α-细辛醚对难治性癫痫细胞模型及Laminin β_1的影响

目的研究α-细辛醚对难治性癫痫细胞模型的影响及对laminin β1表达的干预作用,探讨α-细辛醚抗癫痫的作用机制。方法体外培养海马神经元至第9天,随机将培养细胞分为正常对照组、模型组、模型+α-细辛醚(7.5μg/ml)组、模型+α-细辛醚(15μg/ml)组、模型+α-细辛醚(30μg/ml)组、模型+2μl无水乙醇组,观察各组神经元的形态学变化,检测各组细胞培养液乳酸脱氢酶(LDH)在12,24,48 h的变化。采用荧光定量PCR(FQ-PCR)和免疫组化检测各组laminin β1在处理后24 h的表达变化。结果①造模后少数神经元会发生迁移、融合,加α-细辛醚组均能减少神经细胞膜LDH的渗透。②在24 h,模型组lamininβ1 mRNA表达增加,各浓度α-细辛醚均能抑制laminin β1 mRNA的表达(均P<0.05)。③免疫组化显示laminin β1蛋白在细胞质和细胞外基质表达,平均光密度值:对照组(0.094 7±0.025 86),模型组(0.135 1±0.026 16),模型+30μg/mlα-细辛醚组(0.097 9±0.032 81)。结论α-细辛醚能减少难治性癫痫细胞模型神经元的细胞膜损伤,抑制laminin β1基因及蛋白的过度表达,这可能是α-细辛醚抗癫痫的作用机制之一。

难治性癫痫细胞模型中Lamininβ1的表达及意义

目的研究难治性癫痫细胞模型中lamininβ1表达的变化,探讨lamininβ1在难治性癫痫形成中的作用。方法 SD新生乳鼠,迅速断头后取出双侧海马,体外培养海马神经元至第9天,随机分为对照组和模型组,采用荧光定量PCR检测两组12h、24h和48h lamininβ1mRNA表达,免疫组化技术检测lamininβ1蛋白的表达。结果荧光定量PCR显示在12h后模型组lamininβ1mRNA表达增加(P<0.05),且随着时间延长表达增强。在24h,免疫组化显示模型组lamininβ1蛋白表达增强(平均光密度值:对照组0.0947±0.0259vs模型组0.1351±0.0262,P<0.01).结论难治性癫痫细胞模型中lamininβ1表达增加,提示lamininβ1可能参与难治性癫痫的形成过程。

高糖对血管内皮细胞层粘连蛋白α1的表达影响

目的分析高糖对视网膜血管内皮细胞中层粘连蛋白α1(LAMA1)的影响。方法体外培育视网膜血管内皮细胞(RF/6A),设置4种糖浓度培养液(5、15、25、35 mmol/L),其中5 mmol/L作为对照组,15、25、35 mmol/L作为高糖组。观察不同糖浓度培养液处理后的细胞生长情况,LAMA1的表达情况、检测细胞的迁移、增殖能力变化。结果随着观察时间的延长,高糖环境下细胞的生长速度增加,糖浓度越高,相对应生长速度越快。免疫荧光法检测发现,在处理24、48 h后,LAMA1在细胞质中表达,在高糖组(25、35 mmol/L)中表达量较对照组减少。处理24 h时,高糖组(25、35 mmol/L)中LAMA1蛋白表达量低于对照组(t分别=4.40、5.20,P均<0.05);处理48 h时,高糖组(35 mmol/L)LAMA1蛋白表达量和mRNA表达均低于对照组(t分别=6.80、4.23,P均<0.05)。在处理48、72 h后,高糖组(15、25、35 mmol/L)细胞的迁移能力较对照组明显增加(t分别=6.78、10.47、10.00、10.78、10.78、10.78,P均<0.05)。处理48、72、96 h后,高糖组(25、35 mmol/L)的细胞增殖能力明显高于对照组(t分别=6.68、4.60、3.89、4.09、4.29、4.37,P均<0.05)。结论高糖短期内刺激了细胞的生长、迁移、增殖,但抑制了LAMA1蛋白的表达,LAMA1可能参与了糖尿病视网膜病变的发生发展,并可能起到一定的保护作用。

