+表柔比星+环磷酰胺)化疗的乳腺癌患者的LZTS1表达情况可作为预测病理完全缓解的指标(P<0.01)。结论以紫杉醇为基础化疗方案的乳腺癌中,LZTS1可作为预测化疗反应的新指标。

qRT-PCR法分析甲状腺乳头状癌FEZ1/LZTS1基因异常表达研究

目的:采用qRT-PCR法检测甲状腺乳头状癌(PTC)FEZ1/LZTS1基因的异常表达,分析异常表达与临床特点之间的关系。方法:用试剂盒提取42例甲状腺乳头状癌及癌旁正常组织标本RNA,采用实时荧光定量PCR扩增FEZ1/LZTS1基因并进行分析,判断基因异常表达。结果:42例PTC中,34例FEZ1/LZTS1基因与内参照基因相比,拷贝数量比值明显低于癌旁组织,显示为异常表达,且与民族、年龄、性别及肿瘤大小无相关性;临床Ⅰ、Ⅱ期的异常表达率高于Ⅲ、Ⅳ期,差异具有统计学意义。结论:FEZ1/LZTS1基因的异常表达可能与PTC的发生发展相关,qRT-PCR技术能够快速分析FEZ1/LZTS1基因的异常表达,对PTC的诊断可能具有辅助作用。

FEZ1/LZTS1基因与原发性肝癌相关性研究

目的:研究FEZ1/LZTS1基因和原发性肝癌的相关性。方法:新鲜肝癌组织及正常肝脏组织各96例,分别提取癌组织(其中肝细胞癌86例,胆管上皮癌6例,混合性癌4例)和正常组织总RNA,采用RT-PCR方法检测肝癌组织和正常肝脏组织FEZ1/LZTSl基因mRNA的表达。运用免疫组织化学法(SP法)分别检测96例肝癌和正常肝脏组织标本FEZI/LZTSl基因蛋白表达。结果:FEZ1/LZTS1基因的mRNA表达在96例肝癌组织中的情况如下:27例(28.1%)缺失,28例(29.2%)表达下降,41例(42.7%)表达正常;而FEZ1/LZTS1基因mRNA在相应的96例正常肝脏组织中全部表达。肝癌组织FEZ1/LZTS1基因的mRNA表达与正常肝脏组织相比显著下调(P<0.01)。FEZ1/LZTS1基因蛋白在全部正常肝脏组织中表达,在肝癌组织中30例(31.3%)强阳性(+),20例(20.8%)中度阳性(+/-),26例(27.1%)弱阳性(-/+),20例(20.8%)阴性(-)。结论:与正常组织比,FEZ1/LZTS1基因和蛋白表达在原发性肝癌组织中明显缺失或减少,这可能导致肝癌的发生。

LZTS1蛋白在肝组织及HepG2细胞中的表达

目的探讨LZTS1蛋白在正常肝、肝细胞癌组织及癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织中的表达,以及在人肝癌细胞系HepG2中的表达。方法选择我院正常人肝组织、原发性肝细胞癌和癌旁慢性肝纤维化、肝硬化组织标本共50例,采用免疫组化方法检测不同肝组织样本中LZTS1蛋白,光镜下观察LZTS1阳性细胞表达定位和分布,按表达面积和表达强度半定量计分。同时培养HepG2人肝癌细胞系,免疫印迹和细胞免疫组化方法检测HepG2细胞中内源性LZTS1的表达,并以正常肝细胞L-02为对照。SPSS统计分析各组间的表达差异。结果 LZTS1蛋白在正常胆管上皮胞浆中表达。肝细胞包膜和胞浆中均表达,且阳性细胞呈现规律性分布。LZTS1蛋白在肝细胞癌组织中14/20例(70%)表达强阳性,5/20例(25%)中等表达;癌旁肝硬化结节中10/17例(58.8%)强阳性表达,6/17(35.3%)例中等阳性表达;慢性肝纤维化组织中1/3(33.3%)例弱阳性,2/3例(66.7%)中等阳性。20例HCC组织中有17例为HBV-HCC,其中13例(76.5%)LZTS1蛋白呈强阳性表达。结论 LZTS1蛋白主要表达于正常胆管上皮和肝细胞胞浆,且在肝腺泡中呈规律性分布。在肝癌、肝硬化组织和HepG2细胞中表达增高。

FEZ1/LZTS1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的:探讨FEZ1/LZTS1基因在膀胱移行细胞癌中的表达及在肿瘤发生、发展中的作用。方法:对40例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱黏膜应用RT-PCR方法检测FEZ1/LZTS1基因mRNA的表达。结果:FEZ1/LZTS1基因mRNA在正常膀胱黏膜中阳性率100%,无表达缺失;而在膀胱移行细胞癌中阳性率42.50%,阴性率57.50%,两者间阴性率的差异有统计学意义(P<0.01);FEZ1/LZTS1基因mRNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱移行细胞癌中的阴性率分别28.57%、61.54%和84.62%,三者之间阴性率差异有统计学意义(P<0.05);在表浅性和浸润性膀胱移行细胞癌中阴性率分别为28.57%和89.47%,两者之间阴性率差异亦有统计学意义(P<0.01)。结论:FEZ1/LZTS1基因mRNA在膀胱移行细胞癌中出现表达缺失,并且与肿瘤的病理分级和临床分期有关。FEZ1/LZTS1基因表达缺失可能作为评价肿瘤分化程度、估计预后的参考指标。

