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荧光蛋白在双色蜡蘑中的构建与表达
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作者 马嘉楠 李蕊 +1 位作者 邹嵘 张凤 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2023年第6期35-41,共7页
菌根是真菌与植物之间形成的互惠互利的营养共生体,对生态环境有重大的意义。外生菌根真菌与植物互作机制以及真菌基因功能的深入研究都需要对菌根真菌进行遗传转化,本研究以外生菌根真菌模式生物双色蜡蘑(Laccaria bicolor)为研究对象... 菌根是真菌与植物之间形成的互惠互利的营养共生体,对生态环境有重大的意义。外生菌根真菌与植物互作机制以及真菌基因功能的深入研究都需要对菌根真菌进行遗传转化,本研究以外生菌根真菌模式生物双色蜡蘑(Laccaria bicolor)为研究对象,选择细胞核中的核小体蛋白H2B基因为目的基因,以pCEBN为表达载体,融合红色荧光蛋白,最终构建在真菌中表达的双元载体,使用根瘤农杆菌介导转化法转化双色蜡蘑菌丝,随后利用PCR对真菌转化子进行验证后,通过激光共聚焦显微镜观察到菌丝细胞核中的红色荧光,成功将融合荧光蛋白转化菌根真菌,为后续研究菌根真菌中基因的亚细胞定位提供了实验平台。结果表明,利用双元载体和农杆菌转化方法,建立了高效的双色蜡蘑转化体系(93.33%),在激光共聚焦显微镜下观察到菌丝细胞核中红色荧光信号,验证了融合荧光蛋白在双色蜡蘑中的成功表达。本研究成功地构建了菌根真菌中的核小体蛋白和红色荧光蛋白融合表达的真菌转化体系。 展开更多
关键词 菌根真菌 双色蜡蘑 红色荧光蛋白 核小体蛋白
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接种双色蜡蘑对马尾松幼苗生长、养分和抗铝性的影响 被引量:24
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作者 辜夕容 梁国仕 +2 位作者 杨水平 陈翠玲 黄建国 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期199-203,共5页
Pinus massoniana was grown in a nurse bed consisting of a strong acidic yellow soil and inoculated with 3 strains of Laccaria bicolor, namely Lb S238A, Lb S238N and Lb 270, respectively. The growth of seedlings, parti... Pinus massoniana was grown in a nurse bed consisting of a strong acidic yellow soil and inoculated with 3 strains of Laccaria bicolor, namely Lb S238A, Lb S238N and Lb 270, respectively. The growth of seedlings, particularly stems and leaves, was promoted significantly by the ectomycorrhizal(ECM) fungi in the sequence: Lb270 > Lb S238N > LbS238A. In contrast, the inhibition of aluminum translocation was observed from roots to upper parts compared to the absorption and utilization of N, P, Ca and Mg that were encouraged by ECM. Seedlings infested with Lb S238A absorbed least amount of nutrients and aluminum, while the largest amount of P, K and Mg was taken in by those with Lb 270 and the largest amount of N and Ca by those with Lb S238N。It is necessary to point out that Ca absorption and accumulation in the upper parts of pine seedling were greatly promoted by ECM inoculation. The latter in those of mycorrhizal seedlings was increased by 473%~577% over than nonmycorrhizal(NM) ones, which could benefit to the aluminum resistance of the tree seedlings. The inoculation of Laccaria bicolor could, therefore, be considered as an important and effective measurement to promote growth and nutrition and to alleviate aluminum toxicity to Pinus massoniana in south China. 展开更多
关键词 马尾松 双色蜡蘑 营养
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接种双色蜡蘑对酸性铝胁迫下马尾松幼苗生长、养分和铝吸收与分布的影响 被引量:9