大鼠实验性脑室出血后LN及LNR-1在脑内的表达及意义

目的观察大鼠脑室出血后层粘蛋白(LN)及其受体LNR-1在大鼠脑内的表达变化,探讨其与出血后慢性脑积水之间的关系。方法将大鼠随机分为3组:正常对照组、假手术对照组、实验组,将枸橼酸化的0.1 ml自体静脉血注入实验组大鼠侧脑室内建立出血后慢性脑积水模型(假手术组注入0.1 ml生理盐水),采用免疫组化方法观察出血后不同时间LN及LNR-1在脑内的表达变化。结果实验组30 d出现脑积水为80%(4/5)、其余组别未出现慢性脑积水;实验组出血后LN在纵裂池、软脑膜、蛛网膜、硬膜、脑内毛细血管壁、蛛网膜下腔血管壁的表达在3 d时增加,7 d表达继续增加,14 d表达最强,较对照组、假手术组显著增强(P<0.01),30 d仍强烈表达;实验组出血后LNR-1在脉络丛的立方上皮细胞胞浆及顶质膜、室管膜细胞、软脑膜细胞、蛛网膜细胞、硬膜、纵裂池、胶质细胞的表达增加。LNR-1在蛛网膜下腔的表达变化与LN基本一致。结论大鼠脑室出血后LN及LNR-1的表达上调可能参与蛛网膜纤维化的过程,从而在出血后慢性脑积水的形成中发挥重要作用。

高糖对人肾小球系膜细胞细胞间黏附分子-1及层黏连蛋白表达的影响

目的探讨高糖对人肾小球系膜细胞表达细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,I-CAM-1)及层黏连蛋白(laminin,LN)的影响。方法将培养的人肾小球系膜细胞分为正常糖对照组、高糖组和甘露醇对照组,分别在24、48、72h收集培养液上清,采用ELISA法检测上清液中ICAM-1和LN的表达。结果人肾小球系膜细胞表达ICAM-1在24h开始升高,48h达高峰,72h下降。LN表达呈时间依赖性。且高糖组ICAM-1及LN的表达显著高于正常糖对照组及甘露醇组(P<0.05),正常糖对照组与甘露醇组对比ICAM-1及LN的表达差异无显著性(P>0.05)。结论高糖可导致人肾小球系膜细胞ICAM-1及LN表达增加。I-CAM-1对肾脏可能具有炎性损伤作用,LN的增加表明肾小球系膜外基质的过度表达,二者均可促进糖尿病肾病的发生发展。从而为糖尿病肾病的治疗提供了新靶点。

肝病患者血清中TIMP-1与HA、PCⅢ、CⅣ、LN水平的相关性

目的了解肝病患者血清中基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)与透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(CⅣ)和层粘连蛋白(LN)的相互关系及临床意义。方法425例肝病患者和110例正常对照者采用双抗体夹心酶联免疫吸附方法(ELISA)测定血清TIMP-1,放射免疫分析法测定HA、PCⅢ、CⅣ和LN和全自动酶法测定血清总胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)。结果与健康正常人对照比较,肝病患者五项指标均有不同程度的升高,除慢性肝炎轻度组CⅣ含量水平与对照组无统计学意义外,其余各组均与对照组有显著性差异(P<0.01)。其中唯有TIMP-1血清含量水平从急性肝炎至肝硬化依次进行性升高,慢性肝炎轻度组与急性肝炎组相比,t=2.603,P<0.01。血清TIMP-1与HA、PCⅢ、CⅣ和LN呈显著正相关(P<0.01),与TBA、ALT呈正相关(P<0.05),并随肝脏病损纤维化程度加重而检出阳性率逐渐增高(P<0.005)。结论五项指标均可不同程度的反映肝脏的纤维化程度,其中以血清TIMP-1更为可靠、有效。

高糖对人肾小球系膜细胞分泌单核细胞趋化蛋白1及层黏连蛋白的影响

目的通过体外试验研究高糖对人肾小球系膜细胞(HMC)分泌单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和层黏连蛋白(LN)的影响。方法用高糖干预体外培养的HMC,以ELISA法检测细胞培养上清的MCP-1和LN水平。结果高糖组培养上清在不同时点(24,48,72h)MCP-1和LN的表达水平明显高于正常糖组和甘露醇组(P<0.05)。高糖干预24h后,培养上清MCP-1和LN水平开始升高,于72h达峰值,正常糖组和甘露醇组未见显著升高(P<0.05)。结论高糖呈时间依赖方式增加HMC对MCP-1和LN的分泌,而正常糖和甘露醇无此作用。MCP-1和LN的增加是由于高糖而非高渗所致,提示高糖所致的炎性反应可能参与糖尿病肾病的发生和发展。

