乳脂乳球菌CH5生长特性的研究

本文以农家干酪生产使用的乳脂乳球菌(Lactococcus lactis ssp.cremoris)为研究对象,从细菌总数(CFU),pH值和滴定酸度三个指标对本实验室分离得到的乳脂乳球菌CH5在脱脂乳中的生长特性和4℃下保存过程中的活力变化进行了研究。结果表明乳脂乳球菌CH5在脱脂乳中的延滞期短,能较快进入对数生长期,6h时进入稳定期,活菌数达109CFU/ml,Tdg约为1.03h,Tda约为2.87h,这表明乳脂乳球菌CH5细胞增长速度快于产酸速率。乳脂乳球菌CH5在4℃下保存时,稳定性较好,前11d活菌数和最大产酸速率(μacid)基本保持不变,此后逐渐下降,表明CH5发酵剂在前11d的活力比较稳定,可以确定生产农家干酪的CH5母发酵剂的最佳传代时间为11d,冷却保藏第3d为最佳生产使用时间。

乳酸乳球菌乳亚种丁二酮变种发酵乳风味物质研究

【目的】研究发酵过程中乳酸乳球菌乳亚种丁二酮变种发酵乳双乙酰的变化规律,并检测发酵乳样品中风味物质的种类和含量。【方法】采用邻苯二胺法,分别测定25,30℃培养4,8,12,24,36和48 h发酵乳中双乙酰的含量,用GC-MS方法测定了发酵乳中挥发性风味物质的组成。【结果】乳酸乳球菌乳亚种丁二酮变种发酵前期有大量双乙酰积累,随着发酵时间的延长,双乙酰含量逐步增加。通过GC-MS方法在发酵乳挥发性风味物质中共鉴定出19种成分,其中酯类4种、醇类1种、杂环化合物1种、短链挥发性脂肪酸5种、羰基化合物8种。【结论】乳酸乳球菌乳亚种丁二酮变种发酵乳中,有较高含量的双乙酰,在发酵后期其含量更大,乙醇、2,3-丁二酮、2,3-戊二酮含量也明显高于其他单菌种乳酸菌发酵乳中的相应含量。

乳酸乳球菌乳脂亚种高产丁二酮的条件优化

分别研究了10种不同因素对乳酸乳球菌乳脂亚种产生丁二酮质量分数的影响。结果表明,各因素产生丁二酮最高量的条件:培养温度为37℃;凝乳后3 h;后熟12 h;培养基pH值调至为5.6;培养基中添加柠檬酸氢二铵的质量浓度为0.15%;培养基中添加Vc的质量浓度为0.3%。培养基中添加金属离子的质量浓度分别为:Mg2+为0.05%,Cu2+为0.04%,Mn2+为0.001%;培养基中添加甘氨酸的质量浓度为1.7%(均为质量分数);培养基中添加碳水化合物的质量浓度分别为:葡萄糖为1%,蔗糖为1.5%(均为质量分数);随着基质浓度增加丁二酮产量也随之增加。

乳酸乳球菌乳脂亚种IMAU60064增殖培养基的优化

以分离自西藏那曲县罗玛镇传统发酵酸牦牛奶中的乳酸乳球菌乳脂亚种（Lactococcus lactis subsp．Cremoris）IMAU60064为试验菌株，研究其最佳的培养条件。对碳源、氮源、缓冲盐等培养基成分及培养条件进行优化，并采用响应面法对优选的碳源、氮源和缓冲盐类的组成含量进行优化，得到IMAU60064的增殖培养基为：葡萄糖23g／L、大豆蛋白胨11g／L、牛肉膏11g／L、胰蛋白胨5g／L、NaAC1．8g／L、K2HP041．2g／L、柠檬酸钠1．2g／L、MgSO4·7H200．4g／L、MnSO4·5H2O54mg／L、L-半胱氨酸盐酸盐0．5g/L、吐温80为1g／L。Lactococcus lactis subsp．cremorisIMAU60064在此增殖培养基中经30℃，14h培养活菌数可达到3．26×10^8cFu／mL，比在MRS中（6．54×10^7CFU／mL）提高近5倍。

乳酸乳球菌乳脂亚种MG1363中盐诱导启动子的克隆

为了从乳酸菌中筛选和克隆启动子,实验利用缺失T7启动子的质粒载体PRSET/LacZ直接在大肠杆菌(E.coli)DH5α中分离乳酸乳球菌乳脂亚种(Lactococcus lactis subsp.cremoris)MG1363的基因启动子片段,获得了10多个具有抗氨苄和盐诱导出蓝斑的重组子。反复筛选并对其中一个抗性最高的重组子PRSET-osm进行序列测定和同源性分析发现,所克隆的基因启动子片段来自乳酸乳球菌乳脂亚种MG1363的基因组,并具有原核启动子的保守序列(Pribnow框和Sextama框)。对启动子osm进行进一步序列分析和鉴定发现,其在大肠杆菌BL21中启动LacZ基因的表达,确定osm为盐诱导启动子。

乳脂乳球菌复配发酵乳贮藏期品质变化研究

探讨了分离自新疆酸奶疙瘩的一株乳脂乳球菌,在乳制品应用中具有的潜在益生价值。通过测定多肽、滴定酸度、丁二酮、乙醛、黏度、活菌数等指标,研究了乳脂乳球菌复配菌株发酵乳在贮藏期间的发酵特性。结果表明,在贮藏期发酵乳各指标均显著高于对照组,酸度升高了29.59°T,后酸化能力较强。丁二酮含量在整个贮藏过程中较稳定,乙醛、多肽、黏度、胞外多糖的含量在贮藏7 d后达到最大值。多肽含量最高达3.34 mg/m L,胞外多糖含量与测定的黏度值呈现正相关。活菌数呈下降趋势,贮藏21 d后,为7.8×107CFU/m L,仍高于发酵乳标准中活菌数1×106 CFU/m L的要求。