miR-135b、LZTS1、β-catenin在胰腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨miR-135b、LZTS1及β-catenin在胰腺癌中的表达意义及三者之间的相关性.方法:分别采用锁定核酸原位杂交技术(LNA-ISH)和免疫组织化学法检测miR-135b、LZTS1和β-catenin蛋白在70例胰腺癌及相应癌旁组织中的表达情况.结果:miR-135b在胰腺癌中的表达率高于癌旁正常组织(71.4%vs 42.9%,P=0.001),LZTS1、β-catenin蛋白在胰腺癌中的表达率均低于癌旁正常组织(34.3%vs 68.6%、34.3%vs 74.3%,P<0.05).在胰腺癌组织中miR-135b与LZTS1的表达水平呈负相关(r=-0.61,P<0.05),与β-catenin无相关性(r=0.06,P>0.05);LZTS1与β-catenin呈正相关(r=0.37,P<0.05),且miR-135b、LZTS1和β-catenin的阳性表达水平与胰腺癌的临床分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),与胰腺癌患者年龄、性别、肿瘤部位及组织学分级无关(P>0.05).结论:miR-135b在胰腺癌中表达升高,LZTS1与β-catenin在胰腺癌中表达减少,并且表达升高的miR135b可能通过下调LZTS1基因表达而参与了胰腺癌的发生发展.

非小细胞肺癌组织中miR-371-5p、miR-452、miR-5100、LZTS1表达水平及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中微小RNA-371-5p(miR-371-5p)、微小RNA-452(miR-452)、微小RNA-5100(miR-5100)、亮氨酸拉链肿瘤抑制基因1(LZTS1)表达水平及临床意义。方法选择非小细胞肺癌患者100例为研究对象,并收集患者的癌旁正常组织及肺癌组织。检测肺癌组织与癌旁正常组织中miR-371-5p、miR-452、miR-5100、LZTS1的表达水平,分析其与临床病理特征的关系。结果肺癌组织中miR-371-5p、miR-452、LZTS1水平明显低于癌旁正常组织,miR-5100水平明显高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。非小细胞肺癌组织中miR-371-5p、LZTS1表达水平与年龄、吸烟、淋巴结转移、TNM分期显著相关(P<0.05),miR-452表达水平与淋巴结转移、病理类型显著相关(P<0.05),miR-5100表达水平与TNM分期显著相关(P<0.05)。结论非小细胞肺癌组织中miR-371-5p、miR-452、LZTS1均为低表达,miR-5100为高表达。miR-371-5p、LZTS1表达水平与年龄、吸烟、淋巴结转移、TNM分期相关,miR-452表达水平与淋巴结转移、病理类型相关,miR-5100表达水平与TNM分期相关。

喉癌组织中FEZ1／LZTS1基因的表达及其临床意义

目的：探讨FEZ1／LZTS1基因在喉鳞状细胞癌中的表达缺失及其与临床病理的关系。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法，分析50例原发性喉癌组织和癌旁组织中FEZ1／LZTS1基因的表达情况。结果：FEZ1／LZTS1基因在癌旁组织中表达率明显高于喉癌组织（P〈0．01）；在喉癌组织中FEZ1／LZTS1基因阳性表达率随其病理分级、临床分期升高而降低（P〈0．01），而与患者年龄、性别和原发灶部位无关。结论：FEZ1／LZTS1基因的表达缺失可能对LSCC的发生发展起重要作用，是LSCC发展中的重要分子事件。

抑癌基因研究新进展

乳腺癌缺失基因2(deleted in breast cancer 2,DBC2)、亮氨酸拉链基序编码基因1 (leucine zipper tumor suppressor 1,LZTS1)和低密度脂蛋白受体相关蛋白1B基因(low density lipoprotein receptor-related protein 1B,LRP1B)是近年来研究较热的3种可能的抑癌基因,越来越多的证据显示这几个基因的突变、异常表达或者增强子的甲基化异常等与多种肿瘤的发生有密切关系。对其进一步的研究将对多种肿瘤的预防和治疗大有裨益。

过表达亮氨酸拉链假定肿瘤抑制基因1对胰腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响

目的探究过表达亮氨酸拉链假定肿瘤抑制基因1(LZTS1)对胰腺癌PANC-1细胞的增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响。方法将PANC-1细胞按照随机数字表法分为四组,对照组(常规培养)、NC组(转染阴性对照)、pcDNA-LZTS1-1组(转染pcDNA 3.0 LZTS1-1质粒)、pcDNA-LZTS1-2组(转染pcDNA 3.0 LZTS1-2质粒)。蛋白质印迹法(Westernblotting)检测转染效果;噻唑蓝(MTT)观察PANC-1细胞增殖,流式细胞术检测凋亡率,Transwell法检测细胞的侵袭、迁移。结果与对照组相比,pcDNA-LZTS1-1组和pcDNA-LZTS1-2组PANC-1细胞中LZTS1蛋白水平[(2.835±0.301),(4.125±0.385)比(1.000±0.085)]显著增加,其中pcDNA-LZTS1-2组增加显著;过表达LZTS1抑制PANC-1细胞增殖、侵袭[(56.369±6.432)个比(117.258±12.152)个]、迁移[(120.145±14.210)个比(233.258±25.148)个],诱导其凋亡[(23.252±2.152)%比(6.589±0.645)%]。结论过表达LZTS1显著抑制PANC-1细胞增殖、侵袭、迁移,促进其凋亡。