重组胸腺素β4调节ICAM-1、MMP-2和LN-5促进创伤愈合的实验研究

目的探讨重组胸腺素β4(Thymosin β4,Tβ4)通过改善创面基质环境促进大鼠皮肤创伤愈合的作用机制。方法在大鼠背部制作直径8mm的全层皮肤损伤模型,动物分为对照组(PBS)、Tβ4低剂量组、Tβ4中剂量组、Tβ4高剂量组,每组5只,每天两次给药,2d、4d、7d取材,行ICAM-1(Intercellular adhesion molecule-1)、MMP-2(Matrix metallopoproteinase-2)、LN-5(Laminin-5)的免疫组化并进行平均积分光密度(IOD)分析。结果经Tβ4处理后的创面,ICAM-1阳性表达多,早期中、高剂量组表达较强(p<0.01),中期均减弱,高剂量组相对较强;晚期各组表达增强,高剂量组最强(p<0.01)。MMP-2早期对照组表达最高(p<0.01),高剂量组最弱(p<0.01);中期中剂量组表达明显(p<0.05);晚期基质阳性明显增多,对照组表达最强(p<0.01),高剂量组最弱(p<0.01)。LN-5早期各组均可见较多的阳性表达,对照组与低剂量阳性强(p<0.01),中剂量组阳性最少;中期中剂量组表达最强(p<0.01);晚期中剂量组仍然有较强的阳性表达(p<0.01)。结论Tβ4可能是通过调节ICAM-1、MMP-2、LN-5的表达,改善创面基质环境,促进皮肤创伤愈合。

来氟米特对糖尿病大鼠葡萄糖转运蛋白-1 mRNA表达及细胞外基质的影响

目的:探讨来氟米特对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠肾脏葡萄糖转运蛋白-1(GLUT)mRNA表达及细胞外基质的影响及其意义。方法:采用STZ腹腔注射法建立糖尿病动物模型。将大鼠随机分为正常对照组(A组),糖尿病组(B组),来氟米特干预组(C组)。第4、8、12周末各组随机选取4只大鼠处死并收集标本,记录体重、右肾重、检测血糖、血肌酐、血尿素氮、血胆固醇、血三酰甘油、24h尿蛋白排泄量。用RT-PCR方法检测肾皮质GLUT-1 mRNA表达水平。肾组织行HE、PAS染色,并用免疫组化法检测肾组织层黏连蛋白及Ⅳ型胶原蛋白的表达情况。结果:(1)与A组相比,B组大鼠造模成功后0周,血糖明显增高(P<0.01),但24h尿蛋白排泄量无明显增高(P>0.05);4周时体重明显降低(P<0.01),肾重指数、尿素氮、肌酐、胆固醇、三酰甘油、24h尿蛋白排泄量、肾皮质GLUT-1 mRNA表达明显增加(P均<0.01);C组12周时肾皮质GLUT-1 mRNA表达量,肾重指数、肌酐已无明显增加(P>0.05)。(2)与B组相比,C组8周时尿素氮、肌酐降低(P均<0.05),胆固醇、24h尿蛋白排泄量和肾皮质GLUT-1 mRNA表达量均明显下降(P均<0.01);12周时体重增加(P<0.05),肾重指数、三酰甘油明显下降(P<0.01)。肾组织HE、PAS染色病理学观察:B组光镜下肾小球肥大,系膜细胞增生,系膜基质弥漫性的或结节性的增多,肾小球、肾小管基底膜增厚,而C组这些病理改变明显减轻。免疫组织化学染色:B组可见系膜区Ⅳ型胶原蛋白和层黏连蛋白的大量沉积,C组也可见Ⅳ型胶原蛋白和层黏连蛋白的沉积,但较B组明显减轻。结论:来氟米特能减少糖尿病大鼠尿蛋白排泄量,纠正糖尿病大鼠的脂代谢紊乱,抑制肾脏肥大、减轻肾脏的纤维化硬化程度。其机制可能与下调系膜细胞上GLUT-1 mRNA的表达量及功能活性有关,最终延缓DN的发展。

