干酪乳杆菌SY13对小鼠免疫功能和肠道菌群的影响

在前期已验证干酪乳杆菌SY13具有降脂益生功能的基础上,结合低聚糖可促进益生菌在肠道定殖的特性,本试验拟深入探讨SY13对宿主免疫功能和肠道菌群的影响,将48只6周龄小鼠分为4个组:分别灌服无菌PBS(BP1组)、SY13(BP2组)、SY13+低聚果糖(BP3组)和SY13+乳果糖(BP4组),连续28 d,分别于第1、3、5、7天,每组选3只小鼠眼球取血,用ELISA测定小鼠血清分泌型免疫球蛋白A(sIgA)和细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4和IL-10)含量;采用TaqMan-MGB探针,通过实时荧光定量PCR检测第1天各组小鼠肠道内容物中SY13含量;利用Illumina Miseq分析各组小鼠第1、7天的盲肠微生物多样性。结果显示,第7天时BP1组小鼠血清sIgA含量显著低于其他各组(P<0.05);第3天时BP4组小鼠血清IL-1β和第5天时血清IL-4、IL-10含量均显著高于其他各组(P<0.05);第1天时BP4组小鼠空肠、回肠和盲肠中SY13含量显著高于其他各组(P<0.05);第1、7天时BP3组和BP4组小鼠盲肠拟杆菌门菌群丰度显著高于BP1组(P<0.05),BP3组小鼠盲肠厚壁菌门与拟杆菌门菌群丰度比值低于其他各组;第7天时,BP3组和BP4组小鼠盲肠另枝菌属菌群丰度显著高于BP1组(P<0.05)。结果表明,SY13可促进机体健康,同时服用SY13和乳果糖可调节宿主肠黏膜免疫,改善肠道菌群,降低肠道感染概率,而同时服用SY13和低聚果糖主要是通过与肠道菌群相互作用发挥益生功效。

干酪乳杆菌与纳豆芽孢杆菌共培养上清液对小鼠抗生素相关性腹泻的治疗作用及机制

为探讨干酪乳杆菌(Lactobacillus casei,LC)、纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtiliis natto,BN)共培养上清液对小鼠抗生素相关性腹泻(AAD)肠道微生态、黏膜屏障功能及免疫功能的影响,建立AAD小鼠模型,分别灌胃生理盐水、LC、BN及共培养上清液4 d。观察干预期间小鼠一般情况,比较不同干预小鼠胸腺、脾脏体质量比,观察近端结肠病变区组织病理学改变;检测各组小鼠肠道微生态、黏膜屏障功能及免疫功能。结果显示,模型组小鼠呈现精神状态不佳、采食量下降、粪便性状异常等改变,且随着时间延长而加重;干预后,各组小鼠上述状态均有所改善,其中共培养组恢复情况最佳;组织病理学结果显示,模型组肠壁组织结构破坏严重,组织绒毛脱落,可见纤维素样渗出、上皮细胞坏死、大量炎性细胞浸润;干预后上述病理变化均有所改善,其中共培养组改善效果最佳。与对照组相比,模型组胸腺、脾脏体质量比、菌群多样性(Shannon)指数和丰富度(Chao)指数、乳杆菌数、双歧杆菌数、肠黏膜中分泌型免疫球蛋白IgA(sIgA)、肠组织白介素(IL)-2及IL-2/IL-4、肠组织中紧密连接相关蛋白-1(ZO-1)、闭锁蛋白(Occludin)蛋白相对表达量均较低,肠杆菌数、肠球菌数血清DAO、细菌异位率、肠组织IL-4均较高,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,各干预组胸腺、脾脏体质量比、Shannon、Chao指数、乳杆菌数、双歧杆菌数、肠黏膜中sIgA、肠组织IL-2及IL-2/IL-4、肠组织中ZO-1、Occludin蛋白相对表达量均较高,差异均有统计学意义(P<0.05),其中共培养组高于LC组、BN组(P<0.05),LC组与BN组比较差异无统计学意义(P>0.05);与模型组相比,各干预组肠杆菌数、肠球菌数、血清二胺氧化酶(DAO)、细菌异位率、肠组织IL-4均较低,差异均有统计学意义(P<0.05),其中共培养组低于LC组、BN组(P<0.05),LC组与BN组比较差异无统计学意义(P>0.05);共培养组与对照组比较,血清DAO、细菌异位率、sIgA、IL-2、IL-4水平及IL-2/IL-4差异无统计学意义(P>0.05)。结果表明,LC与BN共培养上清液可有效调节AAD小鼠肠道微生态,改善肠黏膜屏障功能,提高肠道局部及整体免疫功能。

干酪乳杆菌Zhang对小鼠肠道免疫功能的影响

目的研究干酪乳杆菌Zhang(Lactobacillus casei Zhang,LcZhang)活菌制剂对小鼠肠粘膜免疫功能的影响。方法将分离自酸马奶的干酪乳杆菌Zhang,以活菌制剂的形式分三个剂量灌服小鼠11d,观察小鼠肠道局部免疫组织一派伊尔氏结(Payer’s Patches,PP)的数量及小肠粘膜CD3+、IgA+细胞数量及其阳性信号平均光密度值。结果干酪乳杆菌Zhang可使小鼠肠道粘膜相关淋巴组织中派伊尔氏结计数、计分值显著提高,并可显著提高肠粘膜内CD3+、IgA+细胞数量及表达强度。结论干酪乳杆菌Zhang对小鼠肠道粘膜免疫具有明显的促进作用。