肿瘤治疗第四程式中LAK细胞研究进展

人们尝试用自身肿瘤疫苗、特异性抗肿瘤血清和非特异性免疫治疗肿瘤,尚未找到一种疗效十分肯定的免疫疗法的原因在于:1.癌症病人免疫机能低下或丧失,不足以对抗恶性肿瘤的过速生长;2.假设的肿瘤抗原不能有效地刺激机体产生足够的免疫应答;3.由于病人机体免疫应答低下。

增强PHA-LAK细胞诱导激活新途径的研究

本研究应用PHA、抗CD3单抗(aCD3)和rIL-2共同刺激人外周血单个核细胞(PBMC),诱生、扩增新型抗肿瘤效应细胞PHA-aCD3LAN,并与PHA-LAk和CD3AK细胞在某些生物学特性方面进行了比较,结果表明,PHA、aCD3和IL-2具有协同增强效应、使PHA-aCD3LAK细胞的增殖能力、细胞毒活性、mIL-2Ra的表达水平及对IL-2的利用均高于PHA-LAK和CD3AK细胞;三组效应细胞均为异质性细胞群体,均以CD3^+ CD8^+T细胞为主,而PHA-aCD3LAK的CD8^+细胞百分率高于其它两组细胞.采用PHA-aCD3LAK可进一步提高LAK细胞的数量和活性。

A-LAK/IL-2局部应用抗肿瘤作用的研究

目的 观察A-LAK和NA-LAK的体外生长与增殖,研究A-LAK/IL-2局部注射的体内抗肿瘤作用。方法 绘制A-LAK和NA-LAK生长曲线。小鼠体内作A-LAK/IL-2抗肿瘤治疗实验。结果 A-LAK在培养第10天时达到增殖高峰增加16.08倍,而NA-LAK增殖高峰在第7天仅增加3.36倍。体内实验表明,A-LAK/IL-2肿瘤旁局部注射与全身应用相比,能明显抑制肿瘤生长,延长动物存活期(P<0.05)。结论 A-LAK具有增殖倍数高,抗瘤活性强的特点,局部注射是强于静脉给药的给药途径。

LAK,A-LAK体外对人肝癌细胞株的杀伤研究

ＬＡＫ／ＩＬ－２疗法是肿瘤生物治疗中常用的疗法，因其有局限性，故寻找高效低毒价廉的新型抗瘤免疫活性细胞成为目前生物治疗的新方向。Ａ－ＬＡＫ细胞（ａｄｈｅｒｅｎｔＬＡＫＣｅｌｓ）是指在培养过程中能粘附塑料培养器皿表面的一种以大颗粒淋巴细胞为主的一组ＬＡ...

LAK细胞免疫活性研究

本文用^(51)Cr-铬酸钠释放法分析了由PBL、SPC和THC制备的LAK细胞免疫活性变化规律。证明LAK细胞的NK活性和LAK活性与IL-2有非常明显的正向依赖关系,与培养细胞密度有明显的负向依赖关系。无IL-2诱导,不表现LAK活性,在低细胞密度条件下少量的IL-2即可激活LAK细胞,细胞密度增大,IL-2剂量需要相应增加,用2×10~6/ml细胞密度制备LAK细胞,诱导LAK细胞活性的最佳IL-2剂量为1000 IU/ml。单用IL-2激活LAK细胞,NK活性高峰时相在48h左右;LAK活性高峰时相在60h前后。LAK细胞杀伤活性可以在培养液中维持1～2天时间,要在较长时间内维持LAK细胞活性,须定期更换培养基,添加IL-2。LAK细胞杀伤活性与细胞形态学变化不完全同步。