抗层粘连蛋白-1抗体与小鼠生殖障碍的相关性研究

目的：探讨抗层粘连蛋白-1（LN-1）抗体与小鼠流产、不孕等生殖障碍的相关性及糖皮质激素对改善抗层粘连蛋白-1抗体阳性小鼠生育状况的作用。方法（1）采用BALB／c小鼠，以层粘连蛋白-1为抗原构建BALB／c小鼠免疫模型（模型组），同时以单纯完全弗氏佐剂注射为对照一组，观察两组的流产率和产仔数。（2）选择免疫成功小鼠，随机分成两组，分别于妊娠当日起隔日注射1．5mg地塞米松（研究组）或等量生理盐水（对照二组）共5次，观察流产情况及产仔率。（3）ELASE法测定各组血清抗层粘连蛋白-1抗体滴度值。结果（1）对照一组妊娠率为90％，流产率为0；模型组妊娠率为8．9％，流产率为24．4％。（2）应用地塞米松组（研究组）妊娠率为20％，对照二组妊娠率为8．9％，两组流产率分别为10％和33．3％，差异具有统计学意义。（3）模型组、对照一组和地塞米松组（研究组）三组血清抗层粘连蛋白-1抗体值分别为（2．557±1．395）、（0．106±0．005）、（2．850±1．116），模型组与地塞米松组差异无统计学意义，模型组与对照一组、地塞米松组与对照一组差异具有统计学意义。结论（1）抗层粘连蛋白-1抗体与小鼠的生育障碍具有相关性。（2）糖皮质激素在改善雌鼠免疫源性生育障碍方面，可能具有积极的作用，进一步研究有望为流产的病因学提供新的理论基础。

培养人眼小梁细胞水通道蛋白1与细胞外基质的相关实验研究

目的探讨人眼小梁细胞上水通道蛋白1(aquaporin-1,AQP1)与细胞外基质中纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)、胶原蛋白Ⅰ(collagen Ⅰ,CAI)及胶原蛋白Ⅳ(collagen Ⅳ,CAIV)的相关关系。方法培养的人眼小梁细胞分别给予地塞米松(dexamethasone,DEX)0.4μg/ml(B组)、DEX0.4μg/ml+AQP1反义寡核苷酸(antisense oligonucle-otides,AS-ODN)0.625μg/ml(C组)、DEX 0.4μg/ml+AQP1AS-ODN 1.25μg/ml(D组)、DEX 0.4μg/ml+AQP1AS-ODN 2.5μg/ml(E组)、DEX 0.4μg/ml+AQP1AS-ODN 5μg/ml(F组)处理,以不加药组为对照组(A组)。5天后,采用免疫组织化学方法和计算机图像分析技术对FN、LN、CAI及CAIV的表达进行检测。结果 0.4μg/ml DEX能刺激培养的人眼小梁细胞FN、LN及CAIV表达明显增强,CAI表达减少,与A组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。在C、D、E、F组,AQP1AS-ODN可以降低由0.4μg/ml DEX引起的FN、LN、CAIV表达增强。同样的,增加由0.4μg/ml DEX引起的CAI表达减少。结论人眼小梁细胞AQP1与细胞外基质中FN、LN、CAI及CAIV关系密切。AQP1的正常表达是细胞外基质适量表达的前提。

