目的探究肝细胞癌中分泌性富含半胱氨酸的酸性蛋白(secreted protien acidic and rich in cysteine,SPARC)表达及其与糖酵解作用的相关调节机制。方法选取肝癌细胞HepG2、Hep3B、Huh7,分别稳定转染SPARC质粒和SPARC siRNA,应用比色法检...目的探究肝细胞癌中分泌性富含半胱氨酸的酸性蛋白(secreted protien acidic and rich in cysteine,SPARC)表达及其与糖酵解作用的相关调节机制。方法选取肝癌细胞HepG2、Hep3B、Huh7,分别稳定转染SPARC质粒和SPARC siRNA,应用比色法检测2种转染的细胞中糖酵解关键酶己糖激酶(HK)和乳酸脱氢酶-A(LDHA)的活性变化。结果转染SPARC质粒的3种肝癌细胞中HK-Ⅱ、LDHA的活性较对照组明显下降,3种细胞中HK-Ⅱ相对吸光度分别降低至(57.45±5.05)%,(56.1±5.70)%,(49.73±7.06)%;LDHA相对吸光度分别降低至(50.53±8.07)%,(54.38±2.08)%,(42.34±3.44)%;差异均有统计学意义(P<0.05);反之,siRNA抑制SPARC表达的肝癌细胞中,HK-Ⅱ、LDHA活性较对照组明显上调,3种细胞中HK-Ⅱ相对吸光度分别上调至(174.20±8.41)%,(166.69±9.71)%,(152.84±3.39)%;LDHA的相对吸光度分别上调至(176.65±6.85)%;(163.24±6.44)%;(151.25±6.75)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肝细胞癌中,SPARC通过负性调控糖酵解作用的关键酶抑制糖酵解。展开更多
文摘目的探究肝细胞癌中分泌性富含半胱氨酸的酸性蛋白(secreted protien acidic and rich in cysteine,SPARC)表达及其与糖酵解作用的相关调节机制。方法选取肝癌细胞HepG2、Hep3B、Huh7,分别稳定转染SPARC质粒和SPARC siRNA,应用比色法检测2种转染的细胞中糖酵解关键酶己糖激酶(HK)和乳酸脱氢酶-A(LDHA)的活性变化。结果转染SPARC质粒的3种肝癌细胞中HK-Ⅱ、LDHA的活性较对照组明显下降,3种细胞中HK-Ⅱ相对吸光度分别降低至(57.45±5.05)%,(56.1±5.70)%,(49.73±7.06)%;LDHA相对吸光度分别降低至(50.53±8.07)%,(54.38±2.08)%,(42.34±3.44)%;差异均有统计学意义(P<0.05);反之,siRNA抑制SPARC表达的肝癌细胞中,HK-Ⅱ、LDHA活性较对照组明显上调,3种细胞中HK-Ⅱ相对吸光度分别上调至(174.20±8.41)%,(166.69±9.71)%,(152.84±3.39)%;LDHA的相对吸光度分别上调至(176.65±6.85)%;(163.24±6.44)%;(151.25±6.75)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肝细胞癌中,SPARC通过负性调控糖酵解作用的关键酶抑制糖酵解。