lactuside B降低脑缺血损伤大鼠海马和纹状体TRPM7 mRNA的表达

目的探讨lactuside B对大鼠脑缺血损伤后海马和纹状体TRPM7 mRNA表达的影响。方法采用大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,SD雄性大鼠缺血2 h后再灌,分别于再灌后ip给予lactuside B 12.5,25和50 mg·kg-1,每天2次,每组1/2大鼠给药1 d,另1/2大鼠连续给药3 d,于末次给药后观察神经缺失症状并处死大鼠;RT-PCR技术检测大脑皮质和海马TRPM7 mRNA的表达。结果模型组大鼠各时间段神经缺失症状评分明显升高,海马和纹状体的TRPM7 mRNA表达均显著增加(P<0.01)。给予lactuside B12.5,25和50 mg·kg-11 d后,海马和纹状体TRPM7 mRNA表达分别为0.68±0.02,0.55±0.02和0.56±0.02,及0.32±0.02,0.25±0.01和0.35±0.01,与模型对照组比较均明显降低(P<0.01);给予lactuside B 12.5,25和50 mg·kg-1 3 d,海马和纹状体TRPM7 mRNA分别为0.29±0.02,0.18±0.01和0.26±0.01,及0.28±0.02,0.19±0.01和0.27±0.01,与模型对照组比较均明显降低(P<0.01)。结论lactuside B可降低海马和纹状体TRPM7基因的表达,提示该化合物对脑缺血损伤可能具有治疗作用。

Lactuside B对脑缺血再灌注损伤后大鼠海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响

目的探讨高翅果菊提取物Lactuside B(LB)对大鼠脑缺血/再灌注损伤海马和纹状体神经生长因子mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠,随机分为6组(8只/组)即模型组、假手术组、阳性对照组、LB高剂量、中剂量和低剂量组。采用大脑中动脉阻塞2 h再灌注24 h和72 h动物模型、各组在相应时间点处死一半动物,以RT-PCR技术分别检测大鼠海马和纹状体不同时间段NGF mRNA的表达情况。结果模型组NGFmRNA在海马和纹状体表达明显增多,再灌注72 h海马和纹状样NGF mRNA表达显著下降;在海马,用药后LB各剂量组NGF mRNA表达增多,与模型组比较有显著差异(P<0.01);与阳性对照组比较中、低剂量组有显著差异(P<0.01),且中、低剂量组用药72 h时NGF mRNA表达较多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。在纹状体,LB各剂量组NGF mRNA表达同样增加,与模型组比较有显著差异(P<0.01),与阳性对照组比较其低、中、高剂量组均有显著差异(P<0.01或P<0.05),LB用药72 h时中、低剂量组NGF mRNA表达更多,与用药24 h比较有显著差异(P<0.05)。结论 LB对大鼠海马和纹状体的NGF基因产生了较大的影响,其抗脑缺血再灌注损伤的作用机制可能与LB能够上调二部位的NGF mRNA有关。

高翅果菊化学成分及lactuside B的抗脑缺血活性研究

目的研究高翅果菊Pterocypsela elata根茎中的主要化学成分,探讨lactuside B的抗脑缺血活性。方法采用柱色谱对植物中的提取物进行分离提纯,并利用现代波谱方法分析鉴定,确定化合物的结构;采用大鼠不完全性脑缺血模型,测定大鼠脑组织的含水量、MDA和SOD值,检测lactuside B的抗脑缺血活性。结果从该植物中分离出10个化合物,分别鉴定为莴苣苷B(lactuside B,1)、11β,13-二氢莴苣内酯乙酸酯(2)、β-谷甾醇(3)、胡萝卜苷(4)、(24R)-5α-豆甾-7,22(E)-二烯-3α-醇(5)、3,3′,4-三甲氧基鞣花酸(6)、β-香树脂醇(7)、齐墩果酸(8)、二十六碳酸(9)、硬脂酸(10)。其中化合物1为主要成分,得率0.15%;lactuside B可降低脑组织含水量,降低缺血后脑组织MDA的量,升高SOD的量。结论 10个化合物均为首次从该植物中分离获得,化合物1为主要成分,具有明显的抗脑缺血作用。