复发性流产影响生命全程保健的免疫病因学研究——可能与抗层粘蛋白-1抗体、血管内皮生长因子及其可溶性受体相关

目的本研究探讨抗层粘连蛋白(anti-Laminin-1,抗LN-1)、血管内皮生长因子(VEGF)及其可溶性受体(s Flt-1)与复发性流产和女性保健的关系。方法 URSA组选择2015年1月至2016年12月在北京市友谊医院妇产科复发性流产专科门诊就诊的URSA患者30例,所有患者就诊前均连续自然流产2次以上,流产都发生于妊娠20周以前。对照组选择同期156例无不良妊娠史的健康妇女,对照组妇女均无肝、肾疾病,无自然流产史、早产史、血栓或出血史、妊娠期高血压疾病史,并且至少有1次成功的妊娠分娩史。本研究采用ELISE方法测定抗LN-1抗体、VEGF、s Flt-1。结果病例组与对照组血清中抗LN-1抗体、VEGF的滴度没有统计学差异(P=0. 407,P=0. 435),但是复发性流产组与对照组s Flt-1的血清滴度有统计学差异(P <0. 01)。结论复发性流产的发生可能与s Flt-1的表达增高密切相关,s Fl T-1与VEGF亲合,可降低妊娠妇女血清内VEGF的含量,阻碍VEGF促进孕妇胎盘血管的生成,干扰孕妇早期胎盘的生长发育,导致孕期内复发性流产。复发性流产病患血清中的血管内皮生长因子及其可溶性受体的表达增高可能是导致早期胚胎停育引发RSA的关键因素之一。RSA是严重危害女性健康及其生命全程包括老年期健康的常见病,病因学复杂,阐明其病因是女性涉及生命全程的保健医学的关键。

半乳糖凝集素1和层粘连蛋白在新疆维吾尔族子宫颈癌中作用的相关性研究

目的探讨维吾尔族宫颈癌发生发展过程中半乳糖凝集素1(Galectin-1),层粘连蛋白(laminin,LN)的表达及意义。方法采用免疫组化S-P法检测Galectin-1,LN蛋白在慢性宫颈炎(20例)、CINⅠ(20例)、CINⅡ-Ⅲ(20例),宫颈鳞癌(40例)中的表达。结果 Galectin-1在宫颈慢性炎症组,CINⅠ组、CINⅡ-Ⅲ组和宫颈鳞癌中的表达呈上升趋势(P<0.05),LN在各组中的表达呈下降趋势(P<0.05);并且Galectin-1与LN呈负相关(P<0.05)。结论 Galectin-1表达上调可能是维吾尔族妇女宫颈鳞癌发生的分子事件;Galectin-1和LN在维族妇女宫颈癌发生发展中可能起协同作用。

慢性肾功能不全患者血层粘连蛋白和α_1-微球蛋白测定意义及评价

目的 :为了探讨慢性肾功能不全患者血层粘连蛋白 (LN)和α1-微球蛋白 (α1-MG)含量的变化及临床意义。方法 :79例慢性肾功能不全患者以血肌酐 (Cr)水平分为氮质血症组和尿毒症组 ,用放免分析法对全部患者血清LN和α1-MG进行检测。结果 :氮质血症组与尿毒症组LN和α1-MG分别与对照组相比均有显著性差异 (P <0 .0 2 ) ,尿毒症组血清α1-MG水平明显高于氮质血症组 (P <0 .0 1) ,尿毒症组与氮质血症组血清LN水平无差异 (P >0 .0 5 )。结论

脑脊液中TGF-β1、PICP、PⅢNP、HA、LN在蛛网膜下腔出血后脑积水发生中的意义

目的探讨蛛网膜下腔出血后转化生长因子β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Ⅰ型前胶原前肽(procollagenⅠCpropeptide,PICP)、Ⅲ型前胶原前肽(procollagenⅢN-propeptide,PⅢNP)、透明质酸(hyaluronic acid,HA)及层黏蛋白(laminin,LN)在脑积水形成的过程中的作用。方法收集我院颅脑损伤及自发性颅内出血(波及到蛛网膜下腔及脑室系统)的患者,入院时不同时间点检查患者脑脊液中TGF-β1、PICP、PⅢNP、HA、LN的水平,同时随访上述患者在半年内发生脑积水的情况,比较出现与未出现脑积水患者脑脊液中TGF-β1、PICP、PⅢNP、HA、LN水平的差异。分析患者脑脊液中TGF-β1分别与PICP、PⅢNP、HA、LN表达的相关性及其时间-浓度关系。结果收集病例83例,随访半年,53例未出现脑积水(A组),30例出现脑积水(B组),结果显示,出现脑积水的患者在脑脊液各个时间点的TGF-β1、PICP、HA、LN水平均显著高于未出现脑积水的患者。83例患者脑脊液中TGF-β1与PICP、PⅢNP、HA、LN的表达呈正相关,相关系数分别为0.8248、0.7951、0.9078、0.7572。脑脊液中TGF-β1在7天时达到高峰期,之后逐渐下降,而PICP、PⅢNP、HA、LN在脑脊液中的表达是在TGF-β1达到高峰后快速上升,后缓慢下降。结论脑脊液中TGF-β1、PICP、PⅢNP、HA、LN与脑脊液系统出血后慢性脑积水的发生过程中发挥着重要作用。TGF-β1在脑脊液系统出血后的表达可能促进了PICP、PⅢNP、HA、LN的表达。