人LAK及LI-LAK细胞对S_(180)荷瘤小鼠的治疗作用

用LAK和LI－LAK两种细胞进行S180荷瘤小鼠体内抗肿瘤试验。结果表明，人LAK细胞及LI－LAK细胞有明显的体内抗S180肉瘤作用，S180荷瘤鼠存活期显著延长，其平均存活时间分别为45．3和49．6d，且部分可完全治愈；而未用药的对照组鼠只平均存活21.1d，仅用IL－2治疗的荷瘤鼠平均存活时间为35．9d。同时可知，两实验组中两种细胞作用程度相差不大（P＞0．05）。

影响LAK细胞抗肿瘤因素的实验研究

在IL—2/LAK疗法中,寻找高效低毒的LAK活性调节剂是十分重要的。本文选用细胞因子、多糖、化疗类来研究它们对LAK活性的影响。结果表明:IL—6、α-IFN、TNF-β在体外诱导中能增加LAK活性,对LAK增殖无影响;Len、Lps促进LAK活性;化疗药对LAK杀伤活性作用不同,CTX、ADM对LAK细胞杀伤活性无影响,MMC降低LAK活性。提示细胞因子、多糖在LAK疗法中具有应用价值。

TNFα影响LAK细胞、化疗药物抗胃癌作用的实验研究

本文观察了TNFχ对LAK细胞、化疗药物抗胃癌作用的影响,探讨TNFχ联用IL-2/LAK、化疗药物以提高其单独应用的抗胃癌效应。

人同种异体脾LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤52例临床观察

本文在人胎脾细胞ＬＡＫ活性诱导，增殖反应能力的基础上，探讨了人胎脾ＬＡＫ细胞制备，质量控制及临床应用的安全性、可靠性及疗效。共治疗５２例晚期恶性肿瘤病人。结果显示：全部病人都有不同程度地改善了一般症状和体征，提高了生活质量，对减轻癌性疼痛和消除癌性胸腹水效果明显。５２例患者中，完全缓解６例（１１％），部分缓解１４例（２７％）．作者认为：该疗法与国内同类方法相比，以人胎脾细胞作为ＬＡＫ前体细胞，取代了传统的自体或异体外周血淋巴细胞，ＬＡＫ细胞获取量大，治疗效果肯定，副作用轻，具有一定的应用价值。

人胚脾LAK细胞体外抗肿瘤作用的实验研究

本文对人胚脾ＬＡＫ细胞的制备及其体外抗肿瘤作用进行了实验研究，为临床推广应用提供了可行性的依据。实验表明，在红细胞低渗休克法，溶血盐法，淋巴细胞分离液分离法中，以最后一种方法制备人胚脾ＬＡＫ前体细胞的效果最佳。用重组白细胞介素２诱导的人胚脾ＬＡＫ细胞在培养的第５～８ｄ对Ｋ５６２靶细胞的细胞毒活性最高，达６５．１％；而对Ｒａｊｉ靶细胞的细胞毒活性较低，在培养的第５ｄ为２６．７％。由此可见，人胚脾ＬＡＫ细胞对Ｋ５６２和Ｒａｊｉ两种肿瘤细胞均有杀伤活性。

LAK细胞的研究进展

LAK细胞是80年代发现的一种新的细胞毒性淋巴细胞。平时处于抑制状态,当被诱导因子激活增殖后,对人体内的肿瘤细胞具有很强的杀伤作用,而对人体内的正常组织细胞几乎不破坏。对中、晚期癌症有一定的疗效,尤其对肾癌、黑色素瘤及肝癌等疗效较好。本文就LAK细胞的特性、制备、测定方法、体内分布。

恒定磁场对LAK细胞增殖及杀伤活性的影响

采用恒定磁场对LAK细胞的增殖及杀伤活性的影响进行了研究.实验结果发现,磁场组可促使IL-2/LAK细胞增殖,增殖高峰为第10～13天,13d后逐渐下降.磁场130mT为14.0倍.230mT为18.0倍,270mT为12.0倍.对照组分别为3.0、3.3、

