瑞香狼毒水提物小鼠药物血清对小鼠白血病L_(1210)细胞增殖、克隆形成和DNA合成的影响

目的 从整体水平探讨瑞香狼毒水提物 (SCL A)的抗癌作用及机制。方法 以不同剂量 SCL A ig给药后 ,不同时间采集小鼠血清 ,处理体外培养的小鼠白血病 L1 2 1 0 细胞 ,观察肿瘤细胞 MTT还原 ,克隆形成能力和 DNA合成的改变。结果 SCL A 3,6 ,12 g/ kg给药 1,2 ,4,8h后的药物血清处理肿瘤细胞后 ,其 MTT还原及克隆形成率均显著降低 ;给药 2 h时的药物血清表现出更强的抑制肿瘤细胞增殖作用。SCL A小鼠药物血清也显著抑制 [3H]Td R掺入 L1 2 1 0 细胞 DNA。结论 直接抑制癌细胞增殖及 DNA合成是瑞香狼毒的重要抗癌机制。

二乙酰二脱水卫矛醇对小鼠白血病L_(1210)细胞增殖的影响

目的 研究二乙酰二脱水卫矛醇 (1 ,2 :5 ,6 dianhydro 3 ,4 diacetylgalactitol,DADAG)的抗脑白血病作用及机制。方法 用小鼠脑内移植瘤模型、MTT法、DNA掺入法、流式细胞仪和Westernblot法 ,观察DADAG对小鼠脑内移植瘤和体外白血病L1 2 1 0 细胞的作用 ,并探讨作用机制。结果 DADAG对DBA/ 2小鼠脑内移植白血病L1 2 1 0 有明显的抑制作用 ;对体外白血病L1 2 1 0 细胞同样有很强的抗增殖作用 ,其IC50 值为 2 4 6mg·L- 1 。DADAG不可逆地抑制L1 2 1 0 细胞内DNA的生物合成。DADAG 2 4mg·L- 1 处理L1 2 1 0 细胞 6h后 ,细胞发生G2 /M周期阻滞 ,2 4h后达最高峰。细胞周期素B1 蛋白水平在DADAG处理 2 4h后开始下降 ,而磷酸化的细胞周期依赖性激酶CDK1在DADAG处理 6h后开始上调 ,并呈时间依赖性。

顺铂诱发L_(1210)亲本细胞株和耐药细胞株DNA链间交联效应

目的 肿瘤细胞的耐药性是临床肿瘤化疗失败的主要原因之一 ,本研究的主要目的是探索肿瘤细胞的耐药机制。方法 应用微孔滤膜碱洗脱技术检测顺铂诱发小鼠淋巴细胞白血病L12 10 亲本 (Parental,Par)细胞株和耐顺铂 (Resistant,Res)细胞株DNA链间交联效应。结果 顺铂是细胞DNA交联剂 ,将顺铂 4 0 μmol·L-1与Par细胞作用 1h后去除药物 ,然后间隔不同时间检测所诱发的DNA链间交联 ,交联高峰为去除药物后 12h ,随后DNA链间交联逐步下降。选择去除药物后 12h ,观察Par和Res细胞与顺铂 2 0、30、4 0、6 0和 10 0 μmol·L-1作用 1h后所诱发DNA链间交联指数 (DNA -InterstrandCrosslinkIndex ,ISCI) ,发现Par和Res细胞ISCI与顺铂均具有剂量依赖性 ,且剂量大于 4 0 μmol·L-1时 ,二者之间的ISCI差异显著。结论 Res细胞耐药的主要原因是ISC降低。