胃癌组织RRBP1、LAMB3的mRNA表达水平及其与患者临床病理特征、预后的关系

目的探讨胃癌组织内质网核糖体结合蛋白1(RRBP1)、层粘连蛋白亚基β3(LAMB3)的mRNA表达水平及其与患者临床病理特征、预后的关系。方法收集373例胃癌患者的胃癌组织标本和癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR检测胃癌组织和癌旁组织中RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平,分析RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平与胃癌患者临床病理特征的关系,绘制生存曲线分析胃癌组织中RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平与患者预后的关系,采用COX回归模型分析胃癌患者预后的影响因素。结果与癌旁组织相比,胃癌组织中RRBP1和LAMB3的mRNA表达水平升高(P<0.05)。肿瘤直径≥4 cm、分化程度为低或未分化、浸润深度为T_(3)~T_(4)、发生淋巴结转移及远处转移的胃癌患者RRBP1 mRNA表达水平更高(P<0.05);分化程度为低或未分化、浸润深度为T_(3)~T_(4)、发生淋巴结转移及远处转移的胃癌患者LAMB3 mRNA表达水平更高(P<0.05)。RRBP1高表达组和LAMB3高表达组的3年生存率分别低于RRBP1低表达组和LAMB3低表达组(P<0.05)。COX回归分析结果显示,RRBP1 mRNA高表达、LAMB3 mRNA高表达、低或未分化程度、T_(3)~T_(4)浸润深度和发生淋巴结转移均是影响胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论RRBP1和LAMB3 mRNA在胃癌组织中高表达,且与患者临床病理特征和预后密切相关。

壳多糖酶3样蛋白1在肝纤维化分期中的诊断价值

目的探讨壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在肝纤维化分期中的诊断价值。方法选择2016年1月至2018年7月在该院就诊的400例慢性肝病患者和60例健康对照者为研究对象。检测所有研究对象CHI3L1、透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)和Ⅳ型胶原(CⅣ)水平,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析CHI3L1、HA、LN、PⅢNP、CⅣ对肝纤维化分期的诊断价值。结果慢性肝病患者血清CHI3L1水平随着肝纤维化分期的增加而升高(H=165.543,P<0.001)。CHI3L1诊断有肝纤维化和无肝纤维化的曲线下面积(AUC)为0.830,阈值为81.6 ng/mL,灵敏度为59.30%,特异度为95.45%。CHI3L1诊断显著肝纤维化的AUC为0.847,高于HA(0.703)、LN(0.639)、PⅢNP(0.743)、CⅣ(0.774),差异有统计学意义(P<0.05)。CHI3L1单独检测诊断显著肝纤维化的阈值为85.1 ng/mL,灵敏度和特异度分别为72.96%和84.07%。CHI3L1单独检测诊断重度肝纤维化的阈值为94.6 ng/mL,灵敏度和特异度分别为75.86%和79.62%,AUC为0.845(95%CI:0.806~0.878),高于HA(0.677)、LN(0.662)、PⅢNP(0.767)和CⅣ(0.789),差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清CHI3L1是辅助诊断慢性肝病患者肝脏纤维化程度的良好指标,具有较好的临床应用价值。