石斛多糖增强脐带血和肿瘤病人外周血LAK细胞体外杀伤作用的研究

目的：探讨石斛多糖（ dendrobium candidum polysaccharide,DCP）与 rIL- 2联合应用对脐带血 LAK细胞（ CB-LAK）和肿瘤病人外周血 LAK细胞（ PB-LAK）体外杀伤肿瘤细胞作用的影响。方法：应用 3H-TdR释放法测定 CB-LAK和 PB-LAK细胞的杀伤活性。结果：① rIL-2(500 u/ml)能明显提高 CB-LAK对 Raji细胞的杀伤活性 ,0 h的 CB-LAK活性为 13.63％ ,rIL-2(500 u/ml)诱导 48、 72、 96、 120 h后 ,CB-LAK活性分别提高至 22.28％、 26.23％、 28.55％和 25.76％ (P0.05）；③ DCP（ 200 mg/L）与 rIL-2（ 500 u/ml）联合培养 96 h，显著增强 PB-LAK杀伤活性。 10例恶性肿瘤病人外周血（ DCP＋ rIL-2）组与单纯 rIL-2组诱导的 PB-LAK平均活性分别为 34.78％和 23.24％ 。

乌贼墨诱生小鼠IFN-γ及调节LAK细胞活性的研究

为进一步研究乌贼墨对免疫功能的刺激作用 ,本文采用 ELISA技术和生物活性测定技术分别检测了经乌贼墨灌胃后小鼠血清中的 IFN- γ的水平和 L AK细胞活性的变化。结果显示 ,实验组小鼠 IFN- γ的水平于乌贼墨灌胃后 2 4 h开始升高 ,4 8h达高峰 ,72 h降至正常水平。L AK细胞杀伤活性也有明显增强 ,与对照组小鼠相比 ,差异显著 (P<0 .0 1)。

病毒性心肌炎NK和LAK细胞活性与心肌损伤的关系

目的：系统地观察病毒性心肌炎，尤其是柯萨奇Ｂ组病毒（ＣＶＢ）心肌炎患儿自然杀伤细胞（ＮＫ）和淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ）活性，并分析两者的内在关系，以及与心肌损伤的关系。方法：５６例病毒性心肌炎患儿，年龄３～１２岁，男２６例，女３０例；另设对照组３０例，年龄３～１２岁，男１６例，女１４例。采集静脉血，应用３Ｈ－ＴｄＲ标记法测定ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性。结果：（１）心肌炎时ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性均明显下降；（２）心肌炎时ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性间存在明显的正相关（ｒ＝０．７２，Ｐ＜０．０１）；（３）ＣＶＢ心肌炎患儿的ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性下降更显著，且心脏增大和心电图明显异常者发生率亦高于非ＣＶＢ心肌炎者。结论：病毒性心肌炎，尤其是ＣＶＢ心肌炎对ＮＫ及ＬＡＫ细胞活性有明显影响。在病毒性心肌炎诊疗中应同时检测ＮＫ和ＬＡＫ细胞活性。

抗NKG2D多克隆抗体抑制NK和LAK细胞细胞毒效应的研究

目的 :分析抗NKG2D多克隆抗体 ( pAb)对NK和LAK细胞毒作用的影响。方法 :应用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 (PBMC) ,经 10mg/LPHA和 1× 10 6U/LrhIL 2诱导LAK细胞产生 ,再应用流式细胞术 (FCM)分选NK细胞并进行表型检测。加入抗NKG2DpAb封闭NK和LAK细胞表面的NKG2D分子后 ,用MTT比色法检测其细胞毒效应。结果 :经FCM分析证实 ,获得高纯度、高活性的NK细胞。抗NKG2DpAb能显著抑制NK和LAK细胞对K5 6 2、HepG2细胞的细胞毒效应。NK细胞对两种靶细胞的细胞毒效应分别下降了 82 .9%和 75 .6 % ;LAK细胞对两种靶细胞的细胞毒效应分别下降了 5 2 .8%和 5 0 .2 %。但抗NKG2DpAb不能显著抑制两种效应细胞对人鼻咽癌细胞系CNE的细胞毒效应。结论 :抗NKG2DpAb可通过封闭NK和LAK细胞表面的NKG2D分子 。