当归酰天芥菜定对L_(1210),HepG_2和HCC细胞的抑制作用

目的 :研究当归酰天芥菜定 (AH)的抗肿瘤活性及机制 .方法 :通过细胞生长曲线的绘制 ,分析AH对L12 10 细胞的抑制作用 ;通过MTT比色法 ,测定AH对L12 10 ,HepG2 和HCC细胞的抑制率 ;通过流式细胞术 (FCM )检测AH对L12 10细胞周期的影响 .结果 :在AH作用下 ,L12 10 细胞生长曲线斜率和最大生长密度降低 .AH 80mg·L-1对L12 10 细胞的抑制率为 18.18% ;AH 32 0mg·L-1对HepG2 和HCC细胞抑制率分别为 12 .2 8%和 10 .2 4 % .FCM检测表明 ,AH 80mg·L-1作用 2 4h后 ,L12 10 细胞的G2 M期细胞明显增加 (P <0 .0 1) .结论 :AH对L12 10 细胞有一定的抑制作用 ,对HepG2 和HCC细胞抑制作用较差 .AH对L12 10 细胞的抑制作用发生在细胞周期的G2

三尖杉酯碱对HL_(60)和L_(1210)细胞核DNA结构的影响

用国产抗肿瘤药物三尖杉酯碱处理HL60 和L12 10 细胞 ,探讨药物对两种不同的白血病细胞以及在不同条件下培养的同种白血病细胞核DNA结构的影响。DNA凝胶电泳结果表明 :(1) 0 2 μg/mlHT作用 2h的HL60 细胞和HT作用 2～ 2 4h的L12 10 细胞有明显的DNAladder。 (2 )HT处理 6～ 2 4h的HL60 细胞、在DBA/ 2纯种小鼠体内培养的被HT处理不同时间的L12 10 细胞及所有对照细胞无DNAladder。 (3)HT处理 2 4h的HL60 细胞和HT处理 12h的白血病小鼠体内的L12 10 细胞核DNA断裂成碎片 ,在琼脂糖凝胶上呈弥散状分布。

钙拮抗剂逆转L_（1210）／HR细胞抗药性的动物体内试验研究

本文将体外培养的抗高三尖杉酯碱Ｌ１２１０耐药细胞（Ｌ１２１０／ＨＲ细胞）移植至ＤＢＡ／２小鼠体内，建立了Ｌ１２１０／ＨＲＤＢＡ／２小鼠动物模型，并用钙拮抗剂异搏定、尼群地平进行Ｌ１２１０／ＨＲＤＢＡ／２动物模型的逆转试验，证明异搏定能明显延长动物的存活期，有效地逆转了Ｌ１２１０／ＨＲ细胞的抗药性。另外用高效液相色谱议检测了经异搏定、尼群地平逆转的Ｌ１２１０／ＨＲ细胞内高三尖杉酯碱的药物含量，表明经钙拮抗剂异搏定逆转后细胞内高三尖杉酯碱药物含量明显增高，经异搏定逆转的细胞内药物含量比未逆转的细胞高２．３倍。

复方中药对L_(1210)白血病小鼠抗瘤机理研究

目的:探讨复方中药对 L_(1210)白血病小鼠抗肿瘤机理。方法:采用益气养阴和补气养血方中药观察其对 L_(1210)白血病小鼠在体天然杀伤细胞(NK 细胞)活性,采用体外培养观察这两方中药对 L_(1210)白血病细胞增殖抑制作用。结果:两方中药均可增加荷瘤小鼠的 NK细胞活性(P<0.01和 P<0.05),补气养血方中药还有抑制培养 L_(1210)白血病细胞的直接作用(P<0.05)。结论:两方中药通过增强机体 NK 细胞活性,补气养血中药还可通过抑瘤生长发挥治疗作用。

戊脉安体外对小鼠L_(1210)白血病细胞杀伤作用的观察

本文采用体外培养的L_(1210)细胞株,研究了戊脉安的体外抗肿瘤作用.发现戊脉安对L_1210细胞的生长有一定的抑制作用,且呈剂量相关,并能显著降低L_1210细胞的分裂指数.其抗肮瘤作用与细胞外钙离子浓度无关.