层粘连蛋白γ1基因沉默对膀胱癌细胞增殖及细胞周期的影响

目的探讨层粘连蛋白γ1(LAMC1)在膀胱癌细胞中的表达情况,以及沉默LAMC1基因表达对膀胱癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法选取河北省邯郸市中心医院2019年1月至2021年12月收治的48例膀胱癌患者的癌及癌旁组织。采用RT-qPCR法检测UMUC3、T24、5637及J82细胞中LAMC1的m RNA表达水平。将LAMC1-si RNA质粒转染至5637细胞中,设置LAMC1沉默组和阴性对照组,RT-qPCR和Western blot验证转染效率;采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术检测LAMC1基因沉默对膀胱癌细胞增殖、克隆形成能力及细胞周期的影响,Western blot检测细胞周期相关蛋白cyclin A、cyclin D1、p16和p21的表达水平。结果5637细胞中LAMC1 m RNA表达水平较UMUC3、T24、J82细胞高(P<0.05)。癌旁组织与膀胱癌组织中LAMC1阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。LAMC1沉默组中LAMC1 m RNA和蛋白表达水平低于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中细胞增殖活力和克隆形成能力低于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中细胞中S期细胞所占百分比低于阴性对照组(P<0.01),G1期细胞所占百分比高于阴性对照组(P<0.01)。LAMC1沉默组中的cyclin D1和cyclin A蛋白的表达水平低于阴性对照组(P<0.01),而p16和p21蛋白的表达水平高于阴性对照组(P<0.01)。结论沉默LAMC1基因表达能够抑制细胞周期相关蛋白的表达从而抑制膀胱癌5637细胞增殖能力,提示其可能是膀胱癌潜在的治疗靶点。

补阳还五汤及有效组分对大鼠增生血管内膜细胞外基质蛋白表达的影响

目的:探讨补阳还五汤有效组分生物碱和苷对大鼠主动脉球囊损伤后增生内膜中细胞外基质(ECM)及其调节因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)表达的影响,揭示该方作用的物质基础及其机制。方法:大鼠随机分为假手术组、模型组、生物碱治疗组、苷治疗组、补阳还五汤原方治疗组和阿托伐他汀治疗组,以球囊导管损伤主动脉内膜后第2d开始灌胃给药,连续14d,未次给药后第2d(术后第16d)取胸主动脉损伤段,以免疫组化法测定增生内膜中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)和MMP-9、TIMP-1的表达。结果:(1)模型组Col-Ⅰ表达增强(P<0.01);补阳还五汤原方治疗组、生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组Col-Ⅰ表达显著低于模型组(P<0.01)。模型组FN表达增强(P<0.01);生物碱治疗组和阿托伐他汀治疗组FN表达强度显著低于模型组(P<0.01)。而各组LN表达强度的变化差异均无显著(P>0.05)。(2)模型组TIMP-1表达增强(P<0.05);生物碱治疗可使TIMP-1表达降低(P<0.05);而原方、苷和阿托伐他汀对TIMP-1表达的增强无显著影响(P>0.05)。模型组MMP-9表达无显著变化(P>0.05);生物碱治疗组、苷治疗组和阿托伐他汀治疗组MMP-9表达强度显著高于模型组(P<0.05);而补阳还五汤原方治疗组MMP-9表达无显著变化(P>0.05)。结论:补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可抑制增生内膜中Col-Ⅰ的表达,生物碱还可抑制FN的表达。生物碱和苷可增强MMP-9的表达,生物碱还可抑制TIMP-1的表达。提示补阳还五汤及其2种有效组分生物碱和苷可能通过抑制增生内膜中ECM的合成,促进ECM成分的清除和降解以对抗血管内膜增生。

消痰和中方对慢性胰腺炎大鼠胰腺纤维化形成及相关蛋白表达的干预作用

目的观察消痰和中方对慢性胰腺炎模型大鼠胰腺纤维化形成及相关蛋白表达的影响,探讨其作用机制。方法 24只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、胰酶组和中药组,每组6只。采用DDC溶液腹腔注射方法造模,其中胰酶组、中药组大鼠分别予胰酶、消痰和中方灌胃,定期测量大鼠体质量。4周后处死大鼠,取胰腺行病理检测及层黏连蛋白、基质金属蛋白酶-1的检测。结果经DDC溶液腹腔注射的大鼠,胰腺组织中均可见不同程度的纤维化及炎症细胞浸润。中药组大鼠在一般情况、体质量变化、胰腺病理切片评分及层黏连蛋白、基质金属蛋白酶-1表达方面均优于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论消痰和中方能有效改善慢性胰腺炎大鼠一般情况,抑制胰腺纤维化形成。其作用机制可能与降低胰腺层黏连蛋白、增强基质金属蛋白酶-1的表达有关。