海洋真菌灰绿曲霉地标蛋白编码基因AgTeaA的克隆与序列分析

为考察灰绿曲霉中地标蛋白AgTeaA对菌丝极化生长的作用,首先需要获得AgTeaA基因序列的相关信息。通过简并PCR的方法得到AgTeaA基因编码区的一段序列,以已知序列为基础通过染色体步移的方法获得基因全长及两端侧翼序列,然后通过逆转录PCR的方法确定出氨基酸序列,并利用相关生物学软件进行蛋白结构域的分析和系统进化树的构建。结果显示,AgTeaA基因编码区全长4 706 bp,对应氨基酸全长为1 477 aa,在256-320 bp,733-780 bp,1064-1150 bp处各有一个内含子。与粟酒裂殖酵母Tea1蛋白和构巢曲霉TeaA蛋白相似的是,AgTeaA在290-339 aa,340-390 aa处各有一个Kelch结构域,在818-899 aa,938-999 aa,1 021-1 116 aa,1 183-1 335 aa处各有一个卷曲螺旋(coiled coil)结构域。

糖尿病性勃起功能障碍与阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的相关研究进展

糖尿病性勃起功能障碍(Diabetic Erectile Dysfunction,DMED)与阴茎海绵体平滑肌细胞(Corporal Cavernous Smooth Muscle Cells,CCSMC)表型转化关系密切。CCSMC表型转化是一种CCSMC由“收缩型”向“合成型”或“增殖型”转化的趋势。阴茎的勃起是神经-内分泌调节下的海绵体血流动力学变化过程,其中CCSMC的舒张在此过程中起着关键作用。CCSMC表型转化的标志性蛋白包括收缩型和合成型,前者包括α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(Smooth Muscle Myosin Heavy Chain,SMMHC)等;后者包括骨桥蛋白(Osteopontin,OPN)、波形蛋白等蛋白。若收缩型蛋白表达下调或合成型蛋白表达上调,则提示CCSMC发生表型转化,反之称为逆表型转化。研究表明,DMED大鼠CCSMC中α-SMA等收缩型标志物表达下降,而OPN等合成型(增殖型)标志物上升,显示DMED可以促使CCSMC发生表型转化。DMED的发病机制包括血管病变、神经病变、阴茎海绵体平滑肌因素、神经递质调节、内分泌紊乱等因素。当前,大多数学者皆从血管病变方面研究DMED与CCSMC表型转化之间的关系。研究表明,CCSMC表型转化会导致阴茎海绵体结构发生改变,进而影响DMED患者的勃起功能。文章根据目前研究成果,对DMED与CCSMC表型转化相关研究进行系统回顾,以期寻求一种治疗DMED的新思路,从而更好地造福人类。

养阴活血解毒方对实验大鼠肝组织相关标志性蛋白表达的影响

目的:观察养阴活血解毒方对实验大鼠肝组织中羟脯氨酸(Hyp)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、肝细胞信号传导分子(Smad3蛋白)表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机理。方法:SD大鼠全为雄性共60只随机分成4组,即空白组、模型组、西药组、中药组,采用CCl4加花生油造成纤维化大鼠模型,通过对各组大鼠灌服相应药物及生理盐水,检测大鼠肝组织Hyp、α-SMA、Smad3含量及表达水平。结果:与模型对照组比较,中药组可以显著降低Hyp含量(P<0.01);与模型组和西药组比较,中药组可以使大鼠肝组织α-SMA表达产物减少,分别具有显著性差异(P<0.01,P<0.05);而对于Smad3的影响,中药组与模型组比较有显著性差异(P<0.01)、与西药组比较也有显著性差异(P<0.05)。结论:养阴活血解毒方对实验大鼠肝组织Hyp、α-SMA、Smad3的表达均有显著影响。

GA结合蛋白亚单位a在结肠癌中的表达及临床意义

目的探讨GA结合蛋白亚单位a(GABPA)在结肠癌中的表达及临床意义。方法纳入2007年1月-2011年12月湖北省恩施自治州中心医院确诊结肠癌患者174例,采用免疫组化方法检测结肠癌组织及对应癌旁组织中GABPA蛋白的表达情况;分析GABPA的表达和临床病理特征的关系;分析GABPA的表达与预后的相关性。结果GABPA在结肠癌组织中的阳性表达率为20.11%(35/174),而在癌旁组织中阳性表达率为55.17%(96/174),差异有统计学意义(χ^2=6.23,P<0.05);GABPA的低表达与结肠癌患者淋巴结转移、远处转移和TNM分期差异有统计学意义(χ^2/P=5.803/0.022,5.000/0.032,4.258/0.047);而与患者性别、年龄、肿瘤大小、血管侵润和分化程度差异无统计学意义(P>0.05);与GABPA高表达患者比较,GABPA低表达患者其生存天数显著缩短,差异有统计学意义(χ^2=7.15,P=0.006)。结论结肠癌组织中GABPA低表达与结肠癌的发生、发展可能有关,GABPA可能是结肠癌新的标志物及治疗靶点。