甾体激素对大鼠L_(929)细胞摄取甘氨酸的非基因组作用

目的 研究甾体激素对成纤维细胞非基因组作用。方法 将大鼠成纤维细胞株L92 9和标记甘氨酸孵育一定时间 ,同时加入甾体激素和 /或其它试剂 ,应用液体闪烁技术检测细胞摄取标记甘氨酸量的变化。结果 甾体激素快速抑制L92 9细胞摄取甘氨酸 ,不同的甾体激素作用强度有差异 ,皮质酮和醛固酮的作用均表现有浓度依赖性 ,牛血清白蛋白偶联皮质酮作用和硫酸皮质酮作用没有差别 ,糖皮质激素胞浆内受体阻断剂能部分阻断皮质酮作用 ,细胞外液Ca2 +能影响皮质酮作用。结论 甾体激素对L92 9细胞摄取甘氨酸的快速抑制为非基因组效应 ,其作用可能是通过细胞膜受体介导的 ,细胞膜受体在结构上可能和胞浆受体有某种相似性。

肿瘤坏死因子对L_(929)细胞发生细胞毒作用的形态学探讨——光镜及扫描、透射电镜观察

观察肿瘤坏死因子对L_(929)细胞发生细胞毒作用时,靶细胞在间隔时间内的光镜、扫描及透射电镜下的形态学改变,发现光镜下的改变,符合理化因素作用于细胞发生变性、坏死的特点;扫描及透射电镜的动态观察发现,肿瘤坏死因子使靶细胞线粒体增多、肿胀、裂解、溶酶体增多、溶酶体酶释放、细胞器溶解,最后使细胞损伤死亡。故认为肿瘤坏死因子的细胞毒作用不是使细胞膜受到破坏。

硒对白血病细胞(L1210)作用的实验研究

本文采用MTT比色法研究了亚硒酸钠对L_(1210)细胞的作用。结果表明:<1>亚硒酸钠对L_(1210)细胞的增殖有较强的抑制作用;<2>MTT比色法是一种可替代活细胞计数法的简便、快速、准确的检测方法。

蛋白激酶C抑制剂对细胞生长增殖的影响

本文对新近分离纯化的蛋白激酶C抑制剂的生物学特性进行了分析,应用细胞增殖试验表明,蛋白激酶C抑制剂对培养的L_(929)细胞和Hela细胞生长增殖有显著的抑制作用,并且该抑制作用有细胞周期特异性。对这种抑制功能的可能机理进行了初步探讨。

四种鬼臼毒衍生物的体外抗肿瘤作用

目的：研究四种鬼臼毒衍生物在体外对Ｌ＿（１２１０）细胞生长的抑制作用。方法：采用活细胞计数法和软琼脂克隆形成法及有丝分裂指数计数法。结果：ＶＰ＿（１６），ＧＰ＿１，ＧＰ＿１Ｈ和ＧＰ＿１ＯＨ体外剂量，时间依赖性的抑制Ｌ＿（１２１０）细胞生长，２４ｈＩＧ＿（５０）依次为０．０４９，１．０６，３．８９，５．３３μｇ／ｍｌ，不同时间ＶＰ１６均降低细胞有丝分裂指数而ＧＰ１等反之。结论：ＶＰ＿（１６），ＧＰ＿１，ＧＰ＿１Ｈ和ＧＰ＿１ＯＨ的抗肿瘤机理有所不同。

铕—5—氟尿嘧啶抗肿瘤作用实验观察

本文报道铕-5-氟尿嘧啶对体外培养的人红白血病K_(562)细胞及小鼠白血病L_(1210)细胞,用小孔板法,100.0、50.0、10.0、5.0μg/ml终浓度剂量,24小时后,残留率分别为35.7%、53.6%、68.9%、84.1%及29.6%、48.2%、74.0%、82.4%;对小鼠移值性肿瘤S_(180),用70.0mg/kg剂量,瘤重抑制率为36.2%;用35.0mg/kg剂量,瘤重抑制率为31.5%;铕-5-氟尿嘧啶小鼠单次腹腔注射LD_(50)为343.3～405.9mg/kg。

LAK细胞的抗白血病效应及其影响因素的研究

本实验研究了LAK细胞/IL—2过继输入对L_(615)白血病的治疗作用并用细胞毒试验研究了影响LAK细胞/IL—2临床治疗急性白血病的若干因素。实验结果表明,LAK细胞对急性白血病有治疗作用;急性白血病病人外周血单个核细胞诱生的LAK细胞活性极低,其血清对LAK细胞活性有抑制作用;用同种异体的正常人外周血单个核细胞或胎儿脾脏单个核细胞、胸腺细胞诱生的LAK细胞对急性白血病细胞有较强的杀伤活性,是临床治疗急性白血病的可靠的LAK细胞来源。

