胃癌组织RRBP1、LAMB3的mRNA表达水平及其与患者临床病理特征、预后的关系

目的探讨胃癌组织内质网核糖体结合蛋白1(RRBP1)、层粘连蛋白亚基β3(LAMB3)的mRNA表达水平及其与患者临床病理特征、预后的关系。方法收集373例胃癌患者的胃癌组织标本和癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR检测胃癌组织和癌旁组织中RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平,分析RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系,绘制生存曲线分析胃癌组织中RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平与患者预后的关系,采用COX回归模型分析胃癌患者预后的影响因素。结果与癌旁组织相比,胃癌组织中RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平升高(P<0.05)。肿瘤直径≥4 cm、分化程度为低或未分化、浸润深度为T_(3)~T_(4)、发生淋巴结转移及远处转移的胃癌患者RRBP1 mRNA表达水平更高(P<0.05);分化程度为低或未分化、浸润深度为T_(3)~T_(4)、发生淋巴结转移及远处转移的胃癌患者LAMB3 mRNA表达水平更高(P<0.05)。RRBP1高表达组和LAMB3高表达组的3年生存率分别低于RRBP1低表达组和LAMB3低表达组(P<0.05)。COX回归分析结果显示,RRBP1 mRNA高表达、LAMB3 mRNA高表达、低或未分化程度、T_(3)~T_(4)浸润深度和发生淋巴结转移均是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论RRBP1和LAMB3 mRNA在胃癌组织中高表达,且与患者临床病理特征和预后密切相关。

S1P/S1PR1通路调节LAMB3的表达对食管鳞癌细胞迁移、黏附和转移的影响

该文主要探讨1-磷酸鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)/1型1-磷酸鞘氨醇受体(sphingosine 1-phosphate receptor 1,S1PR1)通路调节层黏连蛋白亚基β3(laminin subunit beta 3,LAMB3)的表达对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移、黏附及转移的影响。使用GEO数据库分析LAMB3在ESCC癌组织与癌旁正常组织中的表达差异情况;用Western blot检测人食管上皮细胞HEEC及人食管鳞癌Eca109、TE-1、KYSE-150细胞中LAMB3的表达量;用S1P处理TE-1细胞,或在Eca109细胞中敲低或过表达S1PR1,采用Western blot检测LAMB3的表达情况;S1PR1-EGFP过表达载体和LAMB3小干扰RNA(siRNA)共转染Eca109细胞,采用划痕实验检测迁移能力;采用LAMB3 siRNA或LAMB3短发夹RNA(shRNA)下调ESCC细胞LAMB3的表达,过表达LAMB3的慢病毒上调ESCC细胞LAMB3的表达,通过CCK8法、划痕实验、细胞–基质黏附实验分别检测ESCC细胞的增殖、迁移和黏附能力,Western blot检测上皮–间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白及基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)的表达情况;裸鼠尾静脉注射LAMB3 shRNA敲低的Eca109细胞,观察其转移能力及生存期。结果显示,LAMB3在ESCC癌组织及ESCC细胞中的表达均高于癌旁正常组织及正常食管上皮细胞;S1P作用后的TE-1细胞LAMB3表达水平增高;在Eca109细胞中敲低S1PR1,LAMB3表达下调;在Eca109细胞中过表达S1PR1,LAMB3表达上调,促进细胞迁移,并且干扰LAMB3表达可抑制上述作用;敲低LAMB3的表达,Eca109、TE-1细胞增殖无显著变化,而迁移、黏附受到明显抑制,过表达LAMB3后,Eca109细胞增殖无显著变化,而迁移、黏附增强;LAMB3 shRNA敲低的Eca109细胞EMT过程被抑制,MMP9表达降低,过表达LAMB3则出现相反的效应;与NC shRNA组相比,注射LAMB3 shRNA敲低的Eca109细胞的裸鼠生存期明显延长,肿瘤体内转移灶减少。该研究得出,LAMB3在ESCC细胞及组织中表达上调,S1P/S1PR1通路能诱导LAMB3的表达,促进ESCC细胞的体外迁移、黏附和体内转移。