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作者 辜夕容 倪亚兰 +1 位作者 江亚男 贾豪 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第2期170-178,共9页
【目的】探索菌根化植物在田间条件下对酸性铝胁迫的抗性和营养机制,并筛选出抗铝性强的菌根苗,为我国酸性土壤林区的造林和植被恢复提供理论和实践支持。【方法】选用双色蜡蘑的3个菌株(Lb S238A、Lb S238N和Lb 270)分别接种马尾松,形... 【目的】探索菌根化植物在田间条件下对酸性铝胁迫的抗性和营养机制,并筛选出抗铝性强的菌根苗,为我国酸性土壤林区的造林和植被恢复提供理论和实践支持。【方法】选用双色蜡蘑的3个菌株(Lb S238A、Lb S238N和Lb 270)分别接种马尾松,形成3种菌根苗,并以非菌根苗为对照,在酸性山地冷砂黄壤中培养4周,每周分别施入p H 3.8的不含A1和含1.0 mmol·L-1Al的Hoagland营养液,连续处理12周后取样检测并分析接种双色蜡蘑对酸性铝胁迫下马尾松幼苗生长、养分和铝吸收与分布的影响。【结果】酸性铝胁迫促进Lb S238A菌根苗的生长及对磷、钙、镁和铝的吸收,抑制Lb S238N和Lb 270菌根苗的生长及Lb 270菌根苗对钙和镁的吸收。与非菌根苗相比,接种双色蜡蘑均能促进酸性铝胁迫下马尾松幼苗的生长及对磷、钙和镁的吸收,抑制或不影响铝的吸收。其中接种Lb S238A的效果最好,可使酸性铝胁迫下苗木的生物量提高69.9%,磷、钙和镁吸收量分别增加68.9%、69.7%和81.5%。酸性铝胁迫下,接种双色蜡蘑对马尾松幼苗生长的促进作用主要表现在地上部分尤其是茎的生长上;接种Lb S238A或Lb S238N降低根、茎、叶中的铝浓度,而接种Lb 270降低根和茎中的铝浓度,尤其是降低茎中铝浓度;接种Lb S238A和Lb 270分别使茎和根中钙浓度减少,但接种Lb S238N却提高叶中钙浓度;3株双色蜡蘑的侵染均使磷浓度在根中降低而在叶中增加,使磷、钙和铝的分布在根中减少而在叶中增加。【结论】接种双色蜡蘑通过促进酸性铝胁迫下马尾松幼苗对磷、钙和镁等养分的吸收,推动磷、钙和铝向地上部转运,抑制或不影响铝的吸收且稀释铝浓度来提高马尾松苗木对铝毒的抗性。供试苗木中,抗铝性和养分吸收能力最强的是Lb S238A的菌根苗,适于在铝浓度较高的酸性土壤上种植;Lb S238N或Lb 270的菌根苗虽对铝敏感,但却能在铝浓度较低的酸性土壤上生长优良。 展开更多
关键词 双色蜡蘑 铝毒 营养 马尾松
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双色蜡蘑对黑松幼苗生长量及其根系形态的影响 被引量:3
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作者 周晓莹 梁玉 +4 位作者 李红丽 高娅 仇苏倩 范小莉 董智 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1153-1159,共7页
为研究双色蜡蘑(Laccaria bicolor)对黑松(Pinus thunbergii)幼苗生长及其根系形态的影响,在营养杯培育条件下,用双色蜡蘑液体菌剂对黑松幼苗进行接种处理,接种第15、30、60、90、120天时取样,比较接种和未接种黑松幼苗的生物量、根系... 为研究双色蜡蘑(Laccaria bicolor)对黑松(Pinus thunbergii)幼苗生长及其根系形态的影响,在营养杯培育条件下,用双色蜡蘑液体菌剂对黑松幼苗进行接种处理,接种第15、30、60、90、120天时取样,比较接种和未接种黑松幼苗的生物量、根系形态及根系分形维数的差异。结果表明:双色蜡蘑在黑松幼苗地上植株、地下根系的生长及其生物量的积累方面都表现出明显的促进作用。接种双色蜡蘑也显著改善了根系总长度、分支数、表面积、体积等参数和根系分形维数,并对地下根系生长的促进作用时间早于地上部分,且效应显著高于地上部分。接种双色蜡蘑第15~30天时对地上部分基本无影响,但对根系促进作用明显,而地上部分在第60天时开始表现出显著的生长效应。研究发现,双色蜡蘑能够成功定殖于黑松根部,促进黑松幼苗生长及其生物量的积累,同时显著促进根系总长度、分支数、表面积和体积增加,并使根系分形维数增大,表现出明显的促生作用,且对根系发育的显著促进作用早于地上部分。 展开更多
关键词 双色蜡蘑 黑松 生长效应 根系形态 分形维数
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根癌农杆菌介导的菌根真菌遗传转化研究进展 被引量:6
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作者 邹嵘 马嘉楠 张凤 《菌物研究》 CAS 2021年第3期197-206,共10页
菌根真菌与寄主植物之间有着互利共生的关系,相互作用下会形成菌根结构。为了从基因水平上进行共生关系的研究,需要构建高效稳定的遗传转化体系。相比较传统的真菌遗传转化方法,根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的转化方法具有... 菌根真菌与寄主植物之间有着互利共生的关系,相互作用下会形成菌根结构。为了从基因水平上进行共生关系的研究,需要构建高效稳定的遗传转化体系。相比较传统的真菌遗传转化方法,根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens介导的转化方法具有适用范围广、转化效率高等特点,因此成为菌根真菌最理想的转化方法之一。通过探究影响根癌农杆菌遗传转化效率的因素以及所用的RNA干扰和过表达的克隆载体构建,总结出农杆菌转化外生菌根真菌的最适方案。在基因功能研究方面,归纳了已有的一些利用根癌农杆菌对不同类型菌根真菌进行遗传改造的实验结果,对兰科菌根真菌、杜鹃花菌根真菌、丛枝菌根真菌以及外生菌根真菌的基因功能研究进展进行总结。为菌根进行分子水平和遗传学方面的深入研究提供背景资料。 展开更多
关键词 外生菌根真菌 农杆菌遗传转化 双色蜡蘑
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