抗瘤酮A_(10)的化学修饰及抗肿瘤活性研究

设计合成了抗瘤酮A_(10)(1)的类似物和衍生物23个,包括光学活性的1。体外抗L1210细胞试验表明,在浓度为100μg/ml时,均显示微弱的抑制活性。

THE MECHANISM OF INHIBITION OF DNA SYNTHESIS BY HHO7A,ADERIVATIVE OF HAINANENSINE

The synthesis Of DNA, RNA and protein in L121O cells was inhibited by HHO7A in a dose-dependentand time-dependent way. HHO7A shOwed much stronger inhibitory effect on [3H]-thymidine incorporationthan that on [3H]-uridine or [3H]-tyrosine incorporation. The methods of shift of absorption spectrum,shift of fluorescence emission spectrum and excitation spectrum, and isotope technique were used to investigate the mechanism of actiOn of HHO7A on DNA synthesis. The results suggested thaT the action ofHHO7A on DNA synthesis was nOt probably due to direct damage to the DNA template, it might mainlyact by interfering with the metabolism of DNA.

甾体激素对L_(929)细胞摄取甘氨酸快速作用的机制

目的 探讨甾体激素对L92 9细胞摄取甘氨酸非基因组作用的细胞内信号转导机制的作用。方法 应用液体闪烁技术 ,通过检测L92 9细胞在加入了甾体激素和 (或 )其他试剂后摄入标记甘氨酸量的改变 ,确定甾体激素的作用及其机制。结果 皮质酮、醛固酮、雌二醇、地塞米松和氢化可的松均能不同程度地快速抑制L92 9细胞甘氨酸摄取 ,牛血清白蛋白偶联皮质酮和硫酸皮质酮作用没有明显差别 ,G蛋白抑制剂GDP β S能阻断皮质酮作用 ,磷酯酶C阻断剂新霉素不能阻断皮质酮作用 ,蛋白激酶C抑制剂Chelery能阻断皮质酮作用 ,蛋白激酶激动剂佛波脂能模拟皮质酮作用 ,腺苷酸环化酶激动剂福司柯林 (Forskolin)及蛋白激酶A阻断剂H89能阻断皮质酮作用。结论 甾体激素快速抑制L92 9细胞摄取甘氨酸是非基因组作用 ,这一作用的细胞内信号转导过程是通过G蛋白 蛋白激酶C途径。

热休克蛋白90_α的表达及其对体内肿瘤生长的影响

目的探讨ｈｓｐ９０α对体内肿瘤生长的影响及机理。方法利用克隆技术构建了ｈｓｐ９０α融合表达质粒ｐＭａｌｈｓｐ９０α。ＤＢＡ／２小鼠接种肿瘤细胞前，皮下注射融合蛋白，每隔１天测肿瘤大小，２５天后，５１Ｃｒ释放法测ＮＫ细胞活性。结果注射热休克蛋白组小鼠抗ｈｓｐ９０α抗体升高，肿瘤生长快，ＮＫ细胞活性低。结论ｈｓｐ９０α对肿瘤生长的影响与小鼠体内的ＮＫ细胞活性降低有关。

试管内肿瘤细胞集落形成法的建立及其用于药物抗肿瘤活性研究

本文建立了试管内软琼脂小鼠L_(1210)、P_(388)细胞集落形成法,并与平皿和24孔板软琼脂集落形成法进行了比较,肯定了试管法具有用肉眼计集落数、简便、快速、经济、污染率低,用药量少等优点.本法的集落形成率(PE)平均为0.67±0.17.用本法评价了阿霉素等5种临床抗癌药对抗L_(1210)、P_(388)细胞的作用,其剂量-反应曲线呈指数性直线.用IC_(50)(μg/ml)表示抗肿瘤效应,以阿霉素和氮芥作用最强,其次顺铂、卡氮芥和三尖杉酯碱作用最弱.试管法与平皿法的结果一致.