东北鹤虱提取物LEGPS-Ⅱ对小鼠巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究东北鹤虱提取物LEGPS-Ⅱ对小鼠巨噬细胞氧化损伤的保护作用。方法:采用昆明种小鼠,培养腹腔巨噬细胞(MФ),实验分为5组:正常对照组;H2O2氧化损伤组;3个浓度的LEGPS-Ⅱ(30、60、120μmol/L)保护组。用MTT法测定细胞存活率,比色法测定细胞培养液中一氧化氮(NO)含量、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、丙二醛(MDA)含量。结果:与正常对照组相比,经H2O2处理过的氧化损伤组,细胞存活率明显降低(P<0.01),NO的含量、iNOS的活力明显升高(P<0.01),T-SOD活力明显下降(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01);与H2O2损伤组相比,给LEGPS-Ⅱ各组均显著提高细胞存活率(P<0.05,P<0.01);使细胞培养液中NO的含量、iNOS的活力显著降低(P<0.05,P<0.01),T-SOD活力显著提高(P<0.05,P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01),且呈现剂量依赖性。

东北鹤虱中一个具有抗菌活性的新喹酮类生物碱

目的对东北鹤虱的化学成分进行分离和结构鉴定并进行抗菌活性测定。方法通过硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等分离方法从东北鹤虱的BuOH提取物中分离得到一个新喹酮类化合物,以有机波谱方法(1H-NMR、13C-NMR、2D-NMR、HR-MS,UV和IR等)进行结构鉴定,并以纸片琼脂扩散法进行抗菌活性测定。结果从东北鹤虱中分离出一个新喹酮类生物碱,鉴定为8-甲氧基-4-喹酮-2-羧酸,并对铜绿假单胞菌、肠致病性大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及表皮葡萄球菌具有抗菌活性。结论该化合物为一新化合物,并具有抗菌活性。

东北鹤虱中香豆素类对兔离体回肠的作用

目的 观察东北鹤虱中香豆素类对兔离体回肠的作用及对钙离子的影响。方法 采用兔离体回肠标本 ,给予不同剂量香豆素 ( CM)及维拉帕米 ( Ver) ,观察对平滑肌收缩的影响。结果 CM和 Ver可剂量依赖性地抑制乙酰胆碱 ( Ach)引起的回肠的收缩 ,非竞争性拮抗 Ca Cl2 所致回肠收缩 ,并对 Ach引起的第 1,2相收缩均有影响。结论 东北鹤虱中提取的香豆素类具有与 Ver相似的钙拮抗作用。

东北鹤虱提取物抗腹泻作用机制的探讨

目的:观察东北鹤虱提取物(LEGA)对肠道平滑肌收缩活动的影响并探讨其抗腹泻作用机制。方法:以碳末推进率为测量指标,观察LEGA对小鼠小肠蠕动及大鼠结肠推进运动的影响;以大鼠十二指肠收缩强度为指标,观察LEGA对肠管平滑肌收缩运动的影响;采用Robert实验法观察LEGA对小肠水分吸收的影响。结果:LEGA可抑制小鼠小肠蠕动及大鼠结肠推进运动(P<0.01),剂量依赖性地使大鼠十二指肠平滑肌自主收缩幅度下降(P<0.01),拮抗ACh、5-HT、BaCl2诱导的十二指肠痉挛性收缩,还促进小肠内水分的吸收(P<0.01)。结论:LEGA通过抑制肠道的过强运动、降低肠内压和调节水运动失调而缓解腹泻。

东北鹤虱水提取物对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、分泌IL-2和TNF-α的作用

目的:观察东北鹤虱水提取物(LEG-I)对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、分泌IL-2和TNF-α的作用。方法:运用噻唑兰比色(MTT)法检测LEG-I对静止状态及刀豆蛋白A(ConA)活化的淋巴细胞增殖反应的影响;用碘化丙啶染色,流式细胞术对经LEG-I作用的淋巴细胞周期进行分析;分别用MTT法和ELISA检测LEG-I刺激后静止及活化淋巴细胞分泌TNF-α和IL-2的水平。结果:LEG-I可刺激小鼠脾淋巴细胞以及被ConA活化的淋巴细胞增殖,在一定范围内具有剂量依赖性(P<0.01);相比空白对照组,LEG-I组的G0/G1期淋巴细胞比例降低,而S期和G2/M期比例增加(P<0.01);LEG-I对静止状态的淋巴细胞分泌TNF-α及IL-2无作用,而使ConA激活的淋巴细胞的分泌增加(P<0.01)。结论:LEG-I在免疫激活或免疫增强方面发挥了重要作用。

东北鹤虱多糖对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的:研究东北鹤虱多糖(LEGPS-Ⅱ)对免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞(MΦ)功能的影响。方法:采用免疫力低下小鼠,通过中性红实验,观察LEGPS-Ⅱ对小鼠静止和ConA活化的腹腔MΦ体外吞噬功能的影响;采用噻唑蓝比色法(MTT),观察LEG-PS-Ⅱ对小鼠静止和ConA活化的腹腔MΦ体外分泌IL-1β与TNF-α的影响。结果:MΦ体外吞噬实验表明,LEGPS-Ⅱ在0.015 6～0.25μg·mL-1的浓度范围内可剂量依赖性地增加静止和ConA活化的免疫力低下小鼠腹腔MΦ吞噬中性红的能力;LEGPS-Ⅱ在20～80μg·mL-1的浓度范围内可剂量依赖性地增加ConA活化的免疫低下小鼠腹腔MΦ分泌IL-1β,但不能有效刺激免疫低下小鼠静止的腹腔MΦ产生IL-1β;LEGPS-Ⅱ在10～80μg·mL-1的浓度范围内可增加静止和ConA活化的免疫力低下小鼠腹腔MΦ分泌TNF-α,且刺激作用具有剂量依赖性。结论:LEGPS-Ⅱ可以通过提高小鼠腹腔MΦ的吞噬能力,并增加IL-1β与TNF-α的分泌而增强MΦ的免疫调节功能。

东北鹤虱中平滑肌松弛作用有效部位的筛选

目的 :对东北鹤虱中具有平滑肌松弛作用的有效部位进行筛选。方法 :用大孔树脂对东北鹤虱的水提醇沉液进行分离筛选 ,得到6种溶液 ,分别以试管法及薄层色谱法进行鉴定 ,并以兔回肠收缩力为指标 ,进行有效部位的追踪。结果 :东北鹤虱中的有机酸 ,鞣质及香豆素类物质对平滑肌的收缩有抑制作用 ,以后者的作用最强。结论 :本法从东北鹤虱中筛选出具有平滑肌松弛作用的有效部位为有机酸 。