红芪多糖增强LAK细胞对膀胱肿瘤细胞的杀伤作用

用ＭＴＴ法观察了红芪多糖（ＨＰＳ）对ＬＡＫ细胞的影响，结果表明ＨＰＳ无明显的促进ＬＡＫ细胞扩增的作用，但与ＬＡＫ细胞或ＰＢＭＣ合用可显著增强对膀胱肿瘤细胞株ＥＪ和原代肿瘤细胞的杀伤作用。

腹腔内注射TNF基因转染的LAK细胞对于腹水型肝癌小鼠的疗效

在逆转录病毒介导下将TNF基因转染入鼠LAK细胞中,结果发现,转染TNF基因的LAK细胞比正常LAK细胞和转染对照基因的LAK细胞分泌更高水平的TNF,其体外生长能力和杀伤活性均显著升高,抗TNF单抗可显著抑制其体外杀伤活性,表明其杀伤活性升高是由基因转染后所表达的TNF介导的.将较低数量的TNF基因转染的LAK细胞与IL～2联合腹腔内注射后,对腹水型肝癌小鼠有显著的治疗效果.

LAK细胞和IL－2联合化疗治疗晚期肺癌的近期疗效观察

ＬＡＫ细胞和ＩＬ－２是目前常用的肿瘤生物制剂。自１９９２年以来，对１８例晚期肺癌，男１５例，女３例，年龄２９～６４岁，进行ＬＡＫ细胞和重组ＩＬ－２联合化疗治疗。选择胎脾、胸腺的淋巴细胞做前体细胞，体外用重组ＩＬ－２诱导制备ＬＡＫ细胞，每输３次ＬＡＫ细胞为一疗程、每次输入细胞数０．５～１．０×１０９。化疗采用环磷酰胺，长春新碱，阿霉素为主的方案。治疗结果：完全缓解（ＣＲ）５例，部分缓解（ＰＲ）７例，无效（ＮＲ）３例，病情平稳３例，有效率ＣＲ＋ＰＲ达６６％。采用本疗法后病人精神及饮食好转，能有效缓解胸痛、减轻病人痛苦。提示ＬＡＫ细胞和重组ＩＬ－２联合化疗对晚期肺癌是一种可行的有效治疗，但在临床应用中要注意毒性反应。

γδT细胞、NK细胞及LAK的部分抗肿瘤生物特性比较

目的 :通过体外分离、增殖培养获取γδT细胞、NK细胞和LAK细胞 ,并比较了 3种细胞的抗肿瘤的生物学特性。方法 :收集用不同单抗分别包装被粘附的细胞 ,然后通过MACS细胞分选仪的分选 ,获取的细胞进行细胞增殖动力学、细胞表型、细胞杀伤活性的测定以单抗阻断效应的分析。结果 :经MACS分离得到的γδT细胞 ,培养 2w后细胞数扩散 6 0 0～ 80 0倍 ,CD3、CD8和γδ细胞表达阳性率分别是 72 2 9%、5 8 0 2 %和 6 5 98%。γδT细胞对NK敏感细胞K5 6 2以及NK不敏感细胞Raji和XG 7这 3种不同靶细胞均有较高的杀伤率 ,分别为 35 98%、42 2 7%和 6 9 0 8% ;NK细胞对此 3种细胞的杀伤率分别是45 12 %、12 34%和 2 9 2 7% ;LAK细胞的杀伤率分别为 44 0 1%、2 9 2 7%和 2 5 6 8%。γδT细胞对经MHC Ⅰ类单抗阻断前后的K5 6 2、Raji和XG 73种靶细胞的杀伤率无明显改变。结论 :γδT细胞、NK细胞和LAK细胞都具有一定的非特异性杀伤肿瘤细胞的作用 ;γδT细胞对MHC Ⅰ类单抗阻断后的肿瘤细胞的杀伤无明显变化 。