Lactuside B对大鼠脑缺血再灌注损伤大脑皮质bcl-2、bax mRNA及其蛋白表达的影响

探讨高翅果菊根茎中主要成分lactuside B对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质bcl-2、bax mRNA及其蛋白表达的影响。建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,各组给予相应的实验药物,分别在缺血再灌注24和72 h处死所需动物,采用TTC染色法检测脑梗死体积,逆转录多聚酶链反应和免疫组化二步法分别检测bcl-2、bax mRNA及其蛋白在大鼠大脑皮质的表达情况。结果表明,lactuside B各剂量组均可缩小大鼠脑皮质的梗死体积,提高bcl-2 mRNA的表达、降低bax mRNA的表达,且12.5和25 mg.kg-1剂量组bcl-2、bax mRNA的比值较高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01);总体上12.5和25 mg.kg-1剂量组作用较好,优于阳性对照药尼莫地平(P<0.05或P<0.01),用药72 h的脑梗死体积、bcl-2、bax mRNA与24 h比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。另外,bcl-2和bax蛋白的表达情况与其基因表达趋势基本一致。以上结果提示,lactuside B可能通过上调bcl-2 mRNA增加其蛋白的表达和下调bax mRNA减少其蛋白的表达,在一定程度上发挥较好的抗脑缺血作用。

Lactuside B增加大鼠脑缺血后海马和纹状体GRP78 mRNA的表达

目的:探讨高翅果菊提取物Lactuside B对大鼠脑缺血后海马和纹状体GRP78mRNA表达的影响。方法:清洁Ⅱ级SD雄性大鼠,体质量280～320g,随机分为6组,即:模型组、假手术组、阳性药物对照组(尼莫地平1mg·kg-1)、Lactuside B12.5、25和50mg·kg-1组,每组8只。采用大鼠大脑中动脉阻塞法复制脑缺血再灌注损伤模型,所有大鼠均阻塞2h再灌注。各组动物于再灌注后给予腹腔注射相应的实验药物(模型组、假手术组动物给予等体积的纯化水),bid,给药1d和3d后分别处死各组的4只动物取脑备用。神经缺失症状评分法进行神经功能测定;RT-PCR技术分别检测大鼠海马和纹状体不同时间段GRP78mRNA的表达。结果:给药1d和3d后,Lactuside B各剂量组动物的神经行为学评分均降低,与模型组比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01);Lactuside B各剂量组动物海马和纹状体的GRP78mRNA表达均明显增多,与模型组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01);除用药1d时纹状体GRP78mRNA的表达在各组间有量效关系外,其余各组的高剂量组作用较差;海马的Lactuside B各剂量组GRP78mRNA的表达优于阳性对照组(P<0.05或P<0.01),而纹状体只有用药3d时此种作用才明显。结论:Lactuside B的抗脑缺血作用与其持续上调海马和纹状体的GRP78mRNA表达有关。

Lactuside B对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质和海马CHOP mRNA表达的影响

目的探讨lactuside B对脑缺血再灌注损伤大鼠海马和纹状体转录因子CHOP mRNA表达的影响。方法 SD雄性大鼠,280～320 g,随机分为缺血再灌24 h假手术组、模型组、阳性对照组、lactuside B 12.5、25、50 mg.kg-1组和缺血再灌72 h组,共12组,每组4只。采用大鼠大脑中动脉缺血再灌注损伤模型,选取神经缺失症状评分为1～3分的动物入组,各组动物均按5 mL.kg-1的容积腹腔注射相应的实验药物。大鼠脑缺血2 h,于再灌注24和72 h后分别处死动物,逆转录聚合酶链反应技术检测大鼠脑海马和纹状体组织不同时间点CHOP mRNA的表达。结果不同再灌时间的模型组动物神经缺失症状评分增高,与假手术组相比有显著性差异(P<0.01);用药后阳性对照组和lactuside B各剂量组的神经缺失症状评分均下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。另外,结果显示3个剂量组(12.5、25和50 mg.kg-1)的lactuside B均能降低大鼠大脑皮质与海马CHOP mRNA的表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),其多数剂量组的作用优于阳性对照药尼莫地平(P<0.01)。总体上各组存在较好的量效关系,但只有中剂量组有较好的时效关系。结论 Lactuside B的抗脑缺血作用与其下调大鼠大脑皮质和海马的CHOP mRNA表达有关,有一